第三章杂质检查

1、参考书：参考书：1 1、药物分析学习指导药物分析学习指导常军民主编，常军民主编， 科学出版社，科学出版社，2006 2006 定价：定价：2424元元2 2、药物分析学习与解题指南药物分析学习与解题指南马长清主马长清主 编，华中科技大学出版社，编，华中科技大学出版社，20062006 定价：定价：1515元元3 3、药物分析药物分析于治国，陈秀洁主编，科于治国，陈秀洁主编，科 学技术文献出版社，学技术文献出版社，2005.82005.8 定价：定价：1818元元第三章第三章 药物的杂质检查药物的杂质检查第一节第一节 概述概述1 1药物的纯度要求药物的纯度要求（1 1）药物纯度的概念：）药物纯度

2、的概念：即药物的纯净程度，即药物的纯净程度，是反映药品质量的一项重要指标。是反映药品质量的一项重要指标。 在药物的生产和贮藏过程中会引入杂质，在药物的生产和贮藏过程中会引入杂质，如药物的生产中常常要使用盐酸、硫酸等，若如药物的生产中常常要使用盐酸、硫酸等，若洗涤不够，在成品中就会引入氯化物、硫酸盐洗涤不够，在成品中就会引入氯化物、硫酸盐等无机杂质。等无机杂质。1 1药物的纯度要求药物的纯度要求（2 2）药物纯度的评价）药物纯度的评价 应把药物的性状、理化常数、杂质检查、应把药物的性状、理化常数、杂质检查、含量测定等作为一个有联系的整体来评价药物含量测定等作为一个有联系的整体来评价药物的纯度。的

3、纯度。（3 3）人类对药物纯度的认识是在防治疾病的）人类对药物纯度的认识是在防治疾病的实践中积累起来，并随着分离、检测技术的提实践中积累起来，并随着分离、检测技术的提高而进一步发现药物中存在的杂质，从而不断高而进一步发现药物中存在的杂质，从而不断提高对药物纯度的要求。提高对药物纯度的要求。2 2杂质的来源与种类杂质的来源与种类 1 1）生产过程引入的杂质）生产过程引入的杂质 a a在合成药的生产过程中，未反应完成的原在合成药的生产过程中，未反应完成的原料、反应的中间体和副产物，在精制时未能完料、反应的中间体和副产物，在精制时未能完全除去，就会成为产品中的杂质。全除去，就会成为产品中的杂质。 b

4、 b药物在制成制剂的过程中，也可能产生新药物在制成制剂的过程中，也可能产生新的杂质。的杂质。（1 1）杂质的来源）杂质的来源 1 1）生产过程引入的杂质）生产过程引入的杂质 c c在药物的生产过程中，常需用到试剂、溶在药物的生产过程中，常需用到试剂、溶剂。这些化合物若不能完全除去，也会引入有剂。这些化合物若不能完全除去，也会引入有关杂质。关杂质。 d d药物中还可能存在一些生物活性与有效成药物中还可能存在一些生物活性与有效成分有很大差异的无效、低效异构体或晶型。分有很大差异的无效、低效异构体或晶型。 2 2杂质的来源与种类杂质的来源与种类2 2）贮藏过程引入的杂质）贮藏过程引入的杂质 药品因保

5、管不善或贮藏时间过长，在外界条件药品因保管不善或贮藏时间过长，在外界条件如温度、湿度、日光、空气的影响下或因微生如温度、湿度、日光、空气的影响下或因微生物的作用可能发生水解、氧化、分解、异构化、物的作用可能发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化，产生有晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化，产生有关杂质。关杂质。 水解反应是药物容易发生的一种变质反应。水解反应是药物容易发生的一种变质反应。2 2杂质的来源与种类杂质的来源与种类1)1)按来源分按来源分a.a.一般杂质一般杂质 一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中

6、容易引入的杂质，如药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质，如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、砷盐、重金酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、砷盐、重金属等。属等。2 2杂质的来源与种类杂质的来源与种类（2 2）杂质的种类）杂质的种类1)1)按来源分按来源分b.b.特殊杂质特殊杂质 特殊杂质是指在特定药物的生产和贮藏过程中特殊杂质是指在特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质。如阿司匹林中的游离水杨酸，甲引入的杂质。如阿司匹林中的游离水杨酸，甲硝唑中的硝唑中的2 2甲基甲基5 5硝基咪唑等。硝基咪唑等。2 2杂质的来源与种类杂质的来源与种类（2 2）杂质的种类）杂质的种类2)2)按结构分按结构分A.A.无机杂质

7、无机杂质 氯化物、硫酸盐、硫化物、氰化物、重金属等。氯化物、硫酸盐、硫化物、氰化物、重金属等。b.b.有机杂质有机杂质 有机药物中引入的原料、中间体、副产物、分有机药物中引入的原料、中间体、副产物、分解产物、异构体和残留溶剂等。解产物、异构体和残留溶剂等。2 2杂质的来源与种类杂质的来源与种类（2 2）杂质的种类）杂质的种类3)3)按性质分按性质分a a信号杂质信号杂质 信号杂质本身一般无害，但其含量的多少可以信号杂质本身一般无害，但其含量的多少可以反映出药物的纯度水平，如含量过多，表明药反映出药物的纯度水平，如含量过多，表明药物的纯度差，提示药物的生产工艺不合理或生物的纯度差，提示药物的生产

8、工艺不合理或生产控制存在问题。氯化物、硫酸盐就属于信号产控制存在问题。氯化物、硫酸盐就属于信号杂质。杂质。2 2杂质的来源与种类杂质的来源与种类（2 2）杂质的种类）杂质的种类3)3)按性质分按性质分b. b. 有害杂质有害杂质 有害杂质如金属盐、砷盐、氟化物等，对人体有害杂质如金属盐、砷盐、氟化物等，对人体有毒害，在质量标准中应严格加以控制，以保有毒害，在质量标准中应严格加以控制，以保证用药安全。证用药安全。2 2杂质的来源与种类杂质的来源与种类（2 2）杂质的种类）杂质的种类3 3杂质的限量检查杂质的限量检查（1 1）杂质限量的概念）杂质限量的概念 药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限药

9、物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。量。 通常用百分之几或百万分之几（通常用百分之几或百万分之几（ppmppm）来表）来表示。示。3 3杂质的限量检查杂质的限量检查 1 1）进行杂质的限量检查时，可取一定量被检杂质的）进行杂质的限量检查时，可取一定量被检杂质的标标准溶液准溶液与一定量与一定量供试品供试品在相同条件下处理后，比较反在相同条件下处理后，比较反应结果，以应结果，以确定杂质含量是否超过规定确定杂质含量是否超过规定。使用此方法。使用此方法时，需注意平行原则。即供试品和标准溶液应在完全时，需注意平行原则。即供试品和标准溶液应在完全相同的条件下反应，所加入的试剂、反应的温度、放相同的条件

10、下反应，所加入的试剂、反应的温度、放置的时间等均应相同。只有这样，反应的结果才有可置的时间等均应相同。只有这样，反应的结果才有可比性。比性。 2 2）不与标准溶液进行对比，而）不与标准溶液进行对比，而在供试品溶液中加入试在供试品溶液中加入试剂，剂，在一定条件下反应，在一定条件下反应，观察有无正反应观察有无正反应出现，以不出现，以不出现正反应为合格，即以该检测条件下反应的灵敏度出现正反应为合格，即以该检测条件下反应的灵敏度来控制杂质限量。来控制杂质限量。（2 2）杂质限量检查的方法）杂质限量检查的方法（3 3）杂质限量的计算）杂质限量的计算1 1）杂质限量的计算公式）杂质限量的计算公式 杂质限量

11、杂质限量S = X 100%S = X 100% L = X 100% L = X 100% （C C）：标准溶液浓度）：标准溶液浓度 （V V）：标准溶液体积）：标准溶液体积杂质的最大允许量杂质的最大允许量供试品量供试品量C VS3 3杂质的限量检查杂质的限量检查2 2）杂质限量计算举例）杂质限量计算举例a.a.对乙酰氨基酚中氯化物检查对乙酰氨基酚中氯化物检查已知：已知：S = 2.0gS = 2.0g25/10025/100；C = 10g/mlC = 10g/ml；V = 5.0mlV = 5.0ml求：求： L = L = ？b.b.葡萄糖中重金属检查葡萄糖中重金属检查已知：已知：S

12、= 4.0gS = 4.0g；C = 10g/mlC = 10g/ml；L = 5L = 51010-6-6求：求： V = V = ？c.c.磷酸可待因中吗啡检查磷酸可待因中吗啡检查已知：已知：V = 5.0mlV = 5.0ml；C = 2mg/100mlC = 2mg/100ml； S = 0.10gS = 0.10g 求：求： L = L = ？ 苯巴比妥钠中重金属的检查：苯巴比妥钠中重金属的检查： 取本品取本品2.0g2.0g，加水，加水32mL32mL，溶解后缓慢加，溶解后缓慢加1mol/L1mol/L盐酸溶液盐酸溶液8mL,8mL,充分振摇，静置数分钟，滤充分振摇，静置数分钟，滤

13、过，取续滤液过，取续滤液20mL20mL，加酚酞指示液，加酚酞指示液1 1滴与氨试液适滴与氨试液适量至溶液恰显粉红色，加醋酸盐缓冲液（量至溶液恰显粉红色，加醋酸盐缓冲液（pHpH为为3.53.5）2mL2mL与水适量使成与水适量使成25mL25mL，依法检查，含重金属不得，依法检查，含重金属不得超过百万分之十。超过百万分之十。 计算应取标准铅溶液（每计算应取标准铅溶液（每1mL1mL相当于相当于10g Pb)10g Pb)的的体积。体积。 规则规则药品检验操作标准药品检验操作标准1、遵循平行操作的原则、遵循平行操作的原则 （1）仪器的配对性）仪器的配对性 比色管应配对比色管应配对 刻度线高度相

14、差不超过刻度线高度相差不超过2cm 导气管长度与孔的大小要一致导气管长度与孔的大小要一致 规则规则药品检验操作标准药品检验操作标准2、对照品与供试品要同步操作、对照品与供试品要同步操作（1 1）正确的取样及供试品的称量范围）正确的取样及供试品的称量范围 1g1g不超过不超过2%2%，1g1g不超过不超过1%1%（2 2）正确的比色、比浊方法）正确的比色、比浊方法（3 3）检查结果不符合规定或在限度边缘时应对）检查结果不符合规定或在限度边缘时应对 供试管和对照管各复查两份供试管和对照管各复查两份1 1氯化物检查法氯化物检查法（1 1）原理）原理（2 2）条件）条件 ClCl- - 0.05mg

15、0.05mg0.08mg/50ml, 0.08mg/50ml, 即相当于标准即相当于标准氯化钠溶液氯化钠溶液5ml5ml8ml8ml 酸度酸度 稀硝酸稀硝酸10ml/50ml10ml/50ml 温度温度 303040401 1氯化物检查法氯化物检查法（3 3）干扰的排除）干扰的排除 1 1）供试品溶液混浊）供试品溶液混浊 可用含硝酸的蒸馏水洗净滤纸中的氯化物可用含硝酸的蒸馏水洗净滤纸中的氯化物后滤过，以消除混浊对氯化物检查的干扰。后滤过，以消除混浊对氯化物检查的干扰。 2 2）供试品溶液有颜色）供试品溶液有颜色 可采用可采用内消色法内消色法 2 2硫酸盐检查法硫酸盐检查法（1 1）原理）原理

16、药物中存在的微量硫酸盐与药物中存在的微量硫酸盐与BaClBaCl2 2在盐酸酸在盐酸酸性介质中生成性介质中生成BaSOBaSO4 4白色沉淀，与一定量标准白色沉淀，与一定量标准K K2 2SOSO4 4溶液在相同条件下生成的混浊比较，浊度溶液在相同条件下生成的混浊比较，浊度不得更大。以此来判断供试品中硫酸盐是否超不得更大。以此来判断供试品中硫酸盐是否超过限量。过限量。（2 2）条件）条件 SOSO4 42-2- 0.1mg 0.1mg0.5mg/50ml, 0.5mg/50ml, 即相当于标准即相当于标准硫酸钾溶液硫酸钾溶液1.01.05.0ml5.0ml 酸度酸度 稀盐酸稀盐酸2ml/50m

17、l,pH12ml/50ml,pH12 2硫酸盐检查法硫酸盐检查法 （3 3）干扰的排除）干扰的排除 1 1）供试品溶液如需滤过，应先用加盐酸使）供试品溶液如需滤过，应先用加盐酸使成酸性的水洗净滤纸中硫酸盐，再滤过。成酸性的水洗净滤纸中硫酸盐，再滤过。 2 2）有色供试品如富马酸亚铁处理的方法与）有色供试品如富马酸亚铁处理的方法与氯化物检查法相同。采用内消色法。氯化物检查法相同。采用内消色法。（1 1）原理）原理（2 2）条件）条件 FeFe3+3+ 0.01mg 0.01mg0.05mg/50ml, 0.05mg/50ml, 即相当于标准即相当于标准硫酸钾溶液硫酸钾溶液1.01.05.0ml5

18、.0ml 酸度酸度 稀盐酸稀盐酸4ml/50ml4ml/50ml（3 3）干扰的排除）干扰的排除 1 1）当有）当有FeFe2+2+存在时，可加入氧化剂过硫酸铵氧存在时，可加入氧化剂过硫酸铵氧化供试品中的化供试品中的FeFe2+2+成成FeFe3+3+。 2 2）当供试液管与对照溶液管色调不一致时，）当供试液管与对照溶液管色调不一致时，或所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比较时，可分或所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中，各加正丁醇或异戊醇提取，别移入分液漏斗中，各加正丁醇或异戊醇提取，分离醇层比色。分离醇层比色。 重金属重金属是指在实验条件下与是指在实验条件下与S S2-2-作用显

19、色的金作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等铋等 由于药品生产过程中遇到铅的机会较多，铅由于药品生产过程中遇到铅的机会较多，铅在体内又易积蓄中毒，故检查时以在体内又易积蓄中毒，故检查时以铅铅作为代作为代表。表。 第一法为第一法为硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法； 第二法是将供试品在第二法是将供试品在500-600500-600炽灼破坏炽灼破坏后，后，再按第一法检查；再按第一法检查； 第三法是检查能溶入碱溶液，而不溶于酸溶液第三法是检查能溶入碱溶液，而不溶于酸溶液的药物，在碱性条件下用的药物，在碱性条件下用硫化钠硫化钠作显色剂；作显色剂； 第四法为第

20、四法为微孔滤膜法微孔滤膜法，通过微孔滤膜过滤，使，通过微孔滤膜过滤，使试验条件下生成的硫化铅沉淀富集于滤膜上，试验条件下生成的硫化铅沉淀富集于滤膜上，形成铅斑，比较供试溶液和对照溶液铅斑的颜形成铅斑，比较供试溶液和对照溶液铅斑的颜色，来判断供试品种的重金属是否超过限量色，来判断供试品种的重金属是否超过限量。 （1 1）原理）原理（2 2）条件）条件 PbPb2+2+ 0.01mg 0.01mg0.02mg/27ml0.02mg/27ml，即相当于标准，即相当于标准铅溶液铅溶液1 12ml2ml 酸度酸度 pH3.0pH3.03.53.5时，硫化铅沉淀较完全时，硫化铅沉淀较完全（3 3）干扰的排

21、除）干扰的排除 1)1)供试品有色：可采用外消色法消除干扰。供试品有色：可采用外消色法消除干扰。 2)2)供试品中如有微量供试品中如有微量FeFe3+3+：古蔡氏法古蔡氏法 （1 1）原理）原理（2 2）试剂的作用）试剂的作用 碘化钾和氯化亚锡碘化钾和氯化亚锡 醋酸铅棉醋酸铅棉（3 3）干扰的排除）干扰的排除 1 1）供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸）供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等，在酸性溶液中生成盐等，在酸性溶液中生成硫化氢或二氧化硫硫化氢或二氧化硫气气体，与溴化汞作用生成黑色硫化汞或金属汞，体，与溴化汞作用生成黑色硫化汞或金属汞，干扰砷斑检查。干扰砷斑检查。 2 2）供试品若

22、为）供试品若为铁盐铁盐，能消耗碘化钾、氯化亚，能消耗碘化钾、氯化亚锡等还原剂，影响测定条件，并能氧化砷化氢锡等还原剂，影响测定条件，并能氧化砷化氢干扰测定。干扰测定。 3 3）含）含锑锑药物药物AgAgDDCDDC法法 （1 1）原理）原理 （2 2）试剂的作用）试剂的作用 同古蔡氏法同古蔡氏法 干燥失重是指药品在规定的条件下，经干燥后干燥失重是指药品在规定的条件下，经干燥后所减失的量，以百分率表示。干燥失重的量应所减失的量，以百分率表示。干燥失重的量应恒重。由干燥至恒重的第二次及以后各次称重恒重。由干燥至恒重的第二次及以后各次称重均应在规定的条件下继续干燥均应在规定的条件下继续干燥1h1h后

23、进行。后进行。 常用的方法有三种：常用的方法有三种：（1 1）常压恒温干燥法）常压恒温干燥法（2 2）干燥剂干燥法）干燥剂干燥法（3 3）减压干燥法）减压干燥法化学反应化学反应 I2 2 + SO2 2 +H2 2O 2HI+SO3 3 吡啶存在时无水吡啶能定量地吸收吡啶存在时无水吡啶能定量地吸收HIHI和和SOSO3 3，生成氢碘酸吡啶和亚硫酸吡啶。生成氢碘酸吡啶和亚硫酸吡啶。C5H5NI2+ C5H5NSO2+C5H5N+ H2O 2C5H5NHI+C5H5NSO3 1.1.费休氏法化学反应原理费休氏法化学反应原理亚硫酸吡啶不稳定，能与水发生副反应，消亚硫酸吡啶不稳定，能与水发生副反应，消

24、耗一部分水，因而干扰测定。如下反应：耗一部分水，因而干扰测定。如下反应：C C5 5H H5 5NSONSO3 3+ H2O C+ H2O C5 5H H5 5NHSONHSO4 4H H加入无水甲醇避免了上述副反应的发生。加入无水甲醇避免了上述副反应的发生。 C C5 5H H5 5NSONSO3 3+ CH+ CH3 3OH COH C5 5H H5 5NHSONHSO4 4CHCH3 3综上总的反应式综上总的反应式: : C C5 5H H5 5N NI I2 2+C+C5 5H H5 5N NSOSO2 2 +C +C5 5H H5 5N+CHN+CH3 3OH+HOH+H2 2O O

25、 2C 2C5 5H H5 5N NHI +CHI +C5 5H H5 5N NHSOHSO4 4CHCH3 31.1.费休氏法化学反应原理费休氏法化学反应原理 可与天平连接直接获取样可与天平连接直接获取样品重量、连接电脑直接输品重量、连接电脑直接输出报告。出报告。 滴定迅速：通常只需滴定迅速：通常只需3 3分钟分钟 操作简便，功能灵活多样，操作简便，功能灵活多样，常规操作中，只需通过仪常规操作中，只需通过仪器面板的三键完成。器面板的三键完成。 在滴定中可随时修改参数在滴定中可随时修改参数和输入信息，无需中断正和输入信息，无需中断正在进行的滴定。在进行的滴定。 2.787KF2.787KF专一

26、型容量法自动卡氏水份测定仪专一型容量法自动卡氏水份测定仪(1)(1)环境湿度环境湿度 环境湿度是导致卡尔环境湿度是导致卡尔. .费休法滴定出现误费休法滴定出现误差的最常见的因素之一差的最常见的因素之一. .实验室内可通过使用实验室内可通过使用空调降低室内温度来降低湿度空调降低室内温度来降低湿度. .在湿度很大的在湿度很大的情况下实验室内要配置除湿机。情况下实验室内要配置除湿机。 3.3.水分测定结果的影响因素水分测定结果的影响因素（2 2）温度）温度 温度对卡尔温度对卡尔. .费休滴定速度有明显的影响费休滴定速度有明显的影响. .在低温下可以降低反应速度在低温下可以降低反应速度, ,减少影响滴

27、定结减少影响滴定结果的副反应发生果的副反应发生; ;在高温下可加快样品的溶解在高温下可加快样品的溶解及水分的萃取及水分的萃取, ,使滴定时间缩短使滴定时间缩短. .3.3.水分测定结果的影响因素水分测定结果的影响因素（3 3）仪器的密封性能）仪器的密封性能 新购的仪器密封性较好，随着使用时间的新购的仪器密封性较好，随着使用时间的延长，密封程度会有所变化：密封圈的老化，延长，密封程度会有所变化：密封圈的老化，干燥剂失效，长时间不使用导致仪器内部管路、干燥剂失效，长时间不使用导致仪器内部管路、滴定瓶、溶剂等吸附环境水分，使测定过程出滴定瓶、溶剂等吸附环境水分，使测定过程出现终点达到延长，重现性差等

28、问题。现终点达到延长，重现性差等问题。3.3.水分测定结果的影响因素水分测定结果的影响因素（4 4）电极的敏感度）电极的敏感度 影响双铂电极敏感度的主要因素是沉积在影响双铂电极敏感度的主要因素是沉积在电极表面的污垢。将电极保存在清洁的溶剂中电极表面的污垢。将电极保存在清洁的溶剂中并定期清洗，以保持电极对电化学反应的灵敏并定期清洗，以保持电极对电化学反应的灵敏度。度。3.3.水分测定结果的影响因素水分测定结果的影响因素 取样方法和进样量的大小取样方法和进样量的大小 由于卡尔费休滴定试剂很容易吸收水分由于卡尔费休滴定试剂很容易吸收水分, ,系统系统密封很重要，否则由于吸湿现象造成终点长密封很重要，

29、否则由于吸湿现象造成终点长时间的不稳定和严重的误差。时间的不稳定和严重的误差。 卡尔费休试剂的滴定度的大小卡尔费休试剂的滴定度的大小 滴定试剂的发送头的结构与位置滴定试剂的发送头的结构与位置 在滴定时搅拌要充分且均匀在滴定时搅拌要充分且均匀 在进样时在进样时, ,要防止注射器头受外界的污染而影要防止注射器头受外界的污染而影响测定结果响测定结果 所测样品中干扰物质的存在。所测样品中干扰物质的存在。 4.4.影响水分测定精密度因素影响水分测定精密度因素 中国药典和美国药典对炽灼残渣（中国药典和美国药典对炽灼残渣（residue on residue on ignitionignition）的定义：

30、有机药物经炭化或挥发性）的定义：有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后，高温炽灼，所产生的非无机药物加热分解后，高温炽灼，所产生的非挥发性无机杂质的硫酸盐。英国药典称之为硫挥发性无机杂质的硫酸盐。英国药典称之为硫酸灰分（酸灰分（sulphated ashsulphated ash）。）。 炽灼残渣检查用于控制有机药物和挥发性无机炽灼残渣检查用于控制有机药物和挥发性无机药物中存在的非挥发性无机杂质。常采用重量药物中存在的非挥发性无机杂质。常采用重量方法进行检查。方法进行检查。p易炭化物检查法是检查药物中遇硫酸易炭化或易炭化物检查法是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质。常采用与标

31、准易氧化而呈色的微量有机杂质。常采用与标准比色液比色的方法进行检查。比色液比色的方法进行检查。 有机溶剂残留量测定法主要检查药物在生产过有机溶剂残留量测定法主要检查药物在生产过程中引入的有害的有机溶剂。常采用气相色谱程中引入的有害的有机溶剂。常采用气相色谱法进行检查。法进行检查。 常用的方法有二种：常用的方法有二种： （1 1）溶液直接进样法）溶液直接进样法 （2 2）顶空进样法）顶空进样法有机溶剂有机溶剂 柱温（柱温（） 内标物内标物 测定方法测定方法 限量（限量（% %） 二氧六环二氧六环 170 170 吡啶吡啶 1 1 法法 0.0380.038吡啶吡啶 170 170 二氧六环二氧六

32、环 1 1 法法 0.020.02苯苯 170 170 甲苯甲苯 1 1法或法或2 2法法 0.00020.0002甲苯甲苯 170 170 苯苯 1 1法或法或2 2法法 0.0890.089氯仿氯仿 140 140 二氯甲烷二氯甲烷 1 1 法或法或2 2法法 0.0060.006二氯甲烷二氯甲烷 140 1140 1法或法或2 2 法法 0.060.06环氧乙烷环氧乙烷 80 2 80 2 法法 0.0010.001残留有机溶剂测定的方法和限量残留有机溶剂测定的方法和限量 溶液颜色检查法是控制药物中有色杂质含量的溶液颜色检查法是控制药物中有色杂质含量的方法。中国药典（方法。中国药典（20

33、002000年版）收载有三种方法：年版）收载有三种方法：（1 1）目视比色法）目视比色法（2 2）分光光度法）分光光度法（3 3）色差计法）色差计法p澄清度检查法是检查药物中的微量不溶性杂质。澄清度检查法是检查药物中的微量不溶性杂质。常采用与浊度标准液比浊的方法进行检查。常采用与浊度标准液比浊的方法进行检查。 浊度标准液制备原理：浊度标准液制备原理： (CH2)6N4 + 6H2O 6HCHO + 4NH3 HCHO + H2N-NH2 H2C=N-NH2 + H2O 甲醛腙白色混浊甲醛腙白色混浊 不同级号浊度标准液不同级号浊度标准液 级级 号号 0.5 1 2 3 40.5 1 2 3 4浊

34、度标准原液（浊度标准原液（mlml） 2.5 5.0 10.0 30.0 50.02.5 5.0 10.0 30.0 50.0水水 （mlml） 97.5 95.0 90.0 70.0 50.097.5 95.0 90.0 70.0 50.0 1 1利用药物和杂质在物理性质上的差异利用药物和杂质在物理性质上的差异（1 1）臭味及挥发性的差异）臭味及挥发性的差异 药物中如存在具有特殊气味的杂质，可以药物中如存在具有特殊气味的杂质，可以由气味判断该杂质的存在。由气味判断该杂质的存在。（2 2）颜色的差异）颜色的差异 某些药物自身无色，但从生产中引入了有某些药物自身无色，但从生产中引入了有色的有关物

35、质，或其分解产物有颜色。色的有关物质，或其分解产物有颜色。 1 1利用药物和杂质在物理性质上的差异利用药物和杂质在物理性质上的差异（3 3）溶解行为的差异）溶解行为的差异 有的药物可溶于水、有机溶剂或酸、碱中，而有的药物可溶于水、有机溶剂或酸、碱中，而其杂质不溶；或反之，杂质可溶而药物不溶。其杂质不溶；或反之，杂质可溶而药物不溶。 （4 4）旋光性质的差异）旋光性质的差异 具有旋光性的物质称为光学活性物质。具有旋光性的物质称为光学活性物质。 比旋度（或旋光度）的数值可以用来反映药物比旋度（或旋光度）的数值可以用来反映药物的纯度，限定杂质的含量。的纯度，限定杂质的含量。（5 5）对光吸收性质的差

36、异）对光吸收性质的差异 若药物和杂质对光的吸收存在着显著差异，可若药物和杂质对光的吸收存在着显著差异，可利用这些差异对药物中存在杂质及其量加以控利用这些差异对药物中存在杂质及其量加以控制。制。1 1）紫外分光光度法）紫外分光光度法 a a当杂质在某一波长处有最大吸收，而药物当杂质在某一波长处有最大吸收，而药物在此无吸收时，可以通过控制供试品溶液在此在此无吸收时，可以通过控制供试品溶液在此波长处的吸收度来控制杂质的量。波长处的吸收度来控制杂质的量。1 1利用药物和杂质在物理性质上的差异利用药物和杂质在物理性质上的差异（5 5）对光吸收性质的差异）对光吸收性质的差异1 1）紫外分光光度法）紫外分光

37、光度法 b b有的杂质紫外吸收光谱与药物的紫外吸收有的杂质紫外吸收光谱与药物的紫外吸收光谱重叠，但可以通过控制供试品溶液的吸收光谱重叠，但可以通过控制供试品溶液的吸收度比值来控制杂质的量。度比值来控制杂质的量。 c c若药物在紫外区有明显吸收，而杂质吸收若药物在紫外区有明显吸收，而杂质吸收很弱或没有吸收，可以根据吸收度大小限制杂很弱或没有吸收，可以根据吸收度大小限制杂质的量。质的量。1 1利用药物和杂质在物理性质上的差异利用药物和杂质在物理性质上的差异（5 5）对光吸收性质的差异）对光吸收性质的差异2 2）原子吸收分光光度法）原子吸收分光光度法 原子吸收分光光度法是通过测定药物中所含待原子吸收

38、分光光度法是通过测定药物中所含待检元素的原子蒸气，吸收发自光源的该元素特检元素的原子蒸气，吸收发自光源的该元素特定波长光的程度，以求出供试药物中待检元素定波长光的程度，以求出供试药物中待检元素含量的方法。含量的方法。 主要用于药物中金属盐等杂质的检查主要用于药物中金属盐等杂质的检查 1 1利用药物和杂质在物理性质上的差异利用药物和杂质在物理性质上的差异（5 5）对光吸收性质的差异）对光吸收性质的差异 3 3）红外分光光度法）红外分光光度法 红外分光光度法在杂质检查中主要用于药红外分光光度法在杂质检查中主要用于药物中无效或低效晶型的检查。物中无效或低效晶型的检查。 1 1利用药物和杂质在物理性质

39、上的差异利用药物和杂质在物理性质上的差异（5 5）对光吸收性质的差异）对光吸收性质的差异4 4）荧光分析法）荧光分析法 某些物质受紫外光或可见光照射后能发射出比某些物质受紫外光或可见光照射后能发射出比激发光波长长的荧光。利用物质的激发和发射激发光波长长的荧光。利用物质的激发和发射光谱，对物质进行分析的方法即为荧光分析法光谱，对物质进行分析的方法即为荧光分析法 荧光分析法灵敏度高，专属性强，在药物的鉴荧光分析法灵敏度高，专属性强，在药物的鉴别、检查和含量测定中均有应用。别、检查和含量测定中均有应用。1 1利用药物和杂质在物理性质上的差异利用药物和杂质在物理性质上的差异（6 6）吸附或分配性质的差

40、异）吸附或分配性质的差异 1 1）薄层色谱法（）薄层色谱法（TLCTLC法）法） a a杂质对照品法杂质对照品法 适用于已知杂质并能制备杂质对照品的情况。适用于已知杂质并能制备杂质对照品的情况。 硅胶硅胶G G 苯苯: :甲醇甲醇: :冰冰HACHAC 样品样品 对照品对照品。1 1利用药物和杂质在物理性质上的差异利用药物和杂质在物理性质上的差异（6 6）吸附或分配性质的差异）吸附或分配性质的差异 1 1）薄层色谱法（）薄层色谱法（TLCTLC法）法） b b供试品自身对照法供试品自身对照法 适用于杂质的结构不能确定，或无杂质对适用于杂质的结构不能确定，或无杂质对照品的情况照品的情况 c c对

41、照药物法对照药物法 当无适合的杂质对照品，尤其是供试品显示的杂当无适合的杂质对照品，尤其是供试品显示的杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异，难以判断限量质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异，难以判断限量时，可用与供试品相同的药物作为对照品，此对照药时，可用与供试品相同的药物作为对照品，此对照药物中所含待检杂质需符合限量要求，且稳定性好。物中所含待检杂质需符合限量要求，且稳定性好。1 1利用药物和杂质在物理性质上的差异利用药物和杂质在物理性质上的差异（6 6）吸附或分配性质的差异）吸附或分配性质的差异2 2）纸色谱法（）纸色谱法（PCPC法）法） 用于用于极性较大极性较大物质的分离、分析。物质的分离、

42、分析。 1 1利用药物和杂质在物理性质上的差异利用药物和杂质在物理性质上的差异3 3）高效液相色谱法（）高效液相色谱法（HPLCHPLC法）法） a.a.峰面积归一化法：通常用于粗略考察供试品峰面积归一化法：通常用于粗略考察供试品中的杂质。中的杂质。 L% = Ai /(Ai + AL% = Ai /(Ai + A主）主）100% 100% 例如：利巴韦林中有关杂质的检查：例如：利巴韦林中有关杂质的检查： 对照品液对照品液(5g/ml)(5g/ml)进样进样10l,10l,调灵敏度，使主峰达满调灵敏度，使主峰达满 量程的量程的20%20%25%25%样品液样品液(0.4mg/ml)(0.4mg

43、/ml)进样进样10l, 10l, 杂质杂质AiAi(Ai+A(Ai+A主）的主）的1.0%1.0%1 1利用药物和杂质在物理性质上的差异利用药物和杂质在物理性质上的差异3 3）高效液相色谱法（）高效液相色谱法（HPLCHPLC法）法）b.b.不加校正因子的主成分自身对照法：不加校正因子的主成分自身对照法： 用于没有杂质对照品时杂质的限量检查。用于没有杂质对照品时杂质的限量检查。 对照品液为供试品的稀释液进样测得对照品液为供试品的稀释液进样测得A A主主 供试品液进样测得供试品液进样测得AAi i 其其AAi i A A主主即为合格即为合格. .1 1利用药物和杂质在物理性质上的差异利用药物和

44、杂质在物理性质上的差异3 3）高效液相色谱法（）高效液相色谱法（HPLCHPLC法）法） c.c.加校正因子的主成分自身对照法：加校正因子的主成分自身对照法： 用于有杂质对照品时杂质的含量测定。用于有杂质对照品时杂质的含量测定。 d .d .内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量：内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量： 用于有杂质对照品时，杂质的含量测定。用于有杂质对照品时，杂质的含量测定。 e.e.外标法测定供试品中某个杂质或主成分的含量：外标法测定供试品中某个杂质或主成分的含量： 用于有杂质对照品或杂质对照品易制备的情况。用于有杂质对照品或杂质对照品易制备的情况。1 1利用药物和杂质在物

45、理性质上的差异利用药物和杂质在物理性质上的差异内标物需满足下列要求：内标物需满足下列要求： 能完全溶解于样品中，且不与待测组分发生化能完全溶解于样品中，且不与待测组分发生化学作用；学作用； 峰位尽可能与待测组分的峰位靠近，但能与待峰位尽可能与待测组分的峰位靠近，但能与待测组分完全分开（分离度测组分完全分开（分离度R1.5R1.5）的纯物质。）的纯物质。 若得不到纯品，必须预先测定其准确含量，且若得不到纯品，必须预先测定其准确含量，且杂质峰不得干扰待测组分峰。杂质峰不得干扰待测组分峰。 内标物有时不易寻找是内标法的缺点。内标物有时不易寻找是内标法的缺点。 如测二苯甲酸钠如测二苯甲酸钠1.1.用外

46、标法测时，须先称二苯甲酸钠对照品的量，用外标法测时，须先称二苯甲酸钠对照品的量，再用色谱记录对照品的峰面积，计算单位峰面再用色谱记录对照品的峰面积，计算单位峰面积对应的对照品的量，后根据你样品中二苯甲积对应的对照品的量，后根据你样品中二苯甲酸钠的峰面积就可以算出样品中含有多少二苯酸钠的峰面积就可以算出样品中含有多少二苯甲酸钠。甲酸钠。 如测二苯甲酸钠如测二苯甲酸钠2.2.用内标法时，需先选内标物质，比如用内标法时，需先选内标物质，比如二苯甲酮二苯甲酮等，同理，须先称二苯甲酸钠对照品的量，但等，同理，须先称二苯甲酸钠对照品的量，但在对照品和样品中均要加入相同体积的内标物在对照品和样品中均要加入相同体积的内标物质，计算方法同外标，只不过是根据二苯甲酸质，计算方法同外标，只不过是根据二苯甲酸钠对照品峰面积与内标物质峰面积的比值来折钠对照品峰面积与内标物质峰面积的比值来折算，而不是单独用二苯甲酸钠的峰面积。算，而不是单独用二苯甲酸钠的峰面积。4 4）气相色谱法（）气相色谱法（GCGC法）