崔洋止血检验4-8

1、城乡对口支援临床检验技术标准制定及培训 血栓与止血实验室检查血栓与止血实验室检查 中国医科大学附属第四医院中国医科大学附属第四医院 崔洋崔洋 内容提要内容提要 v血栓与止血检验基础理论血栓与止血检验基础理论 v血栓与止血的常用筛查试验血栓与止血的常用筛查试验 v血栓与止血检验的常用检测方法血栓与止血检验的常用检测方法 v血栓与止血实验的质量保证血栓与止血实验的质量保证 血管中流动的血液为什么不凝固血管中流动的血液为什么不凝固 破损的血管为什么能止血破损的血管为什么能止血 止血与凝血调节止血与凝血调节抗凝与纤溶的调节抗凝与纤溶的调节 正常生理状态正常生理状态 低凝状态低凝状态 出血倾向出血倾向

2、血栓前状态血栓前状态 血栓形成血栓形成 正常生理条件下正常生理条件下, ,人体内凝血系统与抗凝和纤溶人体内凝血系统与抗凝和纤溶 与抗纤溶系统之间处于动态平衡与抗纤溶系统之间处于动态平衡, ,以保持机体不致出血以保持机体不致出血 , ,无血栓形成无血栓形成, ,使血液呈流动状态循环于全身。当平衡使血液呈流动状态循环于全身。当平衡 失调时，便引起出血或血栓形成。失调时，便引起出血或血栓形成。 v 血管壁血管壁 v 血小板血小板 v 凝血因子凝血因子 v 抗凝系统抗凝系统 v 纤溶系统纤溶系统 凝血与止血的病理生理基础凝血与止血的病理生理基础 血管壁的止血作用 生理性止血机制 v血管壁的止血作用血管

3、壁的止血作用 血管受损血管受损 .神经反射神经反射管腔收缩管腔收缩血流变慢血流变慢 出血出血 / /停止停止 .内皮细胞分泌内皮细胞分泌vWFvWF、FIBFIB 促进促进pltplt粘附粘附 .释放释放 F F启动外源性凝血途径启动外源性凝血途径 .暴露内皮下胶原暴露内皮下胶原 促进血小板粘附促进血小板粘附 启动内源性凝血途径启动内源性凝血途径 当血管壁受损后的一系列变化 正常止血过程正常止血过程 血小板止血 血血小小板板粘粘附附(电电镜镜象) 血血小小板板聚聚集集（扫扫描描电电镜镜照照片片） 血小板参与止血要通过三个步骤才能完成： 血小板与胶原物质间的粘附及血小板的聚血小板与胶原物质间的粘

4、附及血小板的聚 集形成血小板血栓，以防止血液从损伤的血管集形成血小板血栓，以防止血液从损伤的血管 内皮外流内皮外流-第一聚集相；第一聚集相； 加速内皮损伤处的凝血因子活化，使纤维加速内皮损伤处的凝血因子活化，使纤维 蛋白在损伤处沉着蛋白在损伤处沉着-第二聚集相；第二聚集相； 释放释放血小板内容物，活化更多的血小板，血小板内容物，活化更多的血小板， 并促使血管收缩以利伤口的愈合。并促使血管收缩以利伤口的愈合。 血小板在血栓与止血中的作用血小板在血栓与止血中的作用 血小板的结构和生化组成血小板的结构和生化组成 （1）表面结构表面结构 主要有细胞外衣和细胞膜组成主要有细胞外衣和细胞膜组成 v 细胞外

5、衣覆盖于血小板的外表面，主要由糖蛋白（细胞外衣覆盖于血小板的外表面，主要由糖蛋白（GP）的组成，是）的组成，是 许多血小板受体所在部位。许多血小板受体所在部位。 v 细胞膜主要由蛋白质（糖蛋白）和脂质组成。细胞膜主要由蛋白质（糖蛋白）和脂质组成。 血小板与胶原物质间的粘着，以血小板与胶原物质间的粘着，以 防止血液从损伤的血管内皮外流防止血液从损伤的血管内皮外流 加速内皮损伤处的凝血因子活化，使纤维蛋白在加速内皮损伤处的凝血因子活化，使纤维蛋白在 损伤处沉着损伤处沉着 （2 2）骨架系统和收缩蛋白：）骨架系统和收缩蛋白： 电镜下，血小板的胞质中可见微管、微丝及膜下细丝等，它们构电镜下，血小板的胞

6、质中可见微管、微丝及膜下细丝等，它们构 成血小板的骨架系统，在成血小板的骨架系统，在维持血小板的形态、释放反应和收缩中起维持血小板的形态、释放反应和收缩中起 重要作用。重要作用。 （3 3）细胞器和内容物：）细胞器和内容物： 释放血小板内容物，活化更多的血小板。并促使血管收缩以利伤释放血小板内容物，活化更多的血小板。并促使血管收缩以利伤 口的愈合。口的愈合。 v 颗粒颗粒含有含有 -TG-TG，PF4PF4，纤维蛋白原，因子，纤维蛋白原，因子， v 致密体致密体含有含有ADPADP，ATPATP， 5-HT5-HT，Ca2+Ca2+（促聚剂）（促聚剂） v 溶酶体颗粒溶酶体颗粒 三种颗粒中含有

7、多种物质与血小板功能相关。三种颗粒中含有多种物质与血小板功能相关。 血小板的结构和生化组成血小板的结构和生化组成 生理性止血机制 血管受损（胶原暴露）血管受损（胶原暴露） 血小板黏附、聚集、释放血小板黏附、聚集、释放 黏附黏附、聚集与血小板膜糖蛋白、聚集与血小板膜糖蛋白(GPb-+ vWF 、 GPb/a +Fg)有关，第一聚集相有关，第一聚集相 血小板致密颗粒血小板致密颗粒 ADP、ATP、5-HT、抗纤溶酶抗纤溶酶 血小板血小板 颗粒颗粒 PF4、 -TG、VWF、TSP（凝血酶敏感凝血酶敏感 蛋白），蛋白），第二聚集相第二聚集相 血小板促凝活性：血小板促凝活性：PF3(为为a、a、Xa的

8、活化提供磷的活化提供磷 脂催化表面，直接参与凝血过程脂催化表面，直接参与凝血过程)。 血小板血块收缩功能：血小板收缩蛋白血小板血块收缩功能：血小板收缩蛋白 正常止血过程正常止血过程 血小板粘附于内皮下胶原组织、血小板粘附于内皮下胶原组织、 血管收缩反射血管收缩反射 基底膜上，并聚集（堵塞伤口止血）基底膜上，并聚集（堵塞伤口止血） 释放组织凝血活酶释放组织凝血活酶 进一步发生粘性变性，并释放：进一步发生粘性变性，并释放： 血管收缩血管收缩 5-HT 5-HT 、肾上腺素、肾上腺素 进一步增强进一步增强 儿茶酚胺儿茶酚胺 血管伤口闭合，缩小血管伤口闭合，缩小 血流减慢出血减少血流减慢出血减少 内源

9、性凝血开始内源性凝血开始外源性凝血开始外源性凝血开始 血小板血小板3 3因子因子 凝血酶凝血酶纤维蛋白纤维蛋白 ADP ADP 可逆性血小板聚集可逆性血小板聚集不可逆血小板血栓不可逆血小板血栓不可逆纤维蛋白血栓不可逆纤维蛋白血栓 血块收缩血块收缩 （第一相聚集）（第一相聚集）（白色血栓）（白色血栓） （红色血栓）（红色血栓） 血栓收缩蛋白血栓收缩蛋白结构重排结构重排 血小板向连接点血小板向连接点 挤出细胞间液挤出细胞间液 发生内在收缩发生内在收缩 血管损伤血管损伤 一期止血一期止血二期止血二期止血 止血、血栓形成止血、血栓形成 凝血因子的凝血过程凝血因子的凝血过程 瀑布学说：瀑布学说： 凝血因

10、子的活化凝血因子的活化 凝血酶的生成凝血酶的生成 纤维蛋白的形成纤维蛋白的形成 三条途径：三条途径： 外源、内源、共同途径外源、内源、共同途径 凝血过程：凝血过程分为三期：凝血过程：凝血过程分为三期： v 第一期：凝血活酶形成。第一期：凝血活酶形成。 v 第二期：凝血酶形成。第二期：凝血酶形成。 v 第三期：纤维蛋白形成第三期：纤维蛋白形成。 凝血因子（12个） 凝血因子（凝血因子（1212个）个） 凝血因子凝血因子 VitKVitK依赖因子依赖因子、 接触凝血因子接触凝血因子、激肽释放酶原、激肽释放酶原 （PKPK）、高分子量激肽原（）、高分子量激肽原（HMWKHMWK）；）；它们的共同特它

11、们的共同特 点是通过接触反应点是通过接触反应启动内源凝血途径启动内源凝血途径。 对凝血酶敏感的凝血因子对凝血酶敏感的凝血因子、 ，它们的共同特点是，它们的共同特点是对凝血酶敏感对凝血酶敏感（凝血酶（凝血酶 催化纤维蛋白原成纤维蛋白）。催化纤维蛋白原成纤维蛋白）。 其他因子其他因子、。正常情况下，。正常情况下，（组（组 织因子）不存在于血液中。织因子）不存在于血液中。即即CaCa离子离子 凝血因子凝血因子 常用名常用名 纤维蛋白原纤维蛋白原 凝血酶原凝血酶原 易变因子易变因子 稳定因子稳定因子 抗血友病因子抗血友病因子 A 抗血友病因子抗血友病因子 B Stuart因子因子 Rosenthal因

12、子因子 Hageman因子因子 纤维蛋白稳定因子纤维蛋白稳定因子 活化活化 酶酶 瀑布学说瀑布学说 a 抗抗 凝凝 系系 统统 抗凝血酶抗凝血酶（AT-） v蛋白蛋白C C系统：包括系统：包括蛋白蛋白C C、蛋白、蛋白S S、 血栓调节蛋白（血栓调节蛋白（TMTM）及及活化蛋白活化蛋白C C抑抑 制物。制物。 APCAPC v抗凝机制：凝血酶与TM以1：1比例结合形成复合物，后者使PC释放出小肽，生成活化蛋白C（APC） 。APC在PS的辅助下，形成FPS-APC-磷脂复合物，该复合物可以灭活Fa、Fa；抑制Fa与血小板 膜磷脂的结合；激活纤溶系统；增强AT-与凝血酶的结合。 抑制凝血因子（使

13、抑制凝血因子（使 a,aa,a失活）失活） 抑制抑制FaFa与血小板膜与血小板膜 磷脂的结合磷脂的结合 激活纤溶系统；激活纤溶系统； 增强增强AT-AT-与凝血酶与凝血酶 的结合。的结合。 纤维蛋白溶解机制（纤溶）纤维蛋白溶解机制（纤溶） 纤维蛋白溶解系统纤维蛋白溶解系统 v 包括：纤溶酶原包括：纤溶酶原（PLGPLG） ， 纤溶酶（纤溶酶（PLPL） 纤溶酶原激活物（纤溶激活酶纤溶酶原激活物（纤溶激活酶) 纤溶酶原激活物的抑制物纤溶酶原激活物的抑制物（PAI） 纤溶酶抑制物纤溶酶抑制物 纤维蛋白溶解系统纤维蛋白溶解系统 将沉积在血管内的纤维蛋白溶解而保将沉积在血管内的纤维蛋白溶解而保 持血管

14、畅通，防止血栓形成或使已形成的持血管畅通，防止血栓形成或使已形成的 血栓溶解。血栓溶解。 纤溶系统异常表现为纤溶活性增高纤溶系统异常表现为纤溶活性增高 引起的出血以及活性减低而引起的血栓形引起的出血以及活性减低而引起的血栓形 成成 。 分解分解 凝血酶凝血酶 凝固凝固 纤维蛋白原降解产物纤维蛋白原降解产物(FgDP)(FgDP)和纤维蛋白降解产物和纤维蛋白降解产物(FbDP)(FbDP)统称为统称为纤维蛋白纤维蛋白( (原原) )降解产物降解产物 (FDPs)(FDPs) 交联交联 纤维蛋白纤维蛋白( (原原) )降解产物降解产物(FDPs)(FDPs) FDP（Fibrinogen degr

15、adation products) 纤维蛋白原降解产物纤维蛋白原降解产物(FgDP)(FgDP)和纤维蛋白降解产物和纤维蛋白降解产物 (FbDP)(FbDP)统称为纤维蛋白统称为纤维蛋白( (原原) )降解产物降解产物(FDPs)(FDPs) FDP FDP对血液凝固和血小板的功能均有一定的影响对血液凝固和血小板的功能均有一定的影响 。其中所有的碎片均。其中所有的碎片均可抑制血小板的聚集和释放反可抑制血小板的聚集和释放反 应应。碎片。碎片X(XX(X) )因与可溶性纤维蛋白单体结构相似，因与可溶性纤维蛋白单体结构相似， 故故可与可与FgFg竞争凝血酶竞争凝血酶；碎片；碎片Y(YY(Y) )和和

16、D D可抑制纤维蛋白可抑制纤维蛋白 单体的聚合单体的聚合，碎片，碎片E E可抑制凝血活酶的生成可抑制凝血活酶的生成 纤溶酶纤溶酶 (-) 内源性内源性 IXaIXa VIIIVIII 外源性外源性 VIIaVIIa 凝血酶凝血酶 纤溶酶原纤溶酶原 纤溶酶原纤溶酶原 激活物激活物(PA)(PA) 纤溶酶原纤溶酶原 激活抑制物激活抑制物 (PAI)(PAI) a a2 2- - 抗纤溶酶抗纤溶酶 纤维蛋白降解产物纤维蛋白降解产物 XX Xa 组织因子抑制作用组织因子抑制作用 (TPFI)(TPFI) 凝血酶原凝血酶原 纤维蛋白原纤维蛋白原 (-) (-) a 凝血系统是抗凝与纤溶系统的纽带凝血系统

17、是抗凝与纤溶系统的纽带 凝血系统的启动也启动纤溶凝血系统的启动也启动纤溶( (内激活途径内激活途径) ) 也启动抗凝也启动抗凝(IIa-TM PC)(IIa-TM PC) 凝血系统的终产物凝血系统的终产物(Fb)(Fb)也启动纤溶系统也启动纤溶系统 三者达到平衡三者达到平衡 血栓前状态或血栓形成血栓前状态或血栓形成 出血性疾病出血性疾病 凝血、抗凝及纤溶系统的关系凝血、抗凝及纤溶系统的关系 检测方法的选择检测方法的选择 血管壁和血小板的筛选试验血管壁和血小板的筛选试验 一期止血缺陷实验是指检查血小板和血管内一期止血缺陷实验是指检查血小板和血管内 皮功能及血小板和血管内皮的相互作用是否正常皮功能

18、及血小板和血管内皮的相互作用是否正常 的实验。不涉及凝血因子及凝血方面的障碍。的实验。不涉及凝血因子及凝血方面的障碍。 选用选用: :出血时间（出血时间（BTBT）、）、 血小板计数（血小板计数（PLTPLT） 检测方法的选择检测方法的选择 凝血和抗凝血的筛选试验凝血和抗凝血的筛选试验 二期止血缺陷是指凝血因子缺乏和抗凝物二期止血缺陷是指凝血因子缺乏和抗凝物 质存在所引起的止血异常质存在所引起的止血异常. . 主要选用主要选用: :血浆凝血酶原时间（血浆凝血酶原时间（PTPT）、）、 活化部分凝血活酶时间活化部分凝血活酶时间(APTT)(APTT) 纤维蛋白原测定（纤维蛋白原测定（FgFg）

19、检测方法的选择检测方法的选择 纤溶活性的筛选试验纤溶活性的筛选试验 主要选用主要选用: : 血浆凝血酶时间（血浆凝血酶时间（TTTT）、）、 血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（3P3P）、）、 血浆血浆D-D-二聚体测定二聚体测定(D-D) (D-D) 、 血浆纤维蛋白（原）降解产物测定（血浆纤维蛋白（原）降解产物测定（FDPsFDPs） 出血时间出血时间（Bleeding time， BT） 【原理和方法原理和方法】 国际标准化国际标准化出血时间测定器法出血时间测定器法(TBT)(TBT) 出血时间出血时间（Bleeding time， BT） 【报告方式报告方式】 2

20、.59.5min （l0min为延长）为延长） v注意事项：试验前一周患者应停服阿司匹林、噻氯吡注意事项：试验前一周患者应停服阿司匹林、噻氯吡 啶等抗血小板的药物。啶等抗血小板的药物。 出血时间出血时间（Bleeding time， BT） 【临床意义临床意义】 1 1、延长：、延长： 血小板减少血小板减少 血小板功能缺陷所致血小板功能缺陷所致 v先天性血小板功能异常，如血小板无力症、血小板贮存池先天性血小板功能异常，如血小板无力症、血小板贮存池 病病 v获得性血小板功能异常，如尿毒症、药物影响、异常蛋白获得性血小板功能异常，如尿毒症、药物影响、异常蛋白 血症、骨髓增生性疾病；血症、骨髓增生性

21、疾病； 血管性血友病血管性血友病：缺乏：缺乏vWFvWF，影响血小板粘附；，影响血小板粘附； 严重的凝血因子异常严重的凝血因子异常：但：但BTBT不是凝血因子是否缺陷不是凝血因子是否缺陷 的筛查实验。的筛查实验。 2 2、正常：、正常：不能完全排除初期止血缺陷不能完全排除初期止血缺陷 3 3、缩短：、缩短：严重的血栓前状态或严重的血栓前状态或DICDIC等等 出血时间出血时间（BT） 常见一期止血缺陷筛检结果分析常见一期止血缺陷筛检结果分析 出血时间延长合并出血时间延长合并 血小板计数血小板计数 减少减少 血小板减少血小板减少 原发性原发性/继发性继发性 血小板减少症血小板减少症 正常正常 血

22、小板功能缺陷血小板功能缺陷 遗传性遗传性/ 获得性获得性 血小板功能缺陷血小板功能缺陷 某些凝血因子缺乏某些凝血因子缺乏 遗传性遗传性/ 获得性获得性 vWF缺陷缺陷 血管性血友病血管性血友病 遗传性遗传性/ 获得性获得性 低（无）纤维蛋白原低（无）纤维蛋白原 低（无）纤维蛋白原血症低（无）纤维蛋白原血症 增多增多 血小板增多血小板增多 原发性原发性/继发性继发性 血小板增多但功能血小板增多但功能 障碍障碍 原性血小板原性血小板 减少性紫癜减少性紫癜 血小板无力症血小板无力症 束臂试验（束臂试验（CFTCFT） v 原理：原理： 通过前臂局部加压，使静脉血流受阻，给予毛细血通过前臂局部加压，使

23、静脉血流受阻，给予毛细血 管以负荷，观察前臂皮肤一定范围内新出现的出血点数管以负荷，观察前臂皮肤一定范围内新出现的出血点数 目，来目，来估计血管壁的完整性及其脆性估计血管壁的完整性及其脆性。 v 参考值参考值： 5cm直径圆圈内新出血点的数目：直径圆圈内新出血点的数目： 男性少于男性少于5个；女性及儿童少于个；女性及儿童少于10个。个。 v 临床意义临床意义： 新出血点的数目超过正常为阳性，见于：新出血点的数目超过正常为阳性，见于： 血管壁结构和（或）功能缺陷，如：过敏性紫癜、单血管壁结构和（或）功能缺陷，如：过敏性紫癜、单 纯性紫癜（纯性紫癜（cap脆性增加）及其他血管性紫癜。脆性增加）及其

24、他血管性紫癜。 血小板的量和（或）质异常，如：血小板减少症、血小血小板的量和（或）质异常，如：血小板减少症、血小 板增多症、先天性（遗传性）和获得性血小板功能缺陷板增多症、先天性（遗传性）和获得性血小板功能缺陷 症。症。 血管性血友病（血管性血友病（vWF）。）。 束臂试验（束臂试验（CFTCFT） 凝血酶原时间凝血酶原时间 (Prothrombin time， PT) in Bloodin Plasma PT 试剂 试剂 Extrinsic System Measure Clotting Time without 组织组织因子 因子 Calcium (Ca2+) without Normal

25、 Range 10-13 sec 37 Blood Sampling Trisodium Citrate without v原理：原理：受检血浆中加入钙离子和组织因子（组织凝血受检血浆中加入钙离子和组织因子（组织凝血 活酶试剂），观察血浆凝固时间。活酶试剂），观察血浆凝固时间。反映反映 外源性凝血系外源性凝血系 统有无异常的试验。检查统有无异常的试验。检查。 【报告方式报告方式】 1 1PTPT时间（时间（秒秒）：一定要做正常对照！）：一定要做正常对照！ 比正常参考比正常参考延长秒延长秒有临床意义。有临床意义。 2 2凝血酶原时间比值凝血酶原时间比值(PT ratio(PT ratio，PTR

26、)PTR)： 被检者血浆被检者血浆PT(s)/PT(s)/正常参比血浆正常参比血浆PT(s)PT(s) 参考值为参考值为1.001.000.150.15 凝血酶原时间凝血酶原时间 (Prothrombin time， PT) 3 3国际标准化比值国际标准化比值： (international normalized ratio，INR) INR=PTRISI 口服抗凝药的监测：不同情况下抗凝治 口服抗凝药的监测：不同情况下抗凝治 疗要求不同，一般疗要求不同，一般 INR 2-3INR 2-3 国际敏感度指数国际敏感度指数 （international sensitivity index） 每个厂

27、家的试剂都有自己的每个厂家的试剂都有自己的ISI值值 凝血酶原时间凝血酶原时间 (Prothrombin time， PT) 外源凝血因子有无缺乏的常用筛选试验。外源凝血因子有无缺乏的常用筛选试验。 延长：延长： 缺乏一定延长，后续的共同途径部分的凝血因子缺乏一定延长，后续的共同途径部分的凝血因子 （、V V、X X及纤维蛋白原及纤维蛋白原) )缺乏也延长。缺乏也延长。 很少见。很少见。 肝脏疾病：以上因子全在肝中合成，因而肝脏疾病时，肝脏疾病：以上因子全在肝中合成，因而肝脏疾病时， PTPT延长。所以延长。所以PTPT也是肝功能的指标。也是肝功能的指标。 维生素维生素K K缺乏症：缺乏症：、

28、V V、X X是依赖是依赖VkVk的凝血因子，的凝血因子， 如果如果VkVk缺乏也将缺乏也将PTPT延长延长 VkVk缺乏见于：胆石症、胆道肿瘤、慢性肠炎、偏食、缺乏见于：胆石症、胆道肿瘤、慢性肠炎、偏食、 2 27 7月龄的新生儿以及长期服用广谱抗生素的患者等月龄的新生儿以及长期服用广谱抗生素的患者等 凝血酶原时间凝血酶原时间 (PT) 【临床意义临床意义】 ： 血循环中抗凝物质增加，如肝素或血循环中抗凝物质增加，如肝素或FDPFDP增多等。增多等。DICDIC和和 原发性纤溶时，由于原发性纤溶时，由于FDPFDP生成增加，生成增加，FDPFDP有较强的抗凝能有较强的抗凝能 力，故使力，故使

29、PTPT延长。延长。 v 所以所以PTPT是诊断是诊断DICDIC的一个重要的筛选实验的一个重要的筛选实验。 用于香豆素类等口服抗凝剂的监控，一般认为以维持用于香豆素类等口服抗凝剂的监控，一般认为以维持 PTPT值在参考值的值在参考值的2 2倍左右（倍左右（1.31.32.52.5倍）即倍）即252530s30s，或，或 PTRPTR为为1.31.31.51.5（最大不超过（最大不超过2 2），），INRINR为为2.02.03.03.0为宜。为宜。 INRINR：监测口服抗凝剂用量的首选指标：监测口服抗凝剂用量的首选指标 ：意义不大：意义不大 见于高凝状态见于高凝状态(DIC(DIC早期早期

30、) )及血栓性疾病、口服避孕药。及血栓性疾病、口服避孕药。 凝血酶原时间凝血酶原时间 (PT) 【临床意义临床意义】 凝血酶原时间凝血酶原时间 (PT)(PT)注意事项：注意事项： 活化部分凝血酶时间测定活化部分凝血酶时间测定 (APTT) in Blood in Plasma without without without APTT Reagent Activator Intrinsic System Measure Clotting Time Ellagic acid, silica etc. Calcium (Ca 2+) Normal Range 20-25 sec CaCl2 Pho

31、spholipid Fibrin 37 Ca2+, PL Ca2+, PL Blood Sampling Trisodium Citrate 原理：原理：血浆中加入血浆中加入APTT试剂（接触因子激活剂、部分磷脂）、钙离子，观察凝血时间。试剂（接触因子激活剂、部分磷脂）、钙离子，观察凝血时间。 内源性凝血系统最常用筛选试验。内源性凝血系统最常用筛选试验。 【检测方法及方法学评价检测方法及方法学评价】 方法：凝固法（手工法、仪器法）方法：凝固法（手工法、仪器法） APTTAPTT是检测内源性凝血系统有无异常的是检测内源性凝血系统有无异常的 最常用的灵敏而简便的筛检试验，能检出因最常用的灵敏而简便

32、的筛检试验，能检出因 子子25%25%的轻型血友病。血凝仪测定的轻型血友病。血凝仪测定APTTAPTT， 其测定速度和结果的准确性、灵敏度均高于其测定速度和结果的准确性、灵敏度均高于 试管法，并易于标准化。试管法，并易于标准化。 【报告方式报告方式】 1 1APTTAPTT时间（秒）：要做正常对照时间（秒）：要做正常对照 比正常对照血浆比正常对照血浆延长延长1010秒秒有临床意义有临床意义 内源凝血系统常用的筛选试验内源凝血系统常用的筛选试验 延长：延长： 见于内源性凝血途径（见于内源性凝血途径（1212、1111、9 9、8 8因子缺乏），因子缺乏），8 8因因 子缺乏是血友病甲，子缺乏是血

33、友病甲，9 9因子缺乏是血友病乙；所以因子缺乏是血友病乙；所以APTTAPTT 是血友病的过筛实验。是血友病的过筛实验。 共同途径的凝血因子（共同途径的凝血因子（、V V、X X及纤维蛋白原及纤维蛋白原) )缺乏也缺乏也 延长延长; ; 在肝脏疾病：以上因子全在肝中合成，因而肝脏在肝脏疾病：以上因子全在肝中合成，因而肝脏 疾病时，疾病时，APTTAPTT延长。所以延长。所以APPTAPPT也是肝功能的指标也是肝功能的指标 肝素抗凝治疗。肝素抗凝治疗。 【临床意义】 延长：延长： 血管性血友病：由于患者血管性血友病：由于患者vWFvWF缺陷，使缺陷，使FF不稳定，导致不稳定，导致 FF活性减低，

34、故活性减低，故APTTAPTT延长。延长。 纤溶亢进：原发性和继发性纤溶亢进（如纤溶亢进：原发性和继发性纤溶亢进（如DICDIC），产生大），产生大 量的量的FDPFDP，使，使APTTAPTT延长延长。 异常抗凝物增多；异常抗凝物增多； 血友病血友病A A患者长期输注患者长期输注FF，可产生，可产生FF抑制物，引起抑制物，引起 APTTAPTT延长。延长。 一些患者存在一些患者存在狼疮抗凝物狼疮抗凝物（LACLAC），使），使APTTAPTT延长。延长。 【临床意义】 APTT(- ) PT(+)APTT(- ) PT(+) 外源凝血途径缺陷外源凝血途径缺陷 APTT(+) PT(- )AP

35、TT(+) PT(- ) 内源凝血途径缺陷内源凝血途径缺陷 有出血症状有出血症状 无出血症状无出血症状 APTT(+) PT(+ )APTT(+) PT(+ ) 共同凝血途径缺陷共同凝血途径缺陷 APTT(-APTT(-）PT(- )PT(- ) 因子因子缺乏缺乏 常见二期止血缺陷筛检结果分析常见二期止血缺陷筛检结果分析 有出血症状有出血症状凝血障碍的凝血障碍的 出血出血 -: -: 正常正常 + +：异常：异常 APTTAPTT和和 PTPT实验能把实验能把 除了除了缺缺 乏以外的所乏以外的所 有凝血因子有凝血因子 缺乏都筛查缺乏都筛查 出来。出来。 凝血酶时间测定凝血酶时间测定（throm

36、bin time，TT） 临床应用临床应用： 1.1.凝血共同途径的异常抗凝筛检凝血共同途径的异常抗凝筛检 2. 2.播散性血管性凝血播散性血管性凝血( (DIC)DIC)的检测的检测 3. 3.反映凝血酶缺乏的指标反映凝血酶缺乏的指标 4. 4.反映纤维蛋白原缺乏的指标反映纤维蛋白原缺乏的指标 in Bloodin Plasma without without without vIX XIII XII X IX VIII VII V IV III II I vIX XIII XII X IX VIII VII V IV III II I Thrombin Reagent Fibrin Mea

37、sure Clotting Time Thrombin Normal Range 10-14s 37 I II Blood Sampling Trisodium Citrate 原理：受检血浆中加入原理：受检血浆中加入“标准化标准化”凝血酶溶液，测定开始出现纤维蛋白丝所需的时间凝血酶溶液，测定开始出现纤维蛋白丝所需的时间, , 1. 1.查查FIBFIB，所以，所以FIBFIB少少TTTT就延长；就延长；2.TT2.TT可以间接地查纤溶活性，纤溶活性高，可以间接地查纤溶活性，纤溶活性高，FIBFIB就被溶就被溶 解，解，TTTT就延长。就延长。3.3.当体内有抗凝物质（肝素或类肝素的物质），那

38、么加入的凝血酶被肝当体内有抗凝物质（肝素或类肝素的物质），那么加入的凝血酶被肝 素破坏，那么素破坏，那么TTTT也延长。也延长。 凝血酶时间（凝血酶时间（TTTT）及甲苯胺兰纠正试验）及甲苯胺兰纠正试验 v 原理：原理： 受检血浆中加入受检血浆中加入“标准化标准化”凝血酶溶液，测定开始凝血酶溶液，测定开始 出现纤维蛋白丝所需的时间。出现纤维蛋白丝所需的时间。 v 纠正试验：纠正试验： 甲苯胺兰可纠正肝素的抗凝作用，在甲苯胺兰可纠正肝素的抗凝作用，在TTTT延长的血浆延长的血浆 中加入少量的甲苯胺兰，若延长的中加入少量的甲苯胺兰，若延长的TTTT明显恢复正常和缩明显恢复正常和缩 短，表示受检血浆

39、中肝素或类肝素样物质增多，否则为短，表示受检血浆中肝素或类肝素样物质增多，否则为 其他类抗凝物或是纤维蛋白原异常。其他类抗凝物或是纤维蛋白原异常。 【报告方式报告方式】 TTTT：161618s18s；加入甲苯胺兰后，；加入甲苯胺兰后，TTTT缩短缩短5 5秒秒 以上，提示血浆中肝素或类肝素样物质增多。以上，提示血浆中肝素或类肝素样物质增多。 TTTT值延长超过正常对照值延长超过正常对照3s3s为延长为延长 【临床意义临床意义】 延长延长： 见于低（无）纤维蛋白原血症；血中见于低（无）纤维蛋白原血症；血中FDPFDP增高增高 （DICDIC）；血中有肝素和类肝素物质存在（如肝素）；血中有肝素和

40、类肝素物质存在（如肝素 治疗中、治疗中、SLESLE和肝脏疾病等）和肝脏疾病等） 纤维蛋白原含量测定纤维蛋白原含量测定 (fibrinogen, Fbg) 临床应用：临床应用： 1. 1.出血性疾病及血栓性疾病的诊断出血性疾病及血栓性疾病的诊断 2. 2.纤维蛋白原缺乏的检测纤维蛋白原缺乏的检测 3. 3.溶栓治疗监测溶栓治疗监测 4. 4.预防血栓形成的独立因素预防血栓形成的独立因素 生物学法生物学法 （查功能）（查功能） FIB FIB检测方法有：凝血酶凝固法（检测方法有：凝血酶凝固法（ClaussClauss法）、法）、 比浊法（比浊法（PTPT衍生法）衍生法） 免疫学方法免疫学方法化学

41、法（定量）化学法（定量） in Blood in Plasma without without without vIX XIII XII X IX VIII VII V IV vIII II I vIX XIII XII X IX VIII VII V IV III II I Thrombin Reagent Fibrin Measure Clotting Time Thrombin Normal Range 24g/L Calculated for Fibrinogen concentration 37 I II Blood Sampling Trisodium Citrate 【原理和方法

42、原理和方法】 FDPFDP干扰纤维蛋白原的测定干扰纤维蛋白原的测定 生物学方法：生物学方法：ClaussClauss方法方法( (凝血酶凝固法凝血酶凝固法) )和和PTPT衍生法衍生法 纤维蛋白原纤维蛋白原 【方法学评价方法学评价】 ClaussClauss法为法为WHOWHO推荐的参考方法推荐的参考方法 PTPT衍生法在纤维蛋白原缺乏时不准确，此时要衍生法在纤维蛋白原缺乏时不准确，此时要 用用ClaussClauss法。法。 当血浆当血浆FIBFIB含量在正常范围时，含量在正常范围时， PTPT衍生法与衍生法与 ClaussClauss法无显著差异或略高；但当法无显著差异或略高；但当FIBF

43、IB减低时，减低时，PTPT演演 算法多偏高算法多偏高 。 【参考值参考值】 成人成人（2 24 4）g/Lg/L , , 新生儿（新生儿（1.251.253.0)g/L 3.0)g/L 纤维蛋白原纤维蛋白原 【临床意义临床意义】 减少：减少：DICDIC（被消耗）、原发性纤溶症，（被消耗）、原发性纤溶症， 肝病肝病（FIBFIB是肝功能指标是肝功能指标）等；遗传性）等；遗传性 异常纤维蛋白血症或无纤维蛋白血症。异常纤维蛋白血症或无纤维蛋白血症。 增高：增高：血栓前状态血栓前状态的危险因素的危险因素, , FIBFIB为急性时相反应蛋白为急性时相反应蛋白, ,见于急性感染、见于急性感染、 糖尿

44、病、恶性肿瘤、外科大手术、妊娠、动脉粥糖尿病、恶性肿瘤、外科大手术、妊娠、动脉粥 样硬化等样硬化等 纤维蛋白原纤维蛋白原 弥漫性血管内凝血（弥漫性血管内凝血（ DICDIC ） 病理：病理：全身血管内微血栓形成全身血管内微血栓形成 结果：结果：1 1消耗大量凝血因子消耗大量凝血因子 2 2诱发全身抗凝系统亢进，引起继发诱发全身抗凝系统亢进，引起继发 性纤维蛋白溶解，减弱正常凝血系性纤维蛋白溶解，减弱正常凝血系 统功能统功能 3. 3. 纤溶所产生的纤维蛋白降解产物纤溶所产生的纤维蛋白降解产物 (FDP)(FDP)的强抗凝作用的强抗凝作用 最终导致严重的全身性出血、最终导致严重的全身性出血、 休克、组织脏器功能障碍休克、组织脏器功能障碍 FDP(-) D-D(-) FDP(-) D-D(+) FDP(+) D-D(-) FDP(+) D-D(+) 纤溶活纤溶活 性正常性正常 血栓自血栓自 发性溶发性溶 解（理解（理 论）论） 原发性原发性 纤溶纤溶 继发性纤溶继发性纤溶(DIC) 溶栓治疗溶栓治疗 纤溶亢进的筛检结果分析纤溶亢进的筛检结果分析 血浆鱼精蛋白副凝固试验（血浆鱼精蛋白副凝固试验（3P3P试验）试验） v 原理：原理： 受检血浆中加入硫酸鱼精蛋白溶液，如果血浆中存受检血浆中加入硫酸鱼精蛋白溶液，如果血浆中存 在在可溶性纤维蛋白单体可溶性纤维蛋白单体纤维蛋