药理学实验PPT学习教案

1、会计学1 药理学实验药理学实验 注意事项注意事项 n七、讨论七、讨论 内容介绍内容介绍 第1页/共19页 一、实验目的一、实验目的 （Experiment purpose) 1. 观察有机磷酸酯类的中毒的表现。观察有机磷酸酯类的中毒的表现。 2.观察解救药阿托品观察解救药阿托品(atropine)、碘解磷定、碘解磷定 (PAM)的解救作用效果，比较两种药物作的解救作用效果，比较两种药物作 用的特点。用的特点。 第2页/共19页 （Experiment theory) 第3页/共19页 第4页/共19页 全血胆碱酯酶活力测定原理全血胆碱酯酶活力测定原理 血样中胆碱酯酶能催化乙酰胆碱水解为乙酸和胆

2、碱。血样中胆碱酯酶能催化乙酰胆碱水解为乙酸和胆碱。 在一定量的血液中加入一定量的乙酰胆碱，经过一在一定量的血液中加入一定量的乙酰胆碱，经过一 定反应时间后，测定剩余的乙酰胆碱含量，即可计定反应时间后，测定剩余的乙酰胆碱含量，即可计 算出被水解乙酰胆碱的量，从而推算出血样中胆碱算出被水解乙酰胆碱的量，从而推算出血样中胆碱 酯酶的活力。酯酶的活力。 第5页/共19页 剩余乙酰胆碱含量测定原理剩余乙酰胆碱含量测定原理 乙酰胆碱可与羟胺反应生成羟肟酸，后者在酸性乙酰胆碱可与羟胺反应生成羟肟酸，后者在酸性 条件下可与条件下可与Fe形成羟肟酸铁络合物，该络合形成羟肟酸铁络合物，该络合 物呈红棕色，在物呈红

3、棕色，在525nm波长有较强吸收峰，通过比波长有较强吸收峰，通过比 色法即可算出乙酰胆碱的含量。色法即可算出乙酰胆碱的含量。 第6页/共19页 （Experiment animal） 家兔，体重家兔，体重2.53.0kg。 第7页/共19页 Experiment material 兔固定箱、测瞳尺、注射器、兔耳夹、脱脂棉球、兔固定箱、测瞳尺、注射器、兔耳夹、脱脂棉球、 台秤、分光光度计、恒温水浴箱、试管及试管夹、台秤、分光光度计、恒温水浴箱、试管及试管夹、 加样器、滤纸；加样器、滤纸； 5%敌百虫敌百虫(depterex)溶液、溶液、0.1%硫酸阿托品溶液、硫酸阿托品溶液、 2.5%碘解磷定溶

4、液。碘解磷定溶液。 第8页/共19页 （Experiment method） 1. 取健康家兔，称体重，观察并记录各组家兔取健康家兔，称体重，观察并记录各组家兔 的活动情况：呼吸、瞳孔大小、唾液分泌、大小的活动情况：呼吸、瞳孔大小、唾液分泌、大小 便、肌张力及有无肌肉震颤，采血。便、肌张力及有无肌肉震颤，采血。 2. 耳缘静脉给予耳缘静脉给予depterex(1.5ml/kg), 给药后密切给药后密切 观察上述指标的变化并记录。待观察上述指标的变化并记录。待M样、样、N样中毒症样中毒症 状 均 较 明 显 时 ， 采 血 ； 给 予 耳 缘 静 脉 注 射状 均 较 明 显 时 ， 采 血 ；

5、 给 予 耳 缘 静 脉 注 射 atropine(1ml/kg)或或PAM-CL(2ml/kg)，观察中毒症，观察中毒症 状有何变化，采血。状有何变化，采血。 3.测定胆碱酯酶活性测定胆碱酯酶活性 第9页/共19页 第10页/共19页 试剂（试剂（mlml） 对照管对照管 测定管测定管 1 2 31 2 34 4中毒前中毒前 5 5中毒后中毒后 6 6解救后解救后 磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液 1.0 0.85 1.0 0.85 0.85 0.851.0 0.85 1.0 0.85 0.85 0.85 血样血样 0 0.15 0 0.15 0.15 0.150 0.15 0 0.15 0.15

6、0.15 3737水浴水浴3-5min3-5min 乙酰胆碱底物乙酰胆碱底物 0 0 1.0 1.0 1.0 1.00 0 1.0 1.0 1.0 1.0 蒸馏水蒸馏水 1.0 1.0 0 0 0 01.0 1.0 0 0 0 0 3737水浴水浴40min40min 碱性羟胺溶液碱性羟胺溶液 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.04.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4N4N盐酸盐酸 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.02.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 三氯化铁溶液三氯化铁溶液 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.02.0 2.0 2.0 2

7、.0 2.0 2.0 第11页/共19页 六、注意事项（六、注意事项（Cautions） 1、观察呼吸、瞳孔、唾液及肌张力的方法。、观察呼吸、瞳孔、唾液及肌张力的方法。 2、采血方法。、采血方法。 3、耳缘静脉注射方法，敌百虫刺激性大，固定、耳缘静脉注射方法，敌百虫刺激性大，固定 好家兔头部；好家兔头部；PAM注射宜缓慢。注射宜缓慢。 4、加入试剂量要准确，尤其是血样及乙酰胆碱。、加入试剂量要准确，尤其是血样及乙酰胆碱。 5、碱性羟胺于使用前、碱性羟胺于使用前20分现配。分现配。 6、比色杯使用方法。、比色杯使用方法。 第12页/共19页 第13页/共19页 七、讨论（七、讨论（Discuss

8、ion） 1、阿托品解救有机磷酸酯中毒机制。、阿托品解救有机磷酸酯中毒机制。 2、解磷定解救有机磷酸酯中毒机制。、解磷定解救有机磷酸酯中毒机制。 3、两种药物解救敌百虫中毒各有什么特点？、两种药物解救敌百虫中毒各有什么特点？ 如何解救疗效好？如何解救疗效好？ 4、使用、使用atropine 和和PAM 解救后，家兔全血解救后，家兔全血 AChE 活性有何变化？活性有何变化？ 第14页/共19页 M受体阻断药受体阻断药-阿托品阿托品 解毒作用及原理解毒作用及原理 1.阿托品能竞争性阻断阿托品能竞争性阻断M受体，受体，迅速解除迅速解除M样样 症状和体征症状和体征； 2.解除部分中枢神经系统中毒症状解除部分中枢神经系统中毒症状，兴奋呼吸，兴奋呼吸 中枢，使患者苏醒；