实验二 药物中的杂质检查(特殊杂质检查)实验三 气相色谱法测定藿香正气水中乙醇的含量

1、掌握本实验中药物掌握本实验中药物特殊杂质特殊杂质的来源和检的来源和检查原理。查原理。 掌握薄层层析法用于特殊杂质检查的一掌握薄层层析法用于特殊杂质检查的一般操作。般操作。 一、实验目的一、实验目的实验二实验二 药物中的杂质检查药物中的杂质检查（特殊杂质检查）（特殊杂质检查）二、实验内容二、实验内容（一）乙酰水杨酸中游离水杨酸的检查（一）乙酰水杨酸中游离水杨酸的检查 1 1原理：原理： COOHOCOCH3 + H2OCOOHOH + CH3COOH4 Fe3+COOHOH + 6Fe(COOO)23Fe + 12H 紫堇色紫堇色 二、实验内容二、实验内容本品本品0.05g0.5mL对照液对照液

2、（一）乙酰水杨酸中游离水杨酸的检查（一）乙酰水杨酸中游离水杨酸的检查 2 2方法（原料）：方法（原料）： （0.01%水杨酸）水杨酸）25mL1mL乙醇乙醇水水硫酸铁铵硫酸铁铵 0.5mL摇匀摇匀 比色比色不得更深（不得更深（0.1%）二、实验内容二、实验内容（一）乙酰水杨酸中游离水杨酸的检查（一）乙酰水杨酸中游离水杨酸的检查 3 3方法（片剂）：方法（片剂）： 供试品溶液：（供试品溶液：（准备准备2 2个干燥小烧杯个干燥小烧杯） 称取称取24片片（规格（规格25mg）乙酰水杨酸片乙酰水杨酸片 于研钵中研细于研钵中研细 +3mL氯仿氯仿 称取称取1/6量（相当于乙酰水杨酸量（相当于乙酰水杨酸0

3、.1g） 搅拌搅拌2min,过滤过滤 渣（氯仿渣（氯仿1mL洗洗2次）次） 挥干溶剂挥干溶剂 滤液滤液 +4mL乙醇乙醇 100mL 5%乙醇乙醇洗烧杯洗烧杯 5%乙醇定容乙醇定容 摇匀摇匀配制配制140mL4组共用组共用二、实验内容二、实验内容25mL供试品溶液供试品溶液+1mL乙醇乙醇+5%乙醇乙醇 25mL（一）乙酰水杨酸中游离水杨酸的检查（一）乙酰水杨酸中游离水杨酸的检查 3 3方法（片剂）：方法（片剂）： 0.75mL对照液对照液（0.01%水杨酸）水杨酸）硫酸铁铵硫酸铁铵 0.5mL摇匀摇匀 比色比色不得更深（不得更深（0.3%）二、实验内容二、实验内容（二）黄体酮中其他甾体的检查

4、（二）黄体酮中其他甾体的检查 1 1原理：原理： 黄体酮是天然的孕激素，具有甾体的母核。甾体黄体酮是天然的孕激素，具有甾体的母核。甾体激素药物多由其他甾体化合物经结构改造而来，药物激素药物多由其他甾体化合物经结构改造而来，药物中存在合成的起始物、中间体、副产物及降解产物，中存在合成的起始物、中间体、副产物及降解产物，这些杂质一般具有甾体母核，和药物结构相似。所以这些杂质一般具有甾体母核，和药物结构相似。所以需要采用色谱法进行检查（如需要采用色谱法进行检查（如TLC、HPLC) 。 TLC检查杂质有检查杂质有（1 1）杂质对照品法）杂质对照品法（2 2）供试品溶液自身稀释对照法供试品溶液自身稀释

5、对照法（3 3）杂质对照品法与供试品溶液）杂质对照品法与供试品溶液 自身稀释对照法并用自身稀释对照法并用（4 4）对照药物法）对照药物法二、实验内容二、实验内容（二）黄体酮中其他甾体的检查（二）黄体酮中其他甾体的检查 2 2方法：方法： 供试品溶液：供试品溶液： 20mg/mL黄体酮乙醇溶液黄体酮乙醇溶液取供试品溶液取供试品溶液1.00mL+无水乙醇无水乙醇 50.00mL对照品溶液：对照品溶液：点样（四组）点样（四组） 展开（展开剂：苯展开（展开剂：苯-无水乙醇（无水乙醇（95：5） 晾干晾干置紫外灯（置紫外灯（254nm）下检视。）下检视。 供试品溶液如显供试品溶液如显杂质斑点杂质斑点，不

6、得多于不得多于1个个，其，其颜色与对颜色与对照溶液所显的主斑点相比，照溶液所显的主斑点相比，不得更深。不得更深。 杂质限量杂质限量%=？ 1/50100%=2%样品样品对照对照掌握掌握GC内标法测定药物含量的方法与计算。内标法测定药物含量的方法与计算。 熟悉气相色谱仪的工作原理和操作方法。熟悉气相色谱仪的工作原理和操作方法。 一、实验目的一、实验目的实验三实验三 气相色谱法测定藿香正气气相色谱法测定藿香正气 水中乙醇的含量水中乙醇的含量 二、原理二、原理 乙醇具有挥发性，乙醇具有挥发性，ChP采用气相色谱法测定各种制采用气相色谱法测定各种制剂在剂在20时乙醇的含量。时乙醇的含量。 定量方法有：面积归一法、外标法、定量方法有：面积归一法、外标法、内标法内标法。 校正因子校正因子f = (As/ Cs)/ (AR/ CR) Cx= f Ax / (As/ Cs) S为内标物（正丁醇）为内标物（正丁醇）R为被测物对照品（无水乙醇）为被测物对照品（无水乙醇）X为被测物为被测物三、实验内容三、实验内容1.00mL无水乙醇无水乙醇2.00mL藿香正气水藿香正气水 1.色谱条件：色谱条件： HP-5石英毛细柱（石英毛细柱（30.0m320m） 进样口温度：进样口温度：200，分流比，分流比20:1 柱温柱温80， 检测器温度：检测器温度：250。 1.00mL正丁醇正丁醇水水3. GC开机开