碱解氮的测定.

1、土壤速效氮的测定 讲课人：史培华讲课人：史培华 系别：农艺系系别：农艺系 土壤氮素的类别土壤氮素的类别 实验的目的意义实验的目的意义 实验的测试原理实验的测试原理 仪器、材料与试剂仪器、材料与试剂 操作步骤及注意事项操作步骤及注意事项 结果计算方法结果计算方法 本节内容：本节内容： 土壤氮素的类别土壤氮素的类别 土壤中的全氮土壤中的全氮 无机氮无机氮 有机氮有机氮 无机有机氮无机有机氮 土壤中氮的组成成分（土壤中氮的组成成分（p64） 游离氮游离氮（气体氮）（气体氮） 铵态氮铵态氮 硝态氮硝态氮 亚硝态氮亚硝态氮 易水解的有机氮易水解的有机氮（氨基酸、肽、酰胺）（氨基酸、肽、酰胺） 难水解的有

2、机氮难水解的有机氮（腐殖质、核蛋白）（腐殖质、核蛋白） 黏土矿物固定的氮黏土矿物固定的氮 土壤氮素的类别土壤氮素的类别 速效氮：速效氮：土壤溶液中的铵、交换性土壤溶液中的铵、交换性铵和硝铵和硝 态氮态氮因能直接被植物根系所吸收，常被称因能直接被植物根系所吸收，常被称 为速效态氮为速效态氮。 碱解氮：碱解氮：能被当季作物利用能被当季作物利用 的氮素，包括无机氮的氮素，包括无机氮（铵态（铵态 氮、硝态氮）氮、硝态氮）和易分解的有机和易分解的有机 氮氮( (氨基酸、酰胺和易水解蛋白氨基酸、酰胺和易水解蛋白 质）质）。 全氮：全氮：土壤中氮素的总量。土壤中氮素的总量。 全全 氮氮 碱解氮碱解氮 速效氮

3、速效氮 目的意义：目的意义： 碱解扩散法碱解扩散法测定土壤速效氮实际上包括测定土壤速效氮实际上包括无机态氮无机态氮和部分和部分 有机物质中有机物质中易分解易分解的比较简单的的比较简单的有机态氮有机态氮，是，是氨态氮，氨态氮， 硝态氮，氨基酸，酰胺和易水解的蛋白质氮硝态氮，氨基酸，酰胺和易水解的蛋白质氮的总和的总和。因。因 此，此，碱解扩散法测试的实际上是土壤中的碱解氮，也称碱解扩散法测试的实际上是土壤中的碱解氮，也称 土壤水解性氮或土壤有效氮。土壤水解性氮或土壤有效氮。 碱解氮含量作为植物氮素营养较无机氮有更好的碱解氮含量作为植物氮素营养较无机氮有更好的相关性相关性 ，所以测定碱解氮比测定氨态

4、氮和硝态氮更能确切的反，所以测定碱解氮比测定氨态氮和硝态氮更能确切的反 映出近期内土壤的供氮水平。映出近期内土壤的供氮水平。 碱解扩散法测试原理碱解扩散法测试原理 在扩散皿中，于在扩散皿中，于碱性条件碱性条件和和硫酸亚铁硫酸亚铁存在下进行水存在下进行水 解还原，使易水解态氮（潜在有效氮）和硝酸态氮碱解解还原，使易水解态氮（潜在有效氮）和硝酸态氮碱解 转化为转化为NH3，NH3扩散后扩散后被被H3BO3所吸收所吸收。H3BO3吸收液吸收液 中的中的NH3再用标准再用标准硫酸溶液滴定硫酸溶液滴定，硫酸与硼酸氨反应完全，硫酸与硼酸氨反应完全 后，硫酸过量一滴溶液显红色，即滴定终点。由此计算后，硫酸过

5、量一滴溶液显红色，即滴定终点。由此计算 土壤中碱解氮的含量。土壤中碱解氮的含量。 扩散皿内室反应：扩散皿内室反应： NH3+H3BO3NH4H2BO3 滴定过程的反应：滴定过程的反应： NH4H2BO3+H2SO4H2BO3+(NH4)2SO4 仪器和材料仪器和材料 滴定管滴定管 半自动酸式滴定管半自动酸式滴定管 滴定前首先要检查滴定管滴定前首先要检查滴定管 的的下端是否充有气泡下端是否充有气泡。若。若 有，首先要把气泡排出。有，首先要把气泡排出。 滴定时，标准酸要逐滴加滴定时，标准酸要逐滴加 入，在接近终点时，入，在接近终点时，用玻用玻 璃棒从滴定管尖端沾取少璃棒从滴定管尖端沾取少 量量标准

6、酸滴入扩散皿内。标准酸滴入扩散皿内。 易产生易产生 气泡处气泡处 滴定注意事项滴定注意事项 所需试剂：所需试剂： 1） 1.0mol/L氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液：称取化学纯氢氧化钠：称取化学纯氢氧化钠40克，用水溶解克，用水溶解 后冷却定容到后冷却定容到1L。 2）混合指示剂混合指示剂：分别称取：分别称取0.066g甲基红和甲基红和0.099g溴甲酚绿，放入玛溴甲酚绿，放入玛 瑙研钵，并用瑙研钵，并用100ml 95%乙醇溶解。乙醇溶解。 3）2%硼酸硼酸-指示剂溶液指示剂溶液：称：称20克硼酸用热蒸馏水（约克硼酸用热蒸馏水（约60）溶解）溶解 ，冷却稀释到，冷却稀释到950mL，添加，添加2

7、0ml混合指示剂，用稀释盐酸或混合指示剂，用稀释盐酸或NaOH 调节调节pH至至4.5（定氮混合指示剂显淡红色），最后定容到（定氮混合指示剂显淡红色），最后定容到1L。 4） 0.01mol/L硫酸标准溶液硫酸标准溶液：先配成：先配成1/2H2SO4=0.1mol/L的溶液，的溶液， 再准确稀释再准确稀释10倍，浓度为：倍，浓度为：c(1/2H2SO4)=0.01mol/L。 5） 碱性胶液：碱性胶液：40g阿拉伯胶溶于阿拉伯胶溶于50mL水（温热促融并冷却），加水（温热促融并冷却），加 入入20mL甘油和甘油和20mL饱和饱和K2CO3水溶液，搅匀，冷却。离心取清液水溶液，搅匀，冷却。离心取

8、清液 备用。备用。 6） 硫酸亚铁粉。将硫酸亚铁硫酸亚铁粉。将硫酸亚铁(FeSO47H2O)磨细，装入密闭瓶。磨细，装入密闭瓶。 操作步骤操作步骤 1. 称样，加还原剂：称取称样，加还原剂：称取20目风干目风干土样土样2.00g和和硫酸亚铁硫酸亚铁0.2g，均匀平，均匀平 铺于扩散皿外室（切忌避免土样飞入扩散皿内室）。铺于扩散皿外室（切忌避免土样飞入扩散皿内室）。 2. 加吸收剂加吸收剂-加碱加碱-封闭：取封闭：取2.0ml 硼酸硼酸-指示剂溶液指示剂溶液加入扩散皿内室。加入扩散皿内室。 然后在扩散皿外室的边缘然后在扩散皿外室的边缘均匀涂上碱性胶液。均匀涂上碱性胶液。盖上毛玻璃（盖上毛玻璃（毛

9、面毛面 朝下朝下），旋转数次，使），旋转数次，使粘合完全。粘合完全。转开毛玻璃的一边，使扩散皿转开毛玻璃的一边，使扩散皿 的外室露出一条狭缝，并的外室露出一条狭缝，并迅速迅速加入加入1.0mol/L NaOH溶液溶液10ml于扩于扩 散皿散皿外室外室，立即盖严立即盖严，轻轻旋转扩散皿，使碱液盖住所有土壤。，轻轻旋转扩散皿，使碱液盖住所有土壤。 用橡皮筋圈紧，使毛玻璃固定。用橡皮筋圈紧，使毛玻璃固定。 3. 放入恒温箱：放入恒温箱：平放平放在在401的的恒温箱恒温箱中，中，碱解扩散碱解扩散240.5 h。 4. 滴定：取出扩散皿，用滴定：取出扩散皿，用0.01mol/L 1/2H2SO4标准溶液

10、滴定，由蓝色标准溶液滴定，由蓝色 突变到微红色为终点，并记下硫酸用量。突变到微红色为终点，并记下硫酸用量。 5. 空白试验：要做空白试验，方法同上，只是不加土样，用于校正试空白试验：要做空白试验，方法同上，只是不加土样，用于校正试 剂和滴定误差。剂和滴定误差。 注意事项注意事项 微量扩散皿使用前必须微量扩散皿使用前必须彻底清洗彻底清洗。利用小刷去除残。利用小刷去除残 余后，冲洗，先后浸泡于软性清洁剂及稀盐酸中，余后，冲洗，先后浸泡于软性清洁剂及稀盐酸中， 然后以自来水充分冲洗，最后再用蒸馏水淋洗。然后以自来水充分冲洗，最后再用蒸馏水淋洗。 由于碱性胶液的由于碱性胶液的碱性很强碱性很强，在涂胶液和洗涤扩散皿，在涂胶液和洗涤扩散皿 时，必须细心，慎防污染时，必须细心，慎防污染内室内室，致使造成误差。，致使造成误差。 添加添加NaOH时，时，防止内室中防止内室中硼酸硼酸-指示剂遭受碱液指示剂遭受碱液污污 染染。 滴定时要用小滴定时要用小玻璃棒小心搅动玻璃棒小心搅动吸收液，吸收液，切不可摇动切不可摇动 扩散皿扩散皿。 结果计算结果计算 思考题思考题 1. 1. 碱解扩散法测定土壤速效氮包括哪些形态的氮？碱解扩