实验三 显微镜的使用和细胞形态的观察

1、实验二实验二 油镜的使用和细菌形态的观察油镜的使用和细菌形态的观察 u 实验目的实验目的 u 实验原理实验原理 u 实验材料实验材料 u 实验步骤实验步骤 u 实验报告实验报告 一、实验目的一、实验目的 1. 1. 学习并掌握油浸系物镜的使用方法学习并掌握油浸系物镜的使用方法 2. 2. 利用油镜观察细菌的形态和特殊构造利用油镜观察细菌的形态和特殊构造 二、实验原理二、实验原理 人眼观察物体的能力是有限的。一般的情况下，人眼观察物体的能力是有限的。一般的情况下， 人眼只能分辨相距人眼只能分辨相距0.1-0.2mm的两个物体。也就的两个物体。也就 是说，当两个物体相距不到是说，当两个物体相距不到

2、0.1mm的时候，人眼就的时候，人眼就 会把它们看成是一个物体了。这个极限便称为人眼会把它们看成是一个物体了。这个极限便称为人眼 的分辨本领。的分辨本领。 二、实验原理二、实验原理 物物 镜镜 低倍镜低倍镜高倍镜高倍镜油镜（油镜（OI） 镜头和玻片间以镜头和玻片间以 香柏油香柏油 代替空气代替空气 u 用香柏油取代空气的作用：用香柏油取代空气的作用： 增加视野增加视野 照明度，改善照明度，改善 观察效果观察效果 空气空气 n=1.0 玻璃玻璃 n=1.50 香柏油香柏油 n=1.52 l 当光线从其当光线从其 它介质射入空它介质射入空 气时，折射角气时，折射角 大于入射角大于入射角 物物 镜镜

3、 u 用香柏油取代空气的作用：用香柏油取代空气的作用： 显微镜分辨显微镜分辨 率示意图率示意图 物物 镜镜 0.5 能分辨的最小距离（能分辨的最小距离（D）= n sin 物物 镜镜 0.5 能分辨的最小距离（能分辨的最小距离（D）= n sin 数值孔径（数值孔径（NA） n：玻片与物镜间介质的折射率：玻片与物镜间介质的折射率 :为物镜镜口角的半数，它取决于物镜的直径和为物镜镜口角的半数，它取决于物镜的直径和 工作距离工作距离 低倍镜低倍镜高倍镜高倍镜油镜（油镜（OI） 物物 镜镜 u 用香柏油取代空气的作用：用香柏油取代空气的作用： 提高显微镜的提高显微镜的 分辨率分辨率 物物 镜镜 u

4、肉眼分辨率一般只有肉眼分辨率一般只有 0.2mm u 光学显微镜分辨率光学显微镜分辨率 0.2m u 电子显微镜可达电子显微镜可达 0.2nm u显微镜、香柏油、显微镜、香柏油、镜头清洁液（二甲苯）、镜头清洁液（二甲苯）、 擦镜纸等。擦镜纸等。 u 变形杆菌、枯草杆菌、破伤风梭菌、园褐变形杆菌、枯草杆菌、破伤风梭菌、园褐 固氮菌、肺炎球菌等固定装片固氮菌、肺炎球菌等固定装片 三、实验材料三、实验材料 四、实验步骤四、实验步骤 （一）观察前的准备（一）观察前的准备 将显微镜平稳置于实验台上，镜座距离实验将显微镜平稳置于实验台上，镜座距离实验 台边约台边约4厘米，坐正，练习用双眼观察。厘米，坐正，

5、练习用双眼观察。 （二）低倍镜观察染色装片（二）低倍镜观察染色装片 转动调节器至视野中出现清楚的物象为止。转动调节器至视野中出现清楚的物象为止。 移动装片，将合适的观察部位移至视野中央。移动装片，将合适的观察部位移至视野中央。 四、实验步骤四、实验步骤 （三）高倍镜观察（三）高倍镜观察 用细调节螺旋校正焦距使物像清晰为止，将用细调节螺旋校正焦距使物像清晰为止，将 最适宜观察部位移至视野中心。最适宜观察部位移至视野中心。 （四）油镜观察（四）油镜观察 1. 在玻片的标本的镜检部位（镜头的正下方）滴一在玻片的标本的镜检部位（镜头的正下方）滴一 滴香柏油，将油镜转至正下方，使油镜浸在油中，滴香柏油，

6、将油镜转至正下方，使油镜浸在油中，镜镜 头几乎与玻片接触，但不可压及玻片，以免损坏玻片头几乎与玻片接触，但不可压及玻片，以免损坏玻片 和镜头；和镜头； 2. 将将聚光器升至最高并开足光圈聚光器升至最高并开足光圈，用细调节螺旋调，用细调节螺旋调 节至物像清晰为止；节至物像清晰为止； 3. 如果镜台下降太快未找到物象，需从侧面注视，如果镜台下降太快未找到物象，需从侧面注视， 小心缓慢上升镜台，重新使镜头浸在油中，用粗调节小心缓慢上升镜台，重新使镜头浸在油中，用粗调节 螺旋将镜台下降（螺旋将镜台下降（切忌反转调节器切忌反转调节器），当视野中出现），当视野中出现 物象时，再用细调节螺旋调节到物象清楚为

7、止。物象时，再用细调节螺旋调节到物象清楚为止。 变形杆菌（示周生鞭毛）变形杆菌（示周生鞭毛） 鞭毛鞭毛 肺炎球菌肺炎球菌 荚荚 膜膜 菌菌 体体 破伤风梭菌破伤风梭菌 枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌 芽芽 孢孢 苏云金杆菌苏云金杆菌 （五）镜检完毕后的工作（五）镜检完毕后的工作 1. 上升镜筒，取下载玻片；上升镜筒，取下载玻片； 2. 用擦镜纸拭去镜头上的香柏油，然后用擦镜纸用擦镜纸拭去镜头上的香柏油，然后用擦镜纸 蘸蘸少许镜头清洁液（或二甲苯）少许镜头清洁液（或二甲苯）擦去镜头上残留的油擦去镜头上残留的油 迹，最后再用干净的擦镜纸擦去残留的清洁液；迹，最后再用干净的擦镜纸擦去残留的清洁液； 3. 将显微镜各部分还原，物镜呈将显微镜