化工企业高效液相色谱仪操作规程

1、化工企业高效液相色谱仪操作规程一、流动相的配制11根据各药品项下规定的配制方法，配制流动相，用微孔 滤膜（p0.45pm）抽滤，有机溶剂（或混合溶剂）用油膜过 滤，纯化水系溶液用水膜过滤。12脱气：配好的流动相用超声波清洗器超声排气泡，时间 约1020分钟。二、开机2.1. 待电压稳定后，依次打开“高压输液泵”电源、检测器电 源、工作站电源和电脑电源。2.2. 换上流动相（若流动相中含有酸或盐不能直接换上流动 相，需要用10%甲醇水溶液运行30分钟后再换上流动相， 若流动相中不含酸或盐则可以直接换上流动相），开始下列 操作：排空冲洗、调流速、调波长。若连接泵头的吸液管中无液体填充或有大量气泡时

2、，逆时针 打开泵单元上的排空阀，按“开始”键进行冲洗约2分钟至 吸液管中没有气泡，然后顺时针关闭排空阀。调流速：根据检品要求调流速。方法：通过按“”或“”上、下移动键可以循环进入泵 的流速、最高限压、最低限压设定界而，对相应值进行设定 和修改。设定完成按“运行”键开始运行。若调节流速前显 示的流速正好符合检品要求则无需调节流速。调波长：根据检品要求调波长。方法：按检测器控制面板上 的旋钮调节，若调节波长前显示的波长正好符合检品要求则 无需调节波长。2.3. 打开电脑桌面上工作站图标，进入工作站界面，并进 行系统配置验证。2.4. 设置分析方法：根据检品所需设置分析方法（或直接调 出本检品已保存

3、的方法），点击“启动基线监测”图标后进 行基线监测，待基线稳定后停止基线监测。2.5. 进样：点击“启动数据采集”图标后，用仪器配备的进 样器，吸取一定量的待检液，注入进样阀，快速扳动进样阀 手柄，即开始启动数据采集。26分析结果：等到所设的时间结束后自动分析。三、实验完毕后的处理工作3.1. 关闭检测器电源，实验完毕及时关闭检测器（便于保护 检测器，甚至可延长检测器的寿命）；32冲洗在大的注射器上安上配备的冲洗头（白色的圆形配件） 用10%甲醇水冲洗35次，再用纯甲醇冲洗23次即可, 盖上红色的进样阀保护盖。3.3.色谱柱的冲洗（a）含盐的流动相的冲洗方法：每天操作结束后，先用含 甲醇10%

4、甲醇水溶液冲洗，时间约30分钟。再用纯甲醇冲 洗，约3060分钟（注：不能直接用有机溶剂冲洗，盐类 易析出，堵塞色谱柱，造成色谱柱永久性损坏）。（b）不含盐的流动相的冲洗方法：每天操作结束后，先用 原流动相冲洗约1015分钟，纯甲醇冲洗，时间约2030 分钟。3.4根据提示依次关闭电脑上工作站软件的各个界面，最后 关闭工作站，恒流泵和柱温箱电源（注意：关闭泵电源前先 按“运行/停止”键一次，停止泵，待压力降到0时，再关闭 泵的电源）。四、注意事项4.1. 流动相或单项溶剂需经过0.45 u m的微孔滤膜过滤，以 降低色谱柱受污染的程度，延长使用寿命。抽滤流动相或单 项溶剂时，应注意滤膜的选择：抽滤纯水或纯水溶液时，选 用水系滤膜，抽滤分析纯有机溶剂或混合溶液中含有有机溶 剂，要选用脂（F）滤膜。4.2. 若仪器长时间不用，可定期加电，使仪器预热一段时间, 以免仪器内部件受潮。4.3. 根据需要设定泵压力参数。由于每根色谱柱性能、填料 各不相同，要依据其特性控制压力，防止压力过大导致柱内 填料空间发生变化，影响分离效果。以十八烷基硅烷键合硅 胶为填料的色谱柱一般最高工作压力不能超过40 MPa。4.4. 最后一次进样完成后，应用流动相冲洗一段时间，以保 证洗脱完