血清成分分析

1、 血清胆固醇的定量测定 血清清蛋白与-球蛋白的分离与鉴定 血清谷丙转氨酶活性的鉴定及活力测定 血清胆固醇的定量测定（邻苯二甲醛法） 胆固醇及其酯在硫酸存在下与邻苯二甲醛 作用，产生的紫红色物质对550nm波长的 光有最大吸收。100ml样品中胆固醇含量在 400mg之内与吸光度呈良好线性关系。 实验数据 编号01 234 吸光度值00.1770.4050.6040.745 对照家鸡血清对照乌鸡血清 吸光度值00.03700.053 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 0100200300400500 血清胆固醇含量标准曲线 y = 0.0019x 100ml血清中总胆固醇含量 吸光度值 系

2、列1 线性 (系列1) 实验结果 标准曲线：y=0.0019x 家鸡的血清总胆固醇含量：19.47mg/100ml 乌鸡的血清总胆固醇含量：27.89mg/ml 查资料得：鸡的血清胆固醇含量在51 196mg/100ml之间是在可信范围。 分析与讨论 实验所得的数据偏低，可能的原因： 1.试管未干燥，沾有较多的水分，使得标准 胆固醇应用液被稀释，浓度偏低。 2.此次所用的血清本身胆固醇含量比一般的 个体偏低。 3.取血清的过程中，有些残留在试管壁上。 血清清蛋白与-球蛋白的盐析、透析与浓缩 上清液（主要是清蛋白 ） 离心 血清离心 取沉淀 沉淀（主要是-球蛋白）离心取 沉淀 将得到的样品装入透

3、析袋中，置于烧杯中，用流 水冲刷一小时。 血清清蛋白与-球蛋白的鉴定（醋酸纤维素薄膜电 泳法） 醋酸纤维素薄膜是用二乙酸纤维素制成的， 它具有均一的泡沫样的结构，厚度仅为 120m，有强渗透性，对分子移动无阻力。 浸泡点样电泳染色漂洗 实验结果（家鸡血清电泳图谱） 分析与讨论 查资料得：电泳图谱中，清蛋白与点样线 的距离比球蛋白远。 1.条带的颜色较深，是因为漂洗不够彻底。 2.全血清条带有多条重叠，是因为血清中 有多种蛋白。 3.血清清蛋白条带出现两条线，可能是因为 盐析时，球蛋白中掺有其它蛋白。 谷丙转氨酶活性的鉴定 观察肝脏中谷丙转氨酶所催化的氨基 移换反应。通过纸层析法检查底物谷 氨酸

4、的减少和产物丙氨酸的生成。 实验结果（家鸡肝脏） 分析与讨论 酶液处有两个条带，离圆心较近的为谷氨 酸，较远的为丙氨酸，而且与另一端的谷 氨酸相比，量较少。煮沸的酶液只有一个 条带，是因为谷丙转氨酶已失活，无法将 谷氨酸转换为丙氨酸。条带附近还是有浅 色的痕迹，可能是因为点样时，不小心碰 到了别处。 血清谷丙转氨酶活力单位测定 本实验用丙氨酸和-酮戊二酸为底物，经转 氨作用生成谷氨酸和丙酮酸。丙酮酸与2， 4-二硝基苯肼作用生成2，4-二硝基苯腙， 此物质碱性条件下呈棕红色，其颜色的深 浅与丙酮酸的含量成正比，可用比色法进 行定量测定。通过与标准溶液的比较，即 可计算出酶的活力单位数。 实验数

5、据 012345 吸光度值00.4250.6510.6220.7170.866 家鸡对照管乌鸡对照管 吸光度值0.01900.0300 实验结果 标准曲线：y=0.0019x 家鸡的GPT活力单位数：10 乌鸡的GPT活力单位数：30 分析与讨论 查资料知道实验所得的数据偏低， 可能的原因： 1.试管未干燥，导致待测液浓度降低。 2.静置前，未将待测液充分摇匀，导致待测 液浓度分布不均。 3.可能保温时间不够，导致反应不够充分。 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 0100200300400500 血清胆固醇含量标准曲线 y = 0.0019x 100ml血清中总胆固醇含量 吸光度值 系列1 线性 (系列1) 实验结果 标准曲线：y=0.0019x 家鸡的GPT活力单位数：10 乌鸡的GPT活力单位数：30 分析与讨论 查资料知道实验所得的