质谱分析法--定性与定量

1、讲解：XX 北京市海淀区产品质量监督检验所北京市海淀区产品质量监督检验所 国家食品质量安全监督检验中心国家食品质量安全监督检验中心 2011年年06月月23日日 质谱分析方法质谱分析方法定性与定量定性与定量 讲解：XX The birth of Venus LC and MS: A Match Made in HeavenJames Jorgenson，University of North Carolina 59th， ASMS，June 5，Denver，USA 讲解：XX The Arnolfini Wedding 阿尔诺菲尼的婚礼 扬.凡.艾克 1434 讲解：XX 主要内容主要内容

2、一、质谱基础及相关术语一、质谱基础及相关术语 二、定性（确证）方法二、定性（确证）方法 三、定量方法三、定量方法 讲解：XX 真空系统真空系统 进样系统进样系统检测器检测器数据系统数据系统质量分析器质量分析器 离子源离子源 大气压大气压 质谱仪的基本结构质谱仪的基本结构 GC LC IC CE EI、CI ESI APCI、APPI MALDI DART- 四级杆四级杆 离子阱离子阱 飞行时间飞行时间 磁质谱磁质谱 FT-ICR 一、质谱基础及相关术语一、质谱基础及相关术语 讲解：XX 各种离子化方法的使用范围各种离子化方法的使用范围 选择的依据选择的依据 挥发性挥发性 热稳定性热稳定性 极性

3、极性 Analyte Polarity ESI or MALDI APCI/APPI GC/MS 讲解：XX 质量范围质量范围 质谱仪所能测定的离子质荷比的范围质谱仪所能测定的离子质荷比的范围 不同仪器不同仪器 不同应用不同应用 质谱仪主要性能指标质谱仪主要性能指标 扫描速度扫描速度 分辨率分辨率 色谱峰的数据点数目和峰宽、扫描时间有关色谱峰的数据点数目和峰宽、扫描时间有关 讲解：XX8 质谱仪主要性能指标质谱仪主要性能指标 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 3.904.004.104.204.304.404.50 0.00 20.00 40.00 60.

4、00 80.00 100.00 3.904.004.104.204.304.404.50 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 3.904.004.104.204.304.404.50 讲解：XX 质谱仪主要性能指标质谱仪主要性能指标 磁质谱的分辨率定义最为严格：对两个相等强度磁质谱的分辨率定义最为严格：对两个相等强度 的相邻峰，当两峰间的峰谷不大于其峰高的相邻峰，当两峰间的峰谷不大于其峰高10%时，则时，则 认为两峰已经分开，其分辨率：认为两峰已经分开，其分辨率： m m mm m R 1 12 1 磁质谱中，磁质谱中，R不随不随m/z变化，在测定小分子时有

5、优势变化，在测定小分子时有优势 eg. R=5000，500与与500.1 5000与与5001 分辨率分辨率 讲解：XX 有机质谱仅要求有机质谱仅要求50峰谷峰谷 刚刚分开就算分开（这时刚刚分开就算分开（这时 称为有机质谱的单位质量称为有机质谱的单位质量 分辨）分辨） 简化为用单峰法表示，即简化为用单峰法表示，即 测定一个峰半峰高处的全测定一个峰半峰高处的全 峰宽峰宽Full width half Maximum（简写为（简写为 FWHM） 分分 辨辨 率率 eg. FWHM=0.25 m/z=100，R=400 m/z=1000，R=4000 讲解：XX 分分 辨辨 率率 2500 994

6、9.270061.28 9949.27 M M R 例如：要区分以下离子，分辨率要达到例如：要区分以下离子，分辨率要达到 CO+27.9949 N2+28.0061 ArCl+ 74.9312 As+74.9216 7800 9216.749312.74 9216.74 M M R 讲解：XX atto摩尔级的灵敏度；摩尔级的灵敏度； 优于优于2 ppm的的MS质量准确度质量准确度 优于优于5 ppm的的MS/MS质量准确度质量准确度 线性动态范围可以达到五个数量级线性动态范围可以达到五个数量级 ； 质量分辨率至质量分辨率至20,000 高速数据采集能力（每秒获得高速数据采集能力（每秒获得10

7、张张MS/MS谱图），更好地兼容超快谱图），更好地兼容超快 速液相色谱速液相色谱 宽质量范围：宽质量范围：m/z范围从范围从2520,000 u 举例：举例： 讲解：XX 质谱峰类型质谱峰类型 分子离子分子离子 必须是化合物谱图中质量最高的离子必须是化合物谱图中质量最高的离子 必须是奇电子离子、符合氮规则必须是奇电子离子、符合氮规则 必须能通过丢失合理的中性离子，产生谱图中高质量区的重要离子必须能通过丢失合理的中性离子，产生谱图中高质量区的重要离子 准分子离子准分子离子 碎片离子碎片离子 同位素离子同位素离子 由于天然同位素的存在，因此在质谱图上由于天然同位素的存在，因此在质谱图上出现出现M+

8、1，M+2等峰，由等峰，由 这些同位素所形成的峰称之为同位素峰这些同位素所形成的峰称之为同位素峰 一、质谱基础及相关术语一、质谱基础及相关术语 术语术语 讲解：XX 1-Cl 2-Cl 讲解：XX 1-Br 2-Br 讲解：XX 3-Br 4-Br 讲解：XX Beynon 表表 例如：例如： M=150 化合物化合物 M+1 M+2 化合物化合物 M+1 M+2 C6H14NOCl 8.15 0.49 C7H11N4 9.25 0.38 C6H14O4 6.86 1.0 C8H6 O3 8.36 0.95 C7H2O4 7.75 1.06 C8H8NO2 9.23 0.78 C7H4NO3

9、8.13 1.06 C8H11N2O 9.61 0.61 C7H6N2O2 8.50 0.72 C8H12N3 9.98 0.45 C7H8N3O 8.88 0.55 C9H10O2 9.96 0.84 讲解：XX 二、定性（确证）方法二、定性（确证）方法 质谱法只有在与色谱分离在线或脱机联用时才能作为质谱法只有在与色谱分离在线或脱机联用时才能作为 确证方法确证方法 在分析仪器上的进样顺序是：空白溶剂、阴性控制样在分析仪器上的进样顺序是：空白溶剂、阴性控制样 品、要确证的样品、阳性控制样品再进样，最后是阴品、要确证的样品、阳性控制样品再进样，最后是阴 性控制样品性控制样品 1. 基本原则基本原

10、则 讲解：XX 保留时间保留时间 实验室条件下分析物的最小可接受保留时间，实验室条件下分析物的最小可接受保留时间， 2t0 气相色谱（气相色谱（GC）或液相色谱（）或液相色谱（LC）时，半峰宽应在原来峰）时，半峰宽应在原来峰 宽的宽的90-110%以内，保留时间的变化应在以内，保留时间的变化应在5%以内以内 二、定性（确证）方法二、定性（确证）方法 2. 色谱分离色谱分离 讲解：XX 保留时间保留时间 测试部分中分析物的保留时间（或相对保留时测试部分中分析物的保留时间（或相对保留时 间），应在一个特定的保留时间窗口范围内与校正标间），应在一个特定的保留时间窗口范围内与校正标 准的保留时间相符。

11、保留时间窗口与该色谱系统的分准的保留时间相符。保留时间窗口与该色谱系统的分 辨能力相当。分析物和内标的保留时间之比，应与校辨能力相当。分析物和内标的保留时间之比，应与校 正溶液的相对保留时间一致，正溶液的相对保留时间一致，GC 偏差为偏差为0.5%，LC 偏差为偏差为2.5% 二、定性（确证）方法二、定性（确证）方法 2. 色谱分离色谱分离 讲解：XX GBT 16631-2008 高效液相色谱法通则：同样条件下重复试验高效液相色谱法通则：同样条件下重复试验 的保留数据的分散性，的保留数据的分散性，RSD3% JJG705-2002 液相色谱仪检定规程：定性测量重复性（液相色谱仪检定规程：定性

12、测量重复性（6次测次测 量）量）RSD1.5% JJF（闽）（闽）10322010 液相色谱液相色谱-质谱联用仪校准规范：定性质谱联用仪校准规范：定性 重复性重复性 RSD2% JY/T 0211996 分析型气相色谱方法通则：整机重复性分析型气相色谱方法通则：整机重复性 保留保留 时间时间RSD5 二、定性（确证）方法二、定性（确证）方法 关于保留时间的讨论关于保留时间的讨论 讲解：XX GB/T 22260-2008 饲料中甲基睾丸酮的测定饲料中甲基睾丸酮的测定 高效液高效液 相色谱串联质谱法相色谱串联质谱法 试样保留时间与标准品的相对偏差不大于试样保留时间与标准品的相对偏差不大于15%

13、GB/T 22147-2008 饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和 盐酸克仑特罗的测定盐酸克仑特罗的测定 液相色谱质谱联用法液相色谱质谱联用法 样品与标准品保留时间的相对偏差不大于样品与标准品保留时间的相对偏差不大于0.5% 二、定性（确证）方法二、定性（确证）方法 关于保留时间的讨论关于保留时间的讨论 讲解：XX 全扫描全扫描 scan 选择离子监测选择离子监测 SIM MS-MSn技术，如多反应监测技术，如多反应监测 MRM 二、定性（确证）方法二、定性（确证）方法 3. 质谱检测质谱检测 讲解：XX 全扫描全扫描 scan 用记录全扫描质谱图进行质谱测定时，在标准品

14、参用记录全扫描质谱图进行质谱测定时，在标准品参 考图谱中所有相对丰度考图谱中所有相对丰度10%（分子离子、分子离子的特（分子离子、分子离子的特 征加成物、特征碎片离子、同位素离子等）的特征离子征加成物、特征碎片离子、同位素离子等）的特征离子 都必须检测都必须检测 选择离子监测选择离子监测 SIM 用碎片离子色谱图进行质谱测定时，分子离子最好用碎片离子色谱图进行质谱测定时，分子离子最好 是一个选择的检测离子。选择的检测离子并不一定要源是一个选择的检测离子。选择的检测离子并不一定要源 于分子的同一部分。每个检测离子的信噪比应于分子的同一部分。每个检测离子的信噪比应31 二、定性（确证）方法二、定性

15、（确证）方法 3. 质谱检测质谱检测 讲解：XX 相对丰度（相对丰度（%基峰）基峰）EI-GC-MS（相对）（相对） CI-GC-MS、GC-MSn、LC- MS、LC-MSn（相对）（相对） 50%10%20% 20% to 50%15%25% 10% to 20%20%30% 10%50%50% 相对离子丰度最大容许偏差相对离子丰度最大容许偏差 二、定性（确证）方法二、定性（确证）方法 讲解：XX 二、定性（确证）方法二、定性（确证）方法 2002/657/EC规定：规定： 要确证指令要确证指令 96/23/EC 附录附录I-A 组所列的物质，最少需要组所列的物质，最少需要4 个识别个识别

16、 点点，包括具有促合成作用和其他未允许的化合物，如二苯乙烯类，包括具有促合成作用和其他未允许的化合物，如二苯乙烯类 化合物及其衍生物、盐、酯等、抗甲状腺剂、甾醇、化合物及其衍生物、盐、酯等、抗甲状腺剂、甾醇、 二羟基苯甲二羟基苯甲 酸内酯如玉米赤霉醇、酸内酯如玉米赤霉醇、-受体激动剂等受体激动剂等 要确证指令要确证指令 96/23/EC附录附录I-B 组所列的物质，最少需要组所列的物质，最少需要3 个识别个识别 点点，包括兽药和污染物，兽药如抗菌药、驱虫药、抗球虫药、氨，包括兽药和污染物，兽药如抗菌药、驱虫药、抗球虫药、氨 基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、镇静药、非甾体抗炎药等；其他环基甲酸酯类、拟

17、除虫菊酯类、镇静药、非甾体抗炎药等；其他环 境污染物如有机氯、有机磷、真菌毒素、染料等境污染物如有机氯、有机磷、真菌毒素、染料等 讲解：XX MS技术技术每种离子的识别点数每种离子的识别点数 低分辨质谱（低分辨质谱（LR）1.0 LR-MSn母离子母离子1.0 LR-MSn子离子子离子1.5 高分辨质谱（高分辨质谱（HR）2.0 HR-MSn母离子母离子2.0 HR-MSn子离子子离子2.5 质量碎片类型和识别点的关系质量碎片类型和识别点的关系 每个离子计算一次每个离子计算一次 EI-GC-MS、CI-GC-MS作为不同的技术计算作为不同的技术计算 用不同反应得到的衍生物，可增加识别点数用不同

18、反应得到的衍生物，可增加识别点数 包括二级离子和多级离子包括二级离子和多级离子 可最多结合三种不同的技术确定最小识别点数可最多结合三种不同的技术确定最小识别点数 二、定性（确证）方法二、定性（确证）方法 讲解：XX 讲解：XX m/z + 202122 m/z- 17979.9 ESI- ESI+ 甜蜜素甜蜜素 SN/T 1948-2007 进出口食品中环己基氨进出口食品中环己基氨 基磺酸钠的检测方法基磺酸钠的检测方法 讲解：XX 应研究样品基质和检测器应研究样品基质和检测器 性能引起的图谱改变性能引起的图谱改变 讲解：XX OH HN OH HN 化合物 保留时间 （min） 定性离子对定量

19、离子对 Fragmentor （V） CE（V） 麻黄碱6.9 166/148 166/14880 10 166/13320 伪麻黄碱8.0 166/148 166/14880 10 166/13320 讲解：XX 外标法外标法 内标法内标法 标准加入法标准加入法 基质效应基质效应 三、定量方法三、定量方法 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 1. 外标法外标法 单点校正法单点校正法 外标标准曲线法外标标准曲线法 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 单点校正法实际上是利用原点作为标准曲线上的另单点校正法实际上是利用原点作为标准曲线上的另 一个点，当方法存在系统误差时（即标准工作曲线不一个点

20、，当方法存在系统误差时（即标准工作曲线不 通过原点），单点校正法的误差较大通过原点），单点校正法的误差较大 单点校正法单点校正法 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 以纯溶剂配制标准工作溶液以纯溶剂配制标准工作溶液 GB/T 21317-2007 动物源性食品中四环素类兽药残留量检测动物源性食品中四环素类兽药残留量检测 方法方法 “根据样液中被测四环素类兽药残留的含量情况，选定根据样液中被测四环素类兽药残留的含量情况，选定 峰高相近的标准工作溶液峰高相近的标准工作溶液”，“对标准工作溶液和样液等体对标准工作溶液和样液等体 积参插进样测定积参插进样测定” GB/T 22147-2008 饲料中

21、沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑 特罗的测定特罗的测定 “采用采用M+1的准分子离子的色谱峰面积做单点校正定量的准分子离子的色谱峰面积做单点校正定量” 单点校正法单点校正法 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 以空白样品提取液配制标准工作溶液以空白样品提取液配制标准工作溶液 GB/T 21320-2007 动物源食品中阿维菌素类药物残留量动物源食品中阿维菌素类药物残留量 的测定的测定 液相色谱液相色谱-串联质谱法串联质谱法 “分别取适量试样溶液和相近浓度的基质添加标准工作分别取适量试样溶液和相近浓度的基质添加标准工作 溶液，做单点校正溶液，做单点校正”，“对

22、标准工作液和样品溶液等对标准工作液和样品溶液等 体积参插进样进行测定体积参插进样进行测定” 单点校正法单点校正法 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 以纯溶剂配制标准工作溶液以纯溶剂配制标准工作溶液 GB/T 22260-2008 饲料中甲基睾丸酮的测定饲料中甲基睾丸酮的测定 高效液相高效液相 色谱串联质谱法色谱串联质谱法 GB/T 22955-2008 河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中苯并咪唑类河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中苯并咪唑类 药物残留量的测定药物残留量的测定 液相色谱液相色谱-串联质谱法串联质谱法 GB/T 21324-2007 食用动物肌肉和肝脏中苯并咪唑类食用动物肌肉和肝脏中苯并咪唑类 药物残留量

23、检测方法药物残留量检测方法 外标标准曲线法外标标准曲线法 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 以空白样品提取液配制标准工作溶液以空白样品提取液配制标准工作溶液 GB/T 23409-2009 蜂王浆中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素蜂王浆中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素 残留量的测定残留量的测定 液相色谱液相色谱-质谱质谱/质谱法质谱法 GB/T 23408-2009 蜂蜜中大环内酯类药物残留量测定蜂蜜中大环内酯类药物残留量测定 液相色谱液相色谱- 质谱质谱/质谱法质谱法 GB/T 22986-2008 牛奶和奶粉中氢化泼尼松残留量的测定牛奶和奶粉中氢化泼尼松残留量的测定 液相色液相色 谱

24、谱-串联质谱法串联质谱法 GB/T 22978-2008 牛奶和奶粉中地塞米松残留量的测定牛奶和奶粉中地塞米松残留量的测定 液相色谱液相色谱 -串联质谱法串联质谱法 外标标准曲线法外标标准曲线法 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 空白样品加入系列浓度的标准工作液，提取后得到系列空白样品加入系列浓度的标准工作液，提取后得到系列 基质标准工作液基质标准工作液 GB/T 21312-2007 动物源性食品中动物源性食品中14种喹诺酮药物残留检测种喹诺酮药物残留检测 方法方法 液相色谱液相色谱-质谱质谱/质谱法质谱法 GB/T 22969-2008 奶粉和牛奶中链霉素、双氢链霉素和卡那奶粉和牛奶中

25、链霉素、双氢链霉素和卡那 霉素残留量的测定霉素残留量的测定 液相色谱液相色谱-串联质谱法串联质谱法 GB/T 水果、蔬菜中啶虫脒残留量的测定水果、蔬菜中啶虫脒残留量的测定 液相色谱液相色谱-串联质谱串联质谱 法法 GB/T 21313-2007 动物源性食品中动物源性食品中-受体激动剂残留检测方法受体激动剂残留检测方法 液相色谱液相色谱-质谱质谱/质谱法质谱法 外标标准曲线法外标标准曲线法 讲解：XX a: 以纯溶剂配制标准溶液，测定的峰面积以纯溶剂配制标准溶液，测定的峰面积Aa b: 以空白样品的提取液配制标准溶液，测定的峰面积以空白样品的提取液配制标准溶液，测定的峰面积Ab c: 在空白样

26、品加入标准溶液，提取后得到基质标准溶液，测在空白样品加入标准溶液，提取后得到基质标准溶液，测 定的峰面积定的峰面积Ac 绝对回收率绝对回收率 Ac/Aa，包含提取效率和基质效应，包含提取效率和基质效应 提取回收率提取回收率 Ac/Ab，不包含基质效应，不包含基质效应 绝对回收率绝对回收率 = 提取回收率提取回收率*绝对基质效应绝对基质效应 GB/T 27404-2008 实验室质量控制规范实验室质量控制规范 食品理化检测食品理化检测 “如果检测结果用回收率进行校准，应在原始记录的结果中如果检测结果用回收率进行校准，应在原始记录的结果中 明确说明并描述校准公式明确说明并描述校准公式” 三、定量方

27、法三、定量方法 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 2. 内标法内标法 单点校正法单点校正法 内标标准曲线法内标标准曲线法 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 2. 内标法内标法 内标物要满足以下要求：内标物要满足以下要求： （a）试样中不含有该物质；试样中不含有该物质； （b）与被测组分性质比较接近；与被测组分性质比较接近； （c）不与试样发生化学反应；不与试样发生化学反应； （d）出峰位置应位于被测组分附近。出峰位置应位于被测组分附近。 讲解：XX 内标法计算式内标法计算式 准确称取一定量的试样准确称取一定量的试样m，加入一定量内标物加入一定量内标物ms， 试样中待测物的含量试样中待测

28、物的含量wi为：为： ss s ss s Af Af mm ; Af Af m m i i i iii 100100100 ss sss ii s Af Af m m m Af Af m m m w i i i i 讲解：XX 内标法特点内标法特点 (a) 内标法的准确性较高，操作条件和进样量的稍许变动对内标法的准确性较高，操作条件和进样量的稍许变动对 定量结果的影响不大定量结果的影响不大 (b) 内标物和被测组分处在同一基体中，因此可以消除基体内标物和被测组分处在同一基体中，因此可以消除基体 带来的干扰带来的干扰 (c) 若将内标法中的试样取样量和内标物加入量固定，则：若将内标法中的试样取样

29、量和内标物加入量固定，则： 常数 s A A w i i 内标标准曲线法内标标准曲线法 讲解：XX 内标标准曲线定量方法内标标准曲线定量方法 配制系列标准溶液，分别加入等量的内标物配制系列标准溶液，分别加入等量的内标物, ,混合后进行色谱混合后进行色谱 分析。以待测组分的浓度为横坐标，待测组分与内标物峰面积分析。以待测组分的浓度为横坐标，待测组分与内标物峰面积 （或峰高）的比率为纵坐标建立标准曲线（或线性方程）（或峰高）的比率为纵坐标建立标准曲线（或线性方程） 在分析未知样品时，分别加入与绘制标准曲线时等量的内标在分析未知样品时，分别加入与绘制标准曲线时等量的内标 物，用样品与内标物峰面积（或

30、峰高）的比值，在标准曲线上查物，用样品与内标物峰面积（或峰高）的比值，在标准曲线上查 出被测组分的浓度或用线形方程计算出被测组分的浓度或用线形方程计算 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 内标标准曲线法内标标准曲线法 以纯溶剂配制系列标准工作溶液以纯溶剂配制系列标准工作溶液 GB/T 23406-2009 肠衣中硝基咪唑类药物及其代谢物残留肠衣中硝基咪唑类药物及其代谢物残留 量的测定量的测定 液相色谱液相色谱-质谱质谱/质谱法质谱法 GB/T 23407-2009 蜂王浆中硝基咪唑类药物及其代谢物残蜂王浆中硝基咪唑类药物及其代谢物残 留量的测定留量的测定 液相色谱液相色谱-质谱质谱/质谱法质

31、谱法 GB/T 23411-2009 蜂王浆中蜂王浆中17种喹诺酮类药物残留量的测定种喹诺酮类药物残留量的测定 液相色谱液相色谱-质谱质谱/质谱法质谱法 GB/T 23412-2009 蜂蜜中蜂蜜中19种喹诺酮类药物残留量的测定方种喹诺酮类药物残留量的测定方 法法 液相色谱液相色谱-质谱质谱/质谱法质谱法 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 内标标准曲线法内标标准曲线法 以空白样品的提取液配制系列标准工作溶液以空白样品的提取液配制系列标准工作溶液 GB/T 22992-2008 牛奶和奶粉中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、牛奶和奶粉中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、 己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚残留量的测定

32、己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚残留量的测定 液相色谱液相色谱-串串 联质谱法联质谱法 GB/T 22959-2008 河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中氯霉素、甲砜霉河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中氯霉素、甲砜霉 素和氟苯尼考残留量的测定素和氟苯尼考残留量的测定 液相色谱液相色谱-串联质谱法串联质谱法 GB/T 20756-2006 可食动物肌肉、肝脏和水产品中氯霉素、可食动物肌肉、肝脏和水产品中氯霉素、 甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定 液相色谱液相色谱-串联质谱法串联质谱法 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 内标标准曲线法内标标准曲线法 空白样品加入系列浓度的标准工作液，提取后得到空白

33、样品加入系列浓度的标准工作液，提取后得到 基质标准工作液基质标准工作液 GB/T 21311-2007 动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留 量检测方法量检测方法 高效液相色谱高效液相色谱 串联质谱法串联质谱法 GB/T 21310-2007 动物源性食品中甲状腺拮抗剂残留量检测方动物源性食品中甲状腺拮抗剂残留量检测方 法法 高效液相色谱高效液相色谱-串联质谱法串联质谱法 讲解：XX 沙丁胺醇沙丁胺醇-D36.10克伦特罗克伦特罗-D915.6 沙丁胺醇沙丁胺醇6.16塞曼特罗塞曼特罗7.01 特布他林特布他林6.24塞布特罗塞布特罗11.07 莱克多巴

34、胺莱克多巴胺14.65克伦特罗克伦特罗15.66 溴代克伦特罗溴代克伦特罗16.52 溴布特罗溴布特罗17.47 苯氧丙酚胺苯氧丙酚胺18.72 马布特罗马布特罗18.77 马贲特罗马贲特罗23.11 内标的选择内标的选择 GB/T 22286-2008 保留时间保留时间 min SN/T 1924-2007 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 3. 标准加入法标准加入法 先测定出未知样品的大概值，然后根先测定出未知样品的大概值，然后根 据这个测定值去设定标准加入法据这个测定值去设定标准加入法 标准加入法中第一点加入标准溶液为标准加入法中第一点加入标准溶液为 “0”，第二点加入的量约与待测组

35、分，第二点加入的量约与待测组分 的含量大致相等，共的含量大致相等，共35个点，以加入个点，以加入 的标准溶液的浓度为横坐标，峰面积的标准溶液的浓度为横坐标，峰面积 为纵坐标绘制工作曲线为纵坐标绘制工作曲线 工作曲线在横坐标延长线上的交点到工作曲线在横坐标延长线上的交点到 坐标原点的距离即为样品中待测组分坐标原点的距离即为样品中待测组分 的浓度的浓度 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 3. 标准加入法标准加入法 标准加入法可以看作是内标法和外标法的结合标准加入法可以看作是内标法和外标法的结合 由于待测组分以及加入的标准溶液处在相同的样品由于待测组分以及加入的标准溶液处在相同的样品 基体中，因

36、此，这种方法可以消除基质干扰基体中，因此，这种方法可以消除基质干扰 但是，由于对每一个样品都要配制三个以上的、含但是，由于对每一个样品都要配制三个以上的、含 样品溶液和标准溶液的混合溶液，因此，这种方法样品溶液和标准溶液的混合溶液，因此，这种方法 不适于大批样品的分析不适于大批样品的分析 讲解：XX 前提前提 具有线性关系，并且标准曲线通过坐标原点具有线性关系，并且标准曲线通过坐标原点 尽可能减小系统误差尽可能减小系统误差 试样的基质效应不得随被测组分含量对干扰组分含量试样的基质效应不得随被测组分含量对干扰组分含量 比值改变而改变比值改变而改变 必须扣除背景和空白值必须扣除背景和空白值 3.

37、标准加入法标准加入法 三、定量方法三、定量方法 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 概念概念 产生机制产生机制 来源来源 如何评价如何评价 如何消除如何消除 4. 基质效应基质效应 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 基质效应是指在样品测试过程中，由于待测物以外的其基质效应是指在样品测试过程中，由于待测物以外的其 他物质的存在，直接或间接影响待测物响应的现象他物质的存在，直接或间接影响待测物响应的现象 由于质谱检测的高选择性，基质效应的影响在色谱图上由于质谱检测的高选择性，基质效应的影响在色谱图上 往往观察不到，即空白基质色谱图表现为一条直线，但往往观察不到，即空白基质色谱图表现为一条直线，但 这些共流出组分会改变待测物的离子化效率，引起对待这些共流出组分会改变待测物的离子化效率，引起对待 测物检测信号的抑制或提高测物检测信号的抑制或提高 4. 基质效应基质效应 讲解：XX 三、定量方法三、定量方法 待测物与基质成待测物与基质成 分的电荷竞争分的电荷竞争 形成气态离子的形成气态离子的 竞争竞争 改变表面张力，改变表面张力， 形成大液滴，不形成大液滴，不 充分的去溶剂化充分的去溶剂化 基质效应的产生机制基质效应