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文档简介
1、基因工程重点马春玲2011年11月选择(3030分)分) 名词解释(3030分)分) 简答(4040分)分) 绪论(绪论(0-5分)分)1、基因工程的概念2、基因工程诞生理论三大发现 和技术的三大发明3、基因工程的基本过程第二章第二章 基因工程工具酶(基因工程工具酶(10-20分)分)1、工具酶定义2、限制性核酸内切酶 限制和修饰作用, 基因工程中,受体菌株的表型 定义 类型 命名 基本特性(识别序列、切割方式)3、连接酶 定义 连接条件 种类4、DNA聚合酶定义分类、来源大肠杆菌DNA聚合酶I:基本性质、基本用途Klenow酶:基本性质、基本用途T4-DNA聚合酶:基本性质、基本用途T7-D
2、NA聚合酶:基本性质、基本用途反转录酶:基本性质、基本用途Taq DNA聚合酶:基本性质、基本用途 5、末端脱氧核苷酰转移酶:定义、 基本性质、基本用途6、核酸酶:定义、分类 核糖核酸酶A、核糖核酸酶H:特点 脱氧核糖核酸酶I :特点、基本用途 S1核酸酶:基本特性7、碱性磷酸酶:基本用途 第三章第三章 基因工程载体基因工程载体(10-20(10-20分分) ) 1、基因工程载体的定义、功能、应具备的条件2、质粒载体:质粒载体定义、组成元件;质粒特性,理想质粒载体的必备条件常用的质粒载体类型(各类型定义)pBR322 pUC18/193、噬菌体载体 - DNA载体载体:构建、特点4、柯斯质粒
3、(定义)5、人工染色体(定义)第四章第四章 核酸操作的基本技术核酸操作的基本技术(10分分)1、核酸提取技术基本原理基因组DNA提取、质粒提取、RNA提取基本原理2、核酸的检测与保存DNA/RNA的质量鉴定方法电泳指示剂和DNA染色剂:类型、作用4、核酸杂交技术定义类型:各种类型特点杂交三要素探针:定义、分类、标记方法 3、凝胶电泳技术定义、原理、分类琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳:特点电泳指示剂和DNA染色剂:类型、作用第五章第五章 PCR技术技术(10分左右分左右)聚合酶链式反应PCR:定义PCR扩增原理PCR反应过程PCR反应体系PCR反应条件PCR技术的特点PCR的种类:了解反向P
4、CR、兼并PCR的原理和应用 第六章第六章 DNA文库的构建和目的基因的文库的构建和目的基因的筛选筛选(5-10分分) 1、基因文库定义、组成、2、基因组DNA文库:定义、基本程序3、cDNA文库:定义、基本程序4、基因组DNA文库与cDNA文库的比较5、目的基因的获得:未知核酸序列基因的获得方法已知核酸序列基因的获得方法 第七章第七章 DNA体外重组与基因转移体外重组与基因转移(5-10分左右分左右)1、DNA分子体外重组技术:定义、需要的工具酶2、连接类型3、受体细胞:定义、应具备的条件4、转化:定义、原理、步骤5、转染:定义、步骤6、高压电穿孔转化:原理、影响因素 第八章第八章 重组子的筛选与鉴定重组子的筛选与鉴定(10分左右分左右)1、转化子、重组子、目的重组子:定义2、重组体筛选和鉴定方法:筛选方法的选择与设计依据3各种筛选方法原理和步骤(掌握3种以上 )第九章第九章 外源基因的表达外源基因的表达(10分左右分左右)1、基因表达定义2、外源基因通过表达产生目的蛋白的目的3、表达载体、表达系统:定义4、外源基因在原核细胞中表达具备条件5、表达载体的一般组成(基本基因元件及各个元件的主要功能)6、常用的大肠杆菌表达载体、常用的大肠杆菌表达载体7、提高外源基因在大肠杆菌中表、提高外源基因在大肠杆菌中表达效率的途径达效率的途径8、提高外源基因
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