中药中萜类与挥发油类化学成份的提取分离技术

1、山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院 山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院 山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院 山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院中药化学实用技术学习情景五中药中萜类与挥发油类化学成分的提取分离技术 学习目标学习目标1掌握中药中萜类与挥发油类化学成份的提取分离技术。 知识要求知识要求2掌握薄荷中挥发油和青蒿中的青蒿素的提取分离原理及操作技术；熟悉当归中挥发油的提取分离原理及操作技术；了解丁香中挥发油的提取分离原理及操作技术。 能力能力要求要求3熟练进行薄荷中的挥发油和青蒿中的青蒿素的提取分离操作；能进行当归、丁香中挥发油的提取

2、分离操作。教学内容教学内容学习学习提示提示中药中萜类与挥发油类化学成分的结构中药中萜类与挥发油类化学成分的结构、理化性质及提取分离知识、理化性质及提取分离知识实训实训黄花蒿、薄荷、丁香、当归中萜类与挥黄花蒿、薄荷、丁香、当归中萜类与挥发油类化学成分的提取分离检识发油类化学成分的提取分离检识任务任务黄花蒿、薄荷、丁香、当归中萜类与挥黄花蒿、薄荷、丁香、当归中萜类与挥发油类化学成分的提取分离技术发油类化学成分的提取分离技术挥发油挥发油类化学成分的理化性质类化学成分的理化性质 萜类和挥发油类化学成分的提取分离与检识萜类和挥发油类化学成分的提取分离与检识三三二二 萜类成分萜类成分的结构与分类的结构与分

3、类一一学习提示学习提示 萜类定定 义义萜类化合物（terpenoids）是异戊二烯（c5h8）n首尾相连的聚合体及其含氧衍生物。分分 布布萜类化合物在自然界分布及其广泛，其中主要分布在植物体内，尤其是被子植物，其次是海洋生物。常见含有萜类化合物的中药有：穿心莲、地黄、吴茱萸、龙胆、薄荷、青蒿、紫杉、丹参、人参、雷公藤等。生物活性生物活性萜类化合物具有抗癌、驱虫、抗疟、抗菌消炎、抑制血小板凝集、促进肝细胞再生等作用，有些是香料工业和化妆品工业的重要原料。挥发油定定 义义挥发油（volatile oils）又称精油（essential oils）,是广泛存在于植物体中的一类常温下可挥发，具有芳香气

4、味，与水不相混溶的油状液体的总称。分分 布布挥发油类成分广泛分布在植物界，我国野生与栽培的含挥发油的芳香药用植物有数百种。常见含有挥发油的中药有：木香、苍术、当归、柠檬、厚朴、藿香、丁香、薄荷、柴胡、川芎、细辛、姜橙皮等。生物活性生物活性挥发油是中药中很重要的一类有效成分，具有止咳、平喘、祛痰、抗菌、驱虫祛风、镇痛、解表等功效。 （一）萜类化合物的分类与分布（一）萜类化合物的分类与分布分类名称分类名称 碳原子数碳原子数 通式通式（c5h8）n存在与分布存在与分布 半萜半萜5 5n=1 n=1 挥发油挥发油 植物叶植物叶单萜单萜1010n=2 n=2 挥发油挥发油倍半萜倍半萜1515n=3 n=

5、3 挥发油挥发油 树脂树脂 苦味素苦味素二萜二萜2020n=4 n=4 树脂树脂 苦味素苦味素 植物醇植物醇二倍半萜二倍半萜2525n=5n=5海绵、植物病毒、昆虫代谢海绵、植物病毒、昆虫代谢物物三萜三萜3030n=6n=6皂苷皂苷 树脂树脂 植物乳汁植物乳汁四萜四萜4040n=8 n=8 植物胡萝卜素植物胡萝卜素多萜多萜 40 40 n n8 8橡胶橡胶 硬橡胶硬橡胶 表表6-1 萜类的分类和存在与分布萜类的分类和存在与分布（二）萜类（二）萜类成分的结构类型成分的结构类型结构类型结构类型 活性成分活性成分 主要来源主要来源作用与用途作用与用途 链状单萜链状单萜 柠檬醛（柠檬醛（gerania

6、lgeranial） 存在于柠檬草油和香茅油等存在于柠檬草油和香茅油等植物挥发油中。植物挥发油中。 具有止腹痛具有止腹痛作用作用 单环单萜单环单萜胡椒酮（胡椒酮（piperitonepiperitone）扁柏素扁柏素 （hinokitiolhinokitiol） 存在于胡椒、芸香草等植物存在于胡椒、芸香草等植物挥发油中挥发油中存在于台湾产扁柏存在于台湾产扁柏（chamaecyparischamaecyparis taiwanensistaiwanensis）及罗汉柏）及罗汉柏（thujopsisthujopsis dolabratadolabrata）心材中心材中 具有松弛平滑具有松弛平滑肌作

7、用，是治肌作用，是治疗支气管哮喘疗支气管哮喘的有效成分的有效成分具有卓酚酮结具有卓酚酮结构，多具有抗构，多具有抗菌活性胶菌活性胶 chooooh 表6-2 萜类成分的结构类型结构类型 活性成分 主要来源作用与用途 双环单萜双环单萜 d-d-龙脑龙脑存在于龙脑香树存在于龙脑香树的挥发油及其他的挥发油及其他多种挥发油中多种挥发油中 俗称冰片，具有俗称冰片，具有发汗、兴奋、解发汗、兴奋、解痉挛、驱虫、抗痉挛、驱虫、抗缺氧等作用缺氧等作用 链状倍半萜链状倍半萜麝子油醇麝子油醇 ( (farnesolfarnesol) ) 存在于金合欢花、存在于金合欢花、玫瑰花、香茅油玫瑰花、香茅油等挥发油中等挥发油中

8、 可作为高级香料可作为高级香料的原料的原料 环状倍半萜环状倍半萜青蒿素青蒿素（ginghaosuginghaosu） 存在于菊科植物存在于菊科植物黄花蒿黄花蒿（artemisia artemisia annuaannua l. l.） 的的干燥地上部分干燥地上部分 具有预防治疗疟具有预防治疗疟疾作用疾作用薁类薁类莪术醇莪术醇（curcumolcurcumol） 存在于姜科植物存在于姜科植物莪术干燥根茎的莪术干燥根茎的挥发油中挥发油中 具有抗癌活性具有抗癌活性 ohch2ohoooooooh结构类型结构类型 活性成分活性成分 主要来源主要来源作用与用途作用与用途 链状二萜链状二萜 植物醇（植物醇

9、（phytolphytol） 是叶绿素的组是叶绿素的组成部分成部分 曾作为合成维生曾作为合成维生素素k k和维生素和维生素e e的的原料原料 环状二萜环状二萜 丹参酮丹参酮a(tanshinoneaa(tanshinonea) )存在于唇形科存在于唇形科植物丹参植物丹参salvia salvia miltiorrhizamiltiorrhiza bgebge 的干燥根的干燥根及根茎中及根茎中具有活血化淤作具有活血化淤作用用, ,是治疗心绞是治疗心绞痛的复方丹参片痛的复方丹参片的有效成分的有效成分紫杉醇（紫杉醇（taxoltaxol ）存在于太平洋存在于太平洋红豆衫红豆衫（taxustaxus

10、brevifoliabrevifolia）的树皮中的树皮中用于治疗卵巢癌、用于治疗卵巢癌、乳腺癌和肺癌乳腺癌和肺癌ch2ohoooooohocophcoomeohmeoococccohohhhnhco（三） 萜类成分的性质氧化反应氧化反应性状性状 溶解性溶解性加成反应加成反应较低分子量的萜类成较低分子量的萜类成分如单萜、倍半萜多分如单萜、倍半萜多为具有挥发性和特殊为具有挥发性和特殊香气的油状液体，是香气的油状液体，是挥发油的组成成分之挥发油的组成成分之一。较大分子量的萜一。较大分子量的萜类化合物多为结晶性类化合物多为结晶性固体，无挥发性。多固体，无挥发性。多数萜类成分具有旋光数萜类成分具有旋光

11、性，因萜类成分多味性，因萜类成分多味苦，所以又称其为苦苦，所以又称其为苦味素。味素。具有双键和羰具有双键和羰基的萜类成分，基的萜类成分，可与某些试剂可与某些试剂如卤素、卤化如卤素、卤化氢、亚硫酸氢氢、亚硫酸氢钠等发生加成钠等发生加成反应，多生成反应，多生成结晶，常应用结晶，常应用此性质进行萜此性质进行萜类成分的纯化类成分的纯化和分离和分离。大多数萜类成大多数萜类成分具有亲脂性，分具有亲脂性，难溶于水，易难溶于水，易溶于有机溶剂，溶于有机溶剂，而与糖成苷后而与糖成苷后极性增大，亲极性增大，亲水性增强，则水性增强，则溶于水和醇，溶于水和醇，难溶于亲脂性难溶于亲脂性有机溶剂。有机溶剂。脱氢反应脱氢反

12、应环状萜类化合环状萜类化合物以铂或钯为物以铂或钯为催化剂，在惰催化剂，在惰性气体保护下，性气体保护下，与与s或或se共热，共热，发生脱氢反应，发生脱氢反应，生成芳香族化生成芳香族化合物，此反应合物，此反应对于萜类化合对于萜类化合物结构研究有物结构研究有重要意义。重要意义。萜类成分可萜类成分可与臭氧、铬与臭氧、铬酐、四醋酸酐、四醋酸铅、高锰酸铅、高锰酸钾等氧化剂钾等氧化剂反应，生成反应，生成不同产物，不同产物，借此判断分借此判断分子中双键的子中双键的位置和合成位置和合成萜的醛或酮萜的醛或酮衍生物。衍生物。般来说，天然药物化学成分在常温下多半是固体物质，常具有结晶的通性，因此，可根般来说，天然药物

13、化学成分在常温下多半是固体物质，常具有结晶的通性，因此，可根据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成分纯化方法。但并不能利用结晶法直接进行提取液的分离和纯化，因为过多的杂质会干分纯化方法。但并不能利用结晶法直接进行提取液的分离和纯化，因为过多的杂质会干扰结晶的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此，结晶前应尽可能地除扰结晶的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此，结晶前应尽可能地除去杂质。去杂质。加成反应加成反应 氧化反应氧化反应 hclclcl 柠檬烯（limo

14、nene） 柠檬烯二氢氯化物3o3ooooooooohochochoch3h3cohcho3h2o（四）挥发油的化学组成（四）挥发油的化学组成结构类型结构类型 活性成分活性成分 主要来源主要来源作用与用途作用与用途 单萜、倍半单萜、倍半萜及其含氧萜及其含氧衍生物衍生物 桉油精（桉油精（cineolecineole） 存在于樟油和蛔蒿花蕾等挥存在于樟油和蛔蒿花蕾等挥发油中，是桉叶油的主要成发油中，是桉叶油的主要成分分具有解热消炎具有解热消炎作用和较强的作用和较强的抗菌防腐能力抗菌防腐能力芳香族化合芳香族化合物（主要指物（主要指苯丙素衍生苯丙素衍生物类）物类） 丁香酚丁香酚 ( (eugenole

15、ugenol) ) 存在于丁香挥发油中存在于丁香挥发油中, ,含量可含量可达达1421%1421%丁香油丁香油具有止痛、抗具有止痛、抗菌消炎作用菌消炎作用 表表6-3 6-3 挥发油的化学组成挥发油的化学组成och2ch=ch2och3oh结构类型结构类型 活性成分活性成分 主要来源主要来源作用与用途作用与用途 环状倍半萜 青蒿素（ginghaosu） 存在于菊科植物黄花蒿（artemisia annua l.） 的干燥地上部分具有预防治疗疟疾作用脂肪族化合物 甲基正壬酮 (methyl nonyketone)存在于三百草科植物蕨菜（houtt uynia cardata thunb.）的干燥

16、地上部分具有镇痛镇咳、抗菌消炎作用含氮、含硫等杂原子的化合物 异硫氰酸丙烯酯存在于十字花科黑芥子挥发油中，是芥子苷的水解产物 具有抗菌作用 由大蒜中大蒜氨酸经酶解后产生的物质具有抗菌、抗病毒等作用oooooch3(ch2)8-c-ch3och3=ch-ch2-n=c=sch3=ch-ch2-s-s-ch2-ch=ch2o（五） 挥发油的性质化学常数化学常数性状性状 溶解性溶解性结晶性结晶性 多数挥发多数挥发油常温下为油常温下为无色或淡黄无色或淡黄色油状液体，色油状液体，少数挥发油少数挥发油因含有色素因含有色素或薁类而具或薁类而具有颜色。多有颜色。多具有香味，具有香味，少数有臭气少数有臭气或腥气

17、味，或腥气味，挥发油的气挥发油的气味常常是鉴味常常是鉴别挥发油质别挥发油质量优劣的重量优劣的重要依据。要依据。少数挥发少数挥发油低温放油低温放置时含量置时含量高的成分高的成分可析出结可析出结晶，析出晶，析出的结晶被的结晶被称为称为“脑脑”，如薄荷脑如薄荷脑等，析出等，析出“脑脑”后后的挥发油的挥发油叫叫“脱脑脱脑油油”。稳定性稳定性多数挥发油比多数挥发油比水轻，少数比水轻，少数比水重，如丁香水重，如丁香油。挥发油无油。挥发油无固定沸点，一固定沸点，一般沸程般沸程70300之间。之间。挥发油具有光挥发油具有光学活性，比旋学活性，比旋度在度在+97177。，。，折光率在折光率在1.431.61之间

18、之间是表是表示挥示挥发油发油质量质量的化的化学指学指标，标，包括：包括：酸价、酸价、酯价、酯价、皂化皂化价、价、碘价。碘价。挥发性挥发性物理常数物理常数挥发油挥发油具有挥具有挥发性，发性，在常温在常温下自行下自行挥发而挥发而不留有不留有痕迹，痕迹，借此进借此进行挥发行挥发油的提油的提取和挥取和挥发油与发油与脂肪油脂肪油的鉴别。的鉴别。挥发油具挥发油具有脂溶性，有脂溶性，不溶于水，不溶于水，可溶于醇，可溶于醇，在醇中的在醇中的溶解度随溶解度随醇的浓度醇的浓度增大而增增大而增大，易溶大，易溶于其它有于其它有机溶剂，机溶剂，如石油醚、如石油醚、苯和乙醚苯和乙醚等。等。挥发油长时间挥发油长时间与空气、

19、光线与空气、光线接触，会发生接触，会发生氧化变质，从氧化变质，从而挥发油颜色而挥发油颜色加深，密度增加深，密度增大，改变原有大，改变原有的香气，同时的香气，同时生成树脂样物生成树脂样物质，失去挥发质，失去挥发性。因此，挥性。因此，挥发油应贮存密发油应贮存密闭的棕色瓶内，闭的棕色瓶内，于阴凉低温处于阴凉低温处保存。保存。化化学学常常数数酯价（酯值）酯价（酯值） 碘值碘值 是代表挥发油中酯类成分的含量。即一克挥发油中酯类化合物完全水解所需氢氧化钾的毫克数。 是代表挥发油中游离羧酸和酚类成分的含量。即：中和一克挥发油中含有游离羧酸和酚类所需氢氧化钾的毫克数。 是酸值和酯值的总和 是代表了挥发油中不饱

20、和双键的含量。即指100克挥发油卤加相当于碘的克数。 酸价（酸值）酸价（酸值） 皂化价（皂化值）皂化价（皂化值） （六）（六） 萜类和挥发油的提取分离与色谱检识萜类和挥发油的提取分离与色谱检识水蒸气蒸馏法 萜萜类类和和挥挥发发油油的的提提取取分分离离与与色色谱谱检检识识提取方法提取方法 分离方法分离方法 有机溶剂提取法 冷压法 利用特殊官能团分离 结晶法分离一般检查 鉴定方法鉴定方法 分馏法 物理常数和化学常数的测定化学法功能基的鉴定 色谱鉴定 般来说，天然药物化学成分在常温下多半是固体物质，常具有结晶的通性，因此，可根般来说，天然药物化学成分在常温下多半是固体物质，常具有结晶的通性，因此，可

21、根据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成分纯化方法。但并不能利用结晶法直接进行提取液的分离和纯化，因为过多的杂质会干分纯化方法。但并不能利用结晶法直接进行提取液的分离和纯化，因为过多的杂质会干扰结晶的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此，结晶前应尽可能地除扰结晶的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此，结晶前应尽可能地除去杂质。去杂质。 3.3.冷压法冷压法 因为挥发油具有挥发性，可随水蒸气蒸馏，故可采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，此法因为挥发油具有挥发性，可随水

22、蒸气蒸馏，故可采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，此法是提取中药中挥发油最常用的方法。是提取中药中挥发油最常用的方法。1.1.水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法2.2.有机溶剂提取法有机溶剂提取法 根据挥发油具有亲脂性，可用亲脂性有机溶剂如乙醚、石油醚等回流提取挥发油，提根据挥发油具有亲脂性，可用亲脂性有机溶剂如乙醚、石油醚等回流提取挥发油，提取液蒸去乙醚即得挥发油。取液蒸去乙醚即得挥发油。 此法主要适用于挥发油含量较高的新鲜原料中挥发油的提取，如鲜橘、柠檬的果皮，此法主要适用于挥发油含量较高的新鲜原料中挥发油的提取，如鲜橘、柠檬的果皮，此法所得挥发油保持原有的新鲜香气，但不纯，常混有水分等杂质，并且，挥发油提

23、取此法所得挥发油保持原有的新鲜香气，但不纯，常混有水分等杂质，并且，挥发油提取的不完全，往往压榨后再进行水蒸气蒸馏。的不完全，往往压榨后再进行水蒸气蒸馏。提取方法提取方法 般来说，天然药物化学成分在常温下多半是固体物质，常具有结晶的通性，因此，可根般来说，天然药物化学成分在常温下多半是固体物质，常具有结晶的通性，因此，可根据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成分纯化方法。但并不能利用结晶法直接进行提取液的分离和纯化，因为过多的杂质会干分纯化方法。但并不能利用结晶法直接进行提取液的分

24、离和纯化，因为过多的杂质会干扰结晶的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此，结晶前应尽可能地除扰结晶的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此，结晶前应尽可能地除去杂质。去杂质。3.3.化学法化学法 将某些挥发油于（将某些挥发油于（020020）低温放置，其中含量高的成分可析出结晶而与挥发油中其他）低温放置，其中含量高的成分可析出结晶而与挥发油中其他成分分离。本法操作简便，但分离不完全，适用范围不广泛。成分分离。本法操作简便，但分离不完全，适用范围不广泛。 1.1.结晶法结晶法 2.2.分馏法分馏法 挥发油中各成分的沸点由于分子结构中碳原子数目、双键多少和含氧官能团极性不同挥

25、发油中各成分的沸点由于分子结构中碳原子数目、双键多少和含氧官能团极性不同而不同，因此，可采用分馏法进行分离。为了防止分馏过程中挥发油中成分的结构破坏，而不同，因此，可采用分馏法进行分离。为了防止分馏过程中挥发油中成分的结构破坏，一般采用减压分馏法。一般采用减压分馏法。 挥发油中的酸（碱）性成分可利用它们可与碱（酸）成盐而溶于水，从乙醚液中分离挥发油中的酸（碱）性成分可利用它们可与碱（酸）成盐而溶于水，从乙醚液中分离出来，酸化或碱化后，乙醚萃取，蒸去乙醚，即得酸（碱）性成分。然后，将分出酸出来，酸化或碱化后，乙醚萃取，蒸去乙醚，即得酸（碱）性成分。然后，将分出酸（碱）性成分后的挥发油，用亚硫酸氢

26、钠加成法或吉拉德试剂法将醛或酮类化合物从乙（碱）性成分后的挥发油，用亚硫酸氢钠加成法或吉拉德试剂法将醛或酮类化合物从乙醚液中分离出。剩下的挥发油中的醇类成分可利用其与邻苯二甲酸酐或丁二酸酐或丙二醚液中分离出。剩下的挥发油中的醇类成分可利用其与邻苯二甲酸酐或丁二酸酐或丙二酸单酰氯反应生成相应的酸性酯，转溶于碳酸钠溶液，再将用乙醚萃取多次的碳酸钠溶酸单酰氯反应生成相应的酸性酯，转溶于碳酸钠溶液，再将用乙醚萃取多次的碳酸钠溶液用盐酸或硫酸酸化后，乙醚提出单酯，蒸去乙醚，残渣用碱水皂化，乙醚萃取，即得液用盐酸或硫酸酸化后，乙醚提出单酯，蒸去乙醚，残渣用碱水皂化，乙醚萃取，即得醇类成分。醇类成分。分离方

27、法分离方法 般来说，天然药物化学成分在常温下多半是固体物质，常具有结晶的通性，因此，可根般来说，天然药物化学成分在常温下多半是固体物质，常具有结晶的通性，因此，可根据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成分纯化方法。但并不能利用结晶法直接进行提取液的分离和纯化，因为过多的杂质会干分纯化方法。但并不能利用结晶法直接进行提取液的分离和纯化，因为过多的杂质会干扰结晶的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此，结晶前应尽可能地除扰结晶的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此

28、，结晶前应尽可能地除去杂质。去杂质。 4.4. 色谱分离法色谱分离法 一般上述方法分离得到的各部分还须进一步分离，通常采用色谱分离法分离会一般上述方法分离得到的各部分还须进一步分离，通常采用色谱分离法分离会得到较好的分离效果。最常用的是硅胶和氧化铝吸附色谱，流动相以石油醚、乙醚、得到较好的分离效果。最常用的是硅胶和氧化铝吸附色谱，流动相以石油醚、乙醚、己烷和乙酸乙酯等按一定比例组成的溶剂系统，进行洗脱或按极性由小到大梯度洗己烷和乙酸乙酯等按一定比例组成的溶剂系统，进行洗脱或按极性由小到大梯度洗脱，并分段收集和检识，相同组分合并，即可将挥发油中各成分分开。脱，并分段收集和检识，相同组分合并，即可

29、将挥发油中各成分分开。 对于不饱和化合物，可依据其双键的数目、位置和顺反异构体不同，与硝酸对于不饱和化合物，可依据其双键的数目、位置和顺反异构体不同，与硝酸银形成银形成络合物的难易和形成络合物的难易和形成络合物的稳定性不同来分离。硝酸银在吸附剂中的络合物的稳定性不同来分离。硝酸银在吸附剂中的含量，一般以含量，一般以2.5%2.5%较适宜和经济。一般吸附规律是双键数目多，吸附牢，难被洗较适宜和经济。一般吸附规律是双键数目多，吸附牢，难被洗脱；末端双键较一般双键难被洗脱；顺式双键较反式双键难洗脱。脱；末端双键较一般双键难被洗脱；顺式双键较反式双键难洗脱。般来说，天然药物化学成分在常温下多半是固体物

30、质，常具有结晶的通性，因此，可根般来说，天然药物化学成分在常温下多半是固体物质，常具有结晶的通性，因此，可根据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成分纯化方法。但并不能利用结晶法直接进行提取液的分离和纯化，因为过多的杂质会干分纯化方法。但并不能利用结晶法直接进行提取液的分离和纯化，因为过多的杂质会干扰结晶的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此，结晶前应尽可能地除扰结晶的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此，结晶前应尽可能地除去杂质。去杂质。 3 3. .功能基

31、的鉴定功能基的鉴定 将样品制成石油醚溶液点于滤纸上，如在空气中挥发，不留油斑，说明可能将样品制成石油醚溶液点于滤纸上，如在空气中挥发，不留油斑，说明可能是挥发油，如油斑不消失，则可能是油脂。是挥发油，如油斑不消失，则可能是油脂。 1 1. .一般检查一般检查 2 2. .物理常数和化学常数的测定物理常数和化学常数的测定 常用的物理常数有折光率、比旋度、相对密度和凝固点等，一般先测定折光常用的物理常数有折光率、比旋度、相对密度和凝固点等，一般先测定折光率，折光率符合规定，再检查其他物理常数。率，折光率符合规定，再检查其他物理常数。化学常数是表示挥发油质量的重要化学指标，主要有酸值、酯值、皂化值和

32、碘值。化学常数是表示挥发油质量的重要化学指标，主要有酸值、酯值、皂化值和碘值。（1）酸碱性）酸碱性 用用ph试纸测定挥发油的试纸测定挥发油的ph值，如呈酸性，表示含有游离的酸或酚类值，如呈酸性，表示含有游离的酸或酚类化合物；如呈碱性，则表示含有碱性化合物，如挥发性生物碱类等。化合物；如呈碱性，则表示含有碱性化合物，如挥发性生物碱类等。 （2）酚类）酚类 在挥发油的乙醇液中，加入三氯化铁的乙醇溶液，如产生蓝、蓝紫或绿在挥发油的乙醇液中，加入三氯化铁的乙醇溶液，如产生蓝、蓝紫或绿色，表示挥发油中有酚性成分存在。色，表示挥发油中有酚性成分存在。 （3）羰基化合物）羰基化合物 挥发油样品与氨性硝酸银试

33、剂如发生银镜反应，表示醛类挥发油样品与氨性硝酸银试剂如发生银镜反应，表示醛类(或其它或其它还原性化合物还原性化合物)存在。挥发油的乙醇溶液与存在。挥发油的乙醇溶液与2，4二硝基苯肼、或氨基脲，羟胺等试二硝基苯肼、或氨基脲，羟胺等试剂反应，如能产生结晶形沉淀，则表明有醛或酮类化合物存在。剂反应，如能产生结晶形沉淀，则表明有醛或酮类化合物存在。 （4）不饱和化合物和薁类衍生物）不饱和化合物和薁类衍生物 在挥发油氯仿溶液中，滴加在挥发油氯仿溶液中，滴加5溴的氯仿溶液，溴的氯仿溶液，如出现红色退去，则表示含有不饱和化合物；继续滴加溴的氯仿溶液，如出现蓝色、如出现红色退去，则表示含有不饱和化合物；继续滴

34、加溴的氯仿溶液，如出现蓝色、紫色或绿色，则表明挥发油中存在薁类衍生物。此外向挥发油的无水甲醇溶液中加紫色或绿色，则表明挥发油中存在薁类衍生物。此外向挥发油的无水甲醇溶液中加入浓硫酸时，如产生蓝色或紫色，亦表示有薁类存在入浓硫酸时，如产生蓝色或紫色，亦表示有薁类存在 检识方法检识方法 般来说，天然药物化学成分在常温下多半是固体物质，常具有结晶的通性，因此，可根般来说，天然药物化学成分在常温下多半是固体物质，常具有结晶的通性，因此，可根据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成分纯化方法。

35、但并不能利用结晶法直接进行提取液的分离和纯化，因为过多的杂质会干分纯化方法。但并不能利用结晶法直接进行提取液的分离和纯化，因为过多的杂质会干扰结晶的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此，结晶前应尽可能地除扰结晶的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此，结晶前应尽可能地除去杂质。去杂质。 4 4. . 色谱鉴定色谱鉴定 挥发油的色谱鉴定，可采用薄层色谱和气相色谱法，但薄层色谱法较为常用。挥发油的色谱鉴定，可采用薄层色谱和气相色谱法，但薄层色谱法较为常用。 （1）.薄层色谱薄层色谱 多采用硅胶多采用硅胶g和中性氧化铝（和中性氧化铝（）为吸附剂。分离烃类化合物常用石油）为吸附剂

36、。分离烃类化合物常用石油醚醚(3060)或正己烷为展开剂，分离含氧萜类化合物常在石油醚或正己烷为展开剂，分离含氧萜类化合物常在石油醚(3060)或正己烷中加入极性较大有机溶剂，如：石油醚一乙酸乙酯或正己烷中加入极性较大有机溶剂，如：石油醚一乙酸乙酯(85:15)为展开剂，综为展开剂，综上，在实际应用中，最好分别上，在实际应用中，最好分别 用这两类展开剂，对同一样品进行双向薄层色谱。用这两类展开剂，对同一样品进行双向薄层色谱。 常用于检识挥发油类成分的薄层色谱显色剂有两大类：一类是香草醛常用于检识挥发油类成分的薄层色谱显色剂有两大类：一类是香草醛-浓硫酸浓硫酸或香草醛或香草醛-浓盐酸试剂，喷后浓

37、盐酸试剂，喷后105烘烤，挥发油中各成分均显示不同颜色。另一烘烤，挥发油中各成分均显示不同颜色。另一类是挥发油各类功能基的显色剂，常用的有类是挥发油各类功能基的显色剂，常用的有：表表6-46-4挥发油各类功能基显色剂挥发油各类功能基显色剂 编号编号 显色剂名称显色剂名称斑点颜色斑点颜色适合官能团适合官能团12高锰酸钾水溶液在粉红色背景上产生黄色斑点不饱和化合物2三氯化铁试剂绿色或蓝色酚性成分3碘化钾一冰醋酸一淀粉试剂蓝色氧化物44氨基安替比林一铁氰化钾试剂橙红色至深红色酚性成分5异羟肟酸铁试剂淡红色酯或内酯62，4二硝基苯肼试剂黄色斑点醛或酮类化合物70.3邻联二茴香胺一冰乙酸溶液黄色斑点醛类

38、8荧光素一溴试剂在波长365nm紫外灯下观察，黄色荧光乙烯基化合物9对二甲氨基苯甲醛试剂深蓝色薁类10硝酸铈铵试剂黄色背景上显棕色斑点醇类般来说，天然药物化学成分在常温下多半是固体物质，常具有结晶的通性，因此，可根般来说，天然药物化学成分在常温下多半是固体物质，常具有结晶的通性，因此，可根据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成据溶解度得不同，用结晶法来达到分离、纯化、精制的目的。结晶法是实验室常用的成分纯化方法。但并不能利用结晶法直接进行提取液的分离和纯化，因为过多的杂质会干分纯化方法。但并不能利用结晶法直接进行提取液的分离和纯化，因为过多的杂质会干扰结晶

39、的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此，结晶前应尽可能地除扰结晶的形成，甚至有时少量的杂质也会阻碍结晶的析出，因此，结晶前应尽可能地除去杂质。去杂质。 （2）.气相色谱气相色谱 气相色谱是挥发油成分分离检测有效、简便的方法之一。特别气相色谱一气相色谱是挥发油成分分离检测有效、简便的方法之一。特别气相色谱一质谱质谱- -微机数据处理系统微机数据处理系统(gc(gcmsmsds)ds)联用仪的使用促进了挥发油成分检测的速联用仪的使用促进了挥发油成分检测的速度和准确度，使其成为目前进行挥发油研究的重要手段。度和准确度，使其成为目前进行挥发油研究的重要手段。 一般的气相色谱主要用于已知挥发

40、油的定性分析，即利用在同一根色谱柱一般的气相色谱主要用于已知挥发油的定性分析，即利用在同一根色谱柱和相同的色谱条件下，同一种物质具有相同的保留值的原理进行鉴定。而对挥和相同的色谱条件下，同一种物质具有相同的保留值的原理进行鉴定。而对挥发油中未知成分的鉴定，需用气相色谱发油中未知成分的鉴定，需用气相色谱- -质谱质谱- -微机数据处理系统微机数据处理系统(gc(gcmsmsds)ds)联用仪进行分析鉴定。方法是先将样品注入气相色谱仪内，经分离后得到的各联用仪进行分析鉴定。方法是先将样品注入气相色谱仪内，经分离后得到的各个组分依次进入分离器，浓缩后的各组分又依次进入质谱仪，将所得各组分的个组分依次

41、进入分离器，浓缩后的各组分又依次进入质谱仪，将所得各组分的质谱图，通过微机数据处理系统进行数据处理、解析和鉴定。质谱图，通过微机数据处理系统进行数据处理、解析和鉴定。 4 4. . 色谱鉴定色谱鉴定 任务一任务一 黄花蒿中青蒿素的提取分离技术黄花蒿中青蒿素的提取分离技术 学习目标学习目标一一二黄花蒿中青蒿素的提取分离技术黄花蒿中青蒿素的提取分离技术三三必备知识五知识拓展四课堂互动六实训一黄花蒿中青蒿素成分的提取分离及鉴定 学习目标学习目标1掌握黄花蒿中青蒿素的提取分离原理及操作技术。 知识要求知识要求2掌握黄花蒿中青蒿素的提取、分离及鉴定技术。熟悉黄花蒿中青蒿素的结构及性质。了解黄花蒿中青蒿素

42、的存在及生物活性。 能力要求能力要求3熟练进行黄花蒿中青蒿素的提取、分离及鉴定操作。一一 学习目标学习目标二二 黄花蒿中青蒿素的提取分离技术黄花蒿中青蒿素的提取分离技术 黄花蒿为菊科植物黄花蒿黄花蒿为菊科植物黄花蒿(artemisia annual l.) (artemisia annual l.) 的干燥的干燥地上部分。具有清热解暑，除蒸，截虐的功效，用于暑邪发热，地上部分。具有清热解暑，除蒸，截虐的功效，用于暑邪发热，阴虚发热，夜热早凉，骨蒸劳热，疟疾寒热，湿热黄疸。阴虚发热，夜热早凉，骨蒸劳热，疟疾寒热，湿热黄疸。 用乙醇提取法提取黄花蒿中的青蒿素，以活性炭脱色，有机用乙醇提取法提取黄花

43、蒿中的青蒿素，以活性炭脱色，有机溶剂进行重结晶纯化。溶剂进行重结晶纯化。工艺流程：工艺流程： 对分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物对分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物 知知 识识 链链 接接 活性炭吸附色谱：活性炭是一种吸附力很强非极性吸附剂，吸附原理是“结构相似者易吸附”，特别适用于分离水溶性物质。如：氨基酸、糖类和苷类，在制药工业上常用于脱色、除味、除热原。吸附规律如下： 1水中吸附能力较强，有机溶剂中吸附能力较弱，故水的水中吸附能力较强，有机溶剂中吸附能力较弱，故水的洗脱能力最弱，有机溶剂的洗脱能力最强；洗脱能力最弱，有机溶剂的洗脱能力最强；2对极性大化合物吸附力较大

44、；对极性大化合物吸附力较大； 34对芳香族化合物的吸附力大于脂肪组化合物；对芳香族化合物的吸附力大于脂肪组化合物；（二）（二） 青蒿中青蒿素的提取、分离青蒿中青蒿素的提取、分离（一）黄花蒿中主要有效成分的结构、理化性质（一）黄花蒿中主要有效成分的结构、理化性质三三 必备知识必备知识（一）黄花蒿中主要有效成分的结构、理化性质（一）黄花蒿中主要有效成分的结构、理化性质 黄花蒿中化学成分大致分为四类：即挥发油、倍半萜、黄酮黄花蒿中化学成分大致分为四类：即挥发油、倍半萜、黄酮和香豆素。其中倍半萜类化合物青蒿素是黄花蒿抗疟的有效成分。和香豆素。其中倍半萜类化合物青蒿素是黄花蒿抗疟的有效成分。 青蒿素为无

45、色针状结晶，易溶于氯仿、丙酮、乙酸乙酯，可青蒿素为无色针状结晶，易溶于氯仿、丙酮、乙酸乙酯，可溶于乙醇、乙醚，微溶于石油醚、苯，几乎不溶于水。溶于乙醇、乙醚，微溶于石油醚、苯，几乎不溶于水。ooooo青蒿素青蒿素（二）青蒿中青蒿素的提取分离（二）青蒿中青蒿素的提取分离青青蒿蒿叶叶干干粉粉乙乙醚醚回回流流二二到到三三次次醚醚液液浓浓缩缩回回收收浸浸膏膏5050乙乙醇醇提提取取醇醇提提掖掖脱脱色色浓浓缩缩乳乳状状液液乙乙醚醚萃萃取取二二次次醚醚液液水水洗洗干干燥燥浓浓缩缩棕棕色色浸浸膏膏硅硅胶胶柱柱层层析析收收集集苯苯洗洗脱脱部部分分粗粗晶晶5050重重结结晶晶白白色色针针晶晶 知 识 链 接1

46、此技术是将药材粗粉置渗漉筒内，不断添加新溶剂，此技术是将药材粗粉置渗漉筒内，不断添加新溶剂，使溶剂自上而下匀速流动，达到提取天然产物的一种使溶剂自上而下匀速流动，达到提取天然产物的一种浸出法。因溶剂一直处于动态，造成了药材细胞内外浸出法。因溶剂一直处于动态，造成了药材细胞内外的浓度差，使扩散能较好地进行，故本法较浸渍法浸的浓度差，使扩散能较好地进行，故本法较浸渍法浸出效率高。但溶剂用量大，提取时间长，因在常温下出效率高。但溶剂用量大，提取时间长，因在常温下渗漉，适用于遇热易破坏的成分的提取。常用溶剂有渗漉，适用于遇热易破坏的成分的提取。常用溶剂有不同浓度的乙醇、酸性乙醇、碱性乙醇、酸水、碱水不

47、同浓度的乙醇、酸性乙醇、碱性乙醇、酸水、碱水和水等。和水等。渗漉法提取技术渗漉法提取技术 操作步骤为药材的润湿、装筒、排气、浸渍和渗操作步骤为药材的润湿、装筒、排气、浸渍和渗漉。一般润湿漉。一般润湿30min30min后装筒，装筒要均匀、松紧度适中，后装筒，装筒要均匀、松紧度适中，流速以每分钟流速以每分钟2ml2ml一一5ml5ml为宜。通常收集渗漉液约为药为宜。通常收集渗漉液约为药材重量的材重量的8 8倍倍1010倍，或以成分鉴别试验决定渗漉终点。倍，或以成分鉴别试验决定渗漉终点。此法操作中，药材的充分润湿和流速的控制是提取是此法操作中，药材的充分润湿和流速的控制是提取是否完全的的关键。否完

48、全的的关键。 四四 课课 堂堂 互互 动动1.依据活性炭吸附原理和规律，说明青蒿素制备工艺中活性炭吸附的成分主要是什么？为什么？2.青蒿素提取应注意哪些问题？五五 知识拓展知识拓展1.1.从黄花蒿中提取分离青蒿素还可采用下列方法从黄花蒿中提取分离青蒿素还可采用下列方法 工艺一：工艺一：黄花蒿叶粉乙醚冷浸三次，合并浓缩至小体积乙醚提取液2%氢氧化钠萃取碱水层（酸性成分）醚层回收乙醚，拌聚酰胺粉，47%乙醇渗漉稀醇液减压回收，乙醚萃取醚 层水 层石油醚蒸除乙醚，进行硅胶柱色谱石油醚洗脱液石油醚乙酸乙酯（91）石油醚乙酸乙酯（173）青蒿素青蒿乙素工艺二：工艺二：黄花蒿叶粉6号溶剂汽油60回流 提取

49、液通过硅胶柱流出液硅胶柱6%异丙醇或10%乙酸乙酯6号溶剂汽油洗脱含青蒿素流份浓缩，室温放置，待析出结晶后，抽滤青蒿素粗结晶结晶加70倍量95%乙醇，常温溶解，滤过滤 液置结晶罐中,室温放置10小时浓缩液青蒿素纯品浓缩至原体积的1/27080烘干工艺三：工艺三：黄花蒿叶粉超临界流体（co2）萃取(萃取温度60,压力20mpa；解析温度45，压力8.0mpa，萃取时间2小时） 萃取物加乙醇溶解，活性炭脱色 放置析晶 结晶（青蒿素） 知知 识识 拓拓 展展1 超临界流体是稳定的纯净物质处于临界温度和临超临界流体是稳定的纯净物质处于临界温度和临界压力以上时，所形成的一种特殊的相态，其物理性界压力以上

50、时，所形成的一种特殊的相态，其物理性质介于液体和气体之间，具有密度接近液体、粘度近质介于液体和气体之间，具有密度接近液体、粘度近于气体，扩散系数为液体的百倍，介电常数也随着压于气体，扩散系数为液体的百倍，介电常数也随着压力增大而增加等特性，从而呈现出较液体溶剂易于穿力增大而增加等特性，从而呈现出较液体溶剂易于穿透到样品介质中的优点。超临界流体萃取法是利用超透到样品介质中的优点。超临界流体萃取法是利用超临界流体作为萃取剂从液体或固体样品中萃取成分的临界流体作为萃取剂从液体或固体样品中萃取成分的方法。方法。2.2.超临界流体提取法超临界流体提取法 这是近年来国际上兴起的一种新方法。此方法使这是近年

51、来国际上兴起的一种新方法。此方法使挥发油的提取可以在常温状态下进行，并且不必使用挥发油的提取可以在常温状态下进行，并且不必使用对人体有害的溶剂，可以较好的保护产品的天然活性，对人体有害的溶剂，可以较好的保护产品的天然活性，是较为先进的是较为先进的“绿色分离技术绿色分离技术”。只是此方法技术要。只是此方法技术要求高，设备费用大，在我国应用并不普遍。求高，设备费用大，在我国应用并不普遍。实训一实训一 黄花蒿中青蒿素成分的提取分离及鉴定黄花蒿中青蒿素成分的提取分离及鉴定【实训目的实训目的】1.1.能够运用渗滤法和活性炭吸附法对黄花蒿中青蒿素进行提取能够运用渗滤法和活性炭吸附法对黄花蒿中青蒿素进行提取

52、和纯化。和纯化。2.2.会用薄层色谱和显色反应对青蒿素进行检识。会用薄层色谱和显色反应对青蒿素进行检识。【化学成分概述化学成分概述】黄花蒿系菊科植物黄花蒿的干燥地上部分。其中除了黄花蒿系菊科植物黄花蒿的干燥地上部分。其中除了含有具有抗虐作用的青蒿素外，还含有莨菪苷、莨菪含有具有抗虐作用的青蒿素外，还含有莨菪苷、莨菪亭、异秦皮苷和腊梅苷等。亭、异秦皮苷和腊梅苷等。【实训原理实训原理】1.1.青蒿素属于倍半萜类内酯化合物，利用其可溶于乙醇、青蒿素属于倍半萜类内酯化合物，利用其可溶于乙醇、丙酮和三氯甲烷等溶剂的性质，可选择乙醇和丙酮提取。丙酮和三氯甲烷等溶剂的性质，可选择乙醇和丙酮提取。2.2.利用

53、青蒿素溶于三氯甲烷和乙酸乙酯等溶剂进行重结晶。利用青蒿素溶于三氯甲烷和乙酸乙酯等溶剂进行重结晶。 3.3.利用活性炭对某些成分如黄酮和香豆素类等杂质的吸附利用活性炭对某些成分如黄酮和香豆素类等杂质的吸附而纯化。而纯化。【操作步骤操作步骤】1.1.提取分离提取分离 将黄花蒿粉碎，筛去枝梗，称取将黄花蒿粉碎，筛去枝梗，称取250g250g，置于烧杯中用，置于烧杯中用70%70%乙醇润湿放置半乙醇润湿放置半小时后，装于渗滤筒中，开始渗滤，流速每分钟小时后，装于渗滤筒中，开始渗滤，流速每分钟3 35ml5ml，收集渗滤液为原料量，收集渗滤液为原料量的的6 68 8倍，加入原料重量的倍，加入原料重量的4

54、%4%左右的活性炭脱色，搅拌半小时，澄清，过滤，左右的活性炭脱色，搅拌半小时，澄清，过滤，滤液减压回收乙醇适量，放置，析晶，抽滤，得青蒿素粗品。母液浓缩至出现滤液减压回收乙醇适量，放置，析晶，抽滤，得青蒿素粗品。母液浓缩至出现浑浊为止，静止，冷却，待结晶析出后，过滤，又得另部分青蒿素粗品。合并浑浊为止，静止，冷却，待结晶析出后，过滤，又得另部分青蒿素粗品。合并两次所得青蒿素粗品，称重，加入两次所得青蒿素粗品，称重，加入5 5倍量三氯甲烷，或加入倍量三氯甲烷，或加入1010倍量的乙酸乙酯倍量的乙酸乙酯溶解，过滤，回收溶剂至干，趁热加入为粗品重量溶解，过滤，回收溶剂至干，趁热加入为粗品重量2 2倍

55、的乙醇，倾去乙醇液，倍的乙醇，倾去乙醇液，放置，析晶，结晶再用少量放置，析晶，结晶再用少量70%70%乙醇洗涤，即得青蒿素精品。乙醇洗涤，即得青蒿素精品。 【设备、仪器及药品设备、仪器及药品】1.1.实验药材：黄花蒿实验药材：黄花蒿2.2.实验仪器及设备：渗滤筒、减压蒸馏装置、烧杯、锥形瓶、硅胶实验仪器及设备：渗滤筒、减压蒸馏装置、烧杯、锥形瓶、硅胶g-cmcg-cmc板、板、温度计、层析缸。温度计、层析缸。 3.3.实验药品：实验药品： 乙醇、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、活性炭、苯、乙醚、甲乙醇、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、活性炭、苯、乙醚、甲醇、盐酸羟胺、间二硝基苯、香草醛醇、盐酸羟胺、间

56、二硝基苯、香草醛- -浓硫酸溶液、三氯化铁试液、浓硫酸溶液、三氯化铁试液、2.4-2.4-二硝二硝基苯肼试液、盐酸、氢氧化钾。基苯肼试液、盐酸、氢氧化钾。2.2.青蒿素的检识青蒿素的检识（1 1）显色反应）显色反应 异羟肟酸铁反应：取本品异羟肟酸铁反应：取本品10mg10mg溶于溶于1ml1ml甲醇中，加入甲醇中，加入7%7%盐酸羟鞍甲醇溶液盐酸羟鞍甲醇溶液4 45 5滴，在水浴上加热至沸，冷却后加稀盐酸调至酸性，然后加入滴，在水浴上加热至沸，冷却后加稀盐酸调至酸性，然后加入1%1%三氯化铁三氯化铁溶液溶液1 12 2滴，溶液即呈紫色。滴，溶液即呈紫色。 2.4-2.4-二硝基苯肼反应：取本品

57、二硝基苯肼反应：取本品10mg10mg溶于溶于1ml1ml三氯甲烷中，将三氯甲烷溶液滴三氯甲烷中，将三氯甲烷溶液滴于滤纸片上，以于滤纸片上，以2.4-2.4-二硝基苯肼试液喷洒，在二硝基苯肼试液喷洒，在8080烘箱中烘烘箱中烘10min10min，则斑点，则斑点呈黄色。呈黄色。 碱性间二硝基苯反应：取本品碱性间二硝基苯反应：取本品10mg10mg溶于溶于2ml2ml乙醇中，加入乙醇中，加入2%2%间二硝基苯的乙间二硝基苯的乙醇液和饱和氢氧化钠各数滴，水浴微热，溶液呈紫红色。醇液和饱和氢氧化钠各数滴，水浴微热，溶液呈紫红色。（2 2）薄层色谱检识）薄层色谱检识吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶g g或硅胶

58、或硅胶g-cmc-nag-cmc-na板板样样 品：青蒿素样品乙醇液品：青蒿素样品乙醇液 青蒿素对照品乙醇液青蒿素对照品乙醇液展开剂：石油醚展开剂：石油醚乙酸乙酯（乙酸乙酯（8282）或苯）或苯乙醚（乙醚（44！）！）显色剂：显色剂：1%1%香草醛香草醛- -浓硫酸溶液（青蒿素呈鲜黄色斑点继变超蓝色）。浓硫酸溶液（青蒿素呈鲜黄色斑点继变超蓝色）。试验结果：观察斑点颜色，计算试验结果：观察斑点颜色，计算rfrf。【实训说明及体会实训说明及体会】（1 1）2.4-2.4-二硝基苯肼试液：取二硝基苯肼试液：取1g2.4-1g2.4-二硝基苯肼、二硝基苯肼、36%36%盐酸盐酸10ml10ml溶于溶于

59、1000ml1000ml乙乙醇中，即得。醇中，即得。（2 2）用本实验提取纯化方法只能得粗品，若需要纯品可采用硅胶柱色谱法分离。）用本实验提取纯化方法只能得粗品，若需要纯品可采用硅胶柱色谱法分离。方法是：取粗品用乙醚溶解上柱，先用石油醚洗脱，再改用石油醚方法是：取粗品用乙醚溶解上柱，先用石油醚洗脱，再改用石油醚乙酸乙乙酸乙酯（酯（8282）洗脱，洗脱液浓缩，即可得较纯的青蒿素。）洗脱，洗脱液浓缩，即可得较纯的青蒿素。（3 3）提取操作的关键是回收乙醇的温度，水浴温度不得超过）提取操作的关键是回收乙醇的温度，水浴温度不得超过6060，否则，青蒿，否则，青蒿素在乙醇和水中会破坏。素在乙醇和水中会破

60、坏。 任务二任务二 薄荷中挥发油的提取分离技术薄荷中挥发油的提取分离技术 学习目标学习目标一一二薄荷中挥发油的提取分离技术薄荷中挥发油的提取分离技术三三必备知识必备知识四课堂互动课堂互动五知识拓展知识拓展六实训二实训二 薄荷中挥发油类化合物的提取分离及鉴定薄荷中挥发油类化合物的提取分离及鉴定 学习目标学习目标1掌握薄荷中挥发油的提取分离原理及操作技术。 知识要求知识要求2掌握薄荷中挥发油的提取、分离及鉴定技术。熟悉青薄荷中挥发油的结构及性质。了解薄荷中挥发油的存在及生物活性。 能力要求能力要求3熟练进行薄荷中挥发油的提取、分离及鉴定操作。学会薄荷中挥发油的点滴反应和色谱鉴定技术。一一 学习目标