第四章蛋白质(中医)

1、2021/3/141一、什么是蛋白质一、什么是蛋白质?蛋白质蛋白质(protein)是由许多氨基酸是由许多氨基酸(amino acids)通过通过肽键肽键相连形成的高分子含氮化合物。相连形成的高分子含氮化合物。概概 述述2021/3/142二、蛋白质的生物学重要性二、蛋白质的生物学重要性1. 蛋白质是生物体重要组成成分蛋白质是生物体重要组成成分分布广分布广:所有器官、组织都含有蛋白质所有器官、组织都含有蛋白质;细胞的各个部分都含有蛋白质。细胞的各个部分都含有蛋白质。含量高含量高:蛋白质是细胞内最丰富的有机分蛋白质是细胞内最丰富的有机分子子,占人体干重的占人体干重的45,某些组织含量更高某些组织

2、含量更高,例例如脾、肺及横纹肌等高达如脾、肺及横纹肌等高达80。2021/3/1431 1）作为生物催化剂（酶）作为生物催化剂（酶）2 2）代谢调节作用）代谢调节作用3 3）免疫保护作用）免疫保护作用4 4）物质的转运和存储）物质的转运和存储5 5）运动与支持作用）运动与支持作用6 6）参与细胞间信息传递）参与细胞间信息传递2. 蛋白质具有重要的生物学功能蛋白质具有重要的生物学功能3. 氧化供能氧化供能2021/3/144第第 一一 节节蛋蛋 白白 质质 的的 分分 子子 组组 成成The Molecular Component of Protein2021/3/145 组成蛋白质的元素组成蛋

3、白质的元素主要有主要有C、H、O、N和和S。 有些蛋白质含有少量有些蛋白质含有少量磷磷或金属元素或金属元素铁、铜、铁、铜、锌、锰、钴、钼锌、锰、钴、钼,个别蛋白质还含有个别蛋白质还含有碘碘 。2021/3/146 各种蛋白质的含氮量很接近各种蛋白质的含氮量很接近,平均为平均为16。 由于体内的含氮物质以蛋白质为主由于体内的含氮物质以蛋白质为主, ,因此因此, ,只要只要测定生物样品中的含氮量测定生物样品中的含氮量, ,就可以根据以下公式推就可以根据以下公式推算出蛋白质的大致含量算出蛋白质的大致含量: :100克样品中蛋白质的含量克样品中蛋白质的含量 ( g % )= 每克样品含氮克数每克样品含

4、氮克数 6.251001/16% 蛋白质元素组成的特点蛋白质元素组成的特点2021/3/147 组成蛋白质的基本单位组成蛋白质的基本单位存在自然界中的氨基酸有存在自然界中的氨基酸有300余种余种,但组成但组成人体蛋白质的氨基酸仅有人体蛋白质的氨基酸仅有20种种,且均属且均属 L-氨基酸氨基酸（甘氨酸除外）。（甘氨酸除外）。二、氨基酸二、氨基酸2021/3/148H甘氨酸甘氨酸CH3丙氨酸丙氨酸L-L-氨基酸的通式氨基酸的通式RC+NH3COO-H2021/3/1491. 非极性疏水性氨基酸非极性疏水性氨基酸2. 极性中性氨基酸极性中性氨基酸3. 酸性氨基酸酸性氨基酸4. 碱性氨基酸碱性氨基酸（

5、一）氨基酸的分类（一）氨基酸的分类* * 2020种氨基酸的英文名称、缩写符号及分类如下种氨基酸的英文名称、缩写符号及分类如下: :2021/3/1410甘氨酸甘氨酸 glycine Gly G 5.97丙氨酸丙氨酸 alanine Ala A 6.00缬氨酸缬氨酸 valine Val V 5.96亮氨酸亮氨酸 leucine Leu L 5.98 异亮氨酸异亮氨酸 isoleucine Ile I 6.02 苯丙氨酸苯丙氨酸 phenylalanine Phe F 5.48脯氨酸脯氨酸 proline Pro P 6.301. 非极性疏水性氨基酸非极性疏水性氨基酸2021/3/1411色氨

6、酸色氨酸 tryptophan Try W 5.89丝氨酸丝氨酸 serine Ser S 5.68酪氨酸酪氨酸 tyrosine Try Y 5.66 半胱氨酸半胱氨酸 cysteine Cys C 5.07 蛋氨酸蛋氨酸 methionine Met M 5.74天冬酰胺天冬酰胺 asparagine Asn N 5.41 谷氨酰胺谷氨酰胺 glutamine Gln Q 5.65 苏氨酸苏氨酸 threonine Thr T 5.602. 极性中性氨基酸极性中性氨基酸2021/3/1412天冬氨酸天冬氨酸 aspartic acid Asp D 2.97谷氨酸谷氨酸 glutamic a

7、cid Glu E 3.22赖氨酸赖氨酸 lysine Lys K 9.74精氨酸精氨酸 arginine Arg R 10.76组氨酸组氨酸 histidine His H 7.593. 酸性氨基酸酸性氨基酸4. 碱性氨基酸碱性氨基酸2021/3/1413-OOC-CH-CH2-S+NH3S-CH2-CH-COO-+NH3-OOC-CH-CH2-S+NH3S-CH2-CH-COO-+NH3 半胱氨酸半胱氨酸 +胱氨酸胱氨酸二硫键二硫键-HH-OOC-CH-CH2-SH+NH3-OOC-CH-CH2-SH+NH3HS-CH2-CH-COO-+NH3HS-CH2-CH-COO-+NH32021/

8、3/1414（四）氨基酸的理化性质（四）氨基酸的理化性质1. 两性解离及等电点两性解离及等电点氨基酸是两性电解质氨基酸是两性电解质, ,其解离程度取决于其解离程度取决于所处溶液的酸碱度。所处溶液的酸碱度。等电点等电点(isoelectric point, pI) 在某一在某一pH的溶液中的溶液中,氨基酸解离成阳氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等离子和阴离子的趋势及程度相等,成为兼成为兼性离子性离子,呈电中性。此时溶液的呈电中性。此时溶液的pH值值称为称为该氨基酸的该氨基酸的等电点等电点。2021/3/1415pH=pI+OH-pHpI+H+OH-+H+pHpI氨基酸的兼性离子氨基酸的兼

9、性离子 阳离子阳离子阴离子阴离子CHNH2COOHR CHNH2COOHRCHNH3+COO-R CHNH3+COO-RCHNH2COO-R CHNH2COO-RCH COOHRNH3+CH COOHRNH3+2021/3/14162. 紫外吸收紫外吸收 色氨酸、酪氨酸色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在的最大吸收峰在 280 nm 附近。附近。大多数蛋白质含大多数蛋白质含有这两种氨基酸残基有这两种氨基酸残基,所以测定蛋白质溶液所以测定蛋白质溶液280nm的光吸收值是的光吸收值是分析溶液中蛋白质含量分析溶液中蛋白质含量的快速简便的方法。的快速简便的方法。芳香族氨基酸的紫外吸收芳香族氨基酸的紫外吸收20

10、21/3/14173. 茚三酮反应茚三酮反应 氨基酸与茚三酮水合物共热氨基酸与茚三酮水合物共热,可生成可生成蓝蓝紫色紫色化合物化合物,其最大吸收峰在其最大吸收峰在570nm处。处。由于此吸收峰值与氨基酸的含量存在正比由于此吸收峰值与氨基酸的含量存在正比关系关系,因此可作为氨基酸定量分析方法。因此可作为氨基酸定量分析方法。2021/3/1418三、肽三、肽* 肽键肽键(peptide bond)是由一个氨基酸的是由一个氨基酸的 -羧基与另一个氨基酸的羧基与另一个氨基酸的 -氨基脱水缩合氨基脱水缩合而形成的化学键。而形成的化学键。（一）肽（一）肽(peptide)2021/3/1419NH2-CH

11、-CHOOH甘甘氨氨酸酸NH2-CH-CHOOH甘甘氨氨酸酸NH-CH-CHOHO OH甘甘氨氨酸酸+-HOH甘氨酰甘氨酸甘氨酰甘氨酸肽键NH2-CH-C-N-CH-COOHHHHONH2-CH-C-N-CH-COOHHHHO2021/3/1420* * 肽肽是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物。合物。* * 两分子氨基酸缩合形成两分子氨基酸缩合形成二肽二肽, ,三分子氨基三分子氨基酸缩合则形成酸缩合则形成三肽三肽* * 肽链中的氨基酸分子因为脱水缩合而基团肽链中的氨基酸分子因为脱水缩合而基团不全不全, ,被称为被称为氨基酸残基氨基酸残基(residue)。*

12、* 由十个以内氨基酸相连而成的肽称为由十个以内氨基酸相连而成的肽称为寡寡肽肽(oligopeptide), ,由更多的氨基酸相连形由更多的氨基酸相连形成的肽称成的肽称多肽多肽(polypeptide)。2021/3/1421N 末端末端:多肽链中有多肽链中有自由氨基自由氨基的一端的一端C 末端末端:多肽链中有多肽链中有自由羧基自由羧基的一端的一端多肽链有两端多肽链有两端* 多肽链多肽链(polypeptide chain)是指许多氨是指许多氨基酸之间以肽键连接而成的一种结构。基酸之间以肽键连接而成的一种结构。2021/3/1422N末端末端C末端末端牛核糖核酸酶牛核糖核酸酶2021/3/142

13、3（二）（二） 几种生物活性肽几种生物活性肽 1. 谷胱甘肽谷胱甘肽(glutathione, GSH)2021/3/1424GSH过氧过氧化物酶化物酶H2O2 2GSH 2H2O GSSG GSH还原酶还原酶NADPH+H+ NADP+ GSHGSH的临床作用的临床作用: : 解毒和抗氧化能力解毒和抗氧化能力 是临床上重要的保肝药物是临床上重要的保肝药物. .2021/3/1425 第第 二二 节节蛋蛋 白白 质质 的的 分分 子子 结结 构构The Molecular Structure of Protein2021/3/1426蛋白质的分子结构包括蛋白质的分子结构包括 一级结构一级结构(

14、primary structure)二级结构二级结构(secondary structure)三级结构三级结构(tertiary structure)四级结构四级结构(quaternary structure)高级高级结构结构2021/3/1427定义定义蛋白质的一级结构指多肽链中氨基酸的排列蛋白质的一级结构指多肽链中氨基酸的排列顺序。顺序。一、蛋白质的一级结构一、蛋白质的一级结构主要的化学键主要的化学键肽键肽键, ,有些蛋白质还包括二硫键。有些蛋白质还包括二硫键。 2021/3/1428一级结构是蛋白质空间构象和特异生物学一级结构是蛋白质空间构象和特异生物学功能的基础。功能的基础。2021/

15、3/1429二、蛋白质的空间结构二、蛋白质的空间结构蛋白质分子中某一段肽链的局部空间蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构，即该段肽链主链骨架原子的相对空结构，即该段肽链主链骨架原子的相对空间位置，并不涉及氨基酸残基侧链间位置，并不涉及氨基酸残基侧链(R(R基团基团) )的构象的构象 。二级结构二级结构定义定义: : 主要的化学键主要的化学键: 氢键氢键 (一一)蛋白质二级结构蛋白质二级结构2021/3/1430肽单元肽单元参与肽键的参与肽键的6个原子个原子C 1、C、O、N、H、C 2位于同一平位于同一平面面,C 1和和C 2在平面上所处的位在平面上所处的位置为反式置为反式(trans)构型构

16、型,此同一平此同一平面上的面上的6个原子构成了所谓的个原子构成了所谓的肽肽单元单元 (peptide unit) 。2021/3/1431 蛋白质二级结构的基本形式蛋白质二级结构的基本形式 - -螺旋螺旋 ( -helix ) - -折叠折叠 ( -pleated sheet ) - -转角转角 ( -turn ) 无规卷曲无规卷曲 ( random coil ) 2021/3/1432（1 1） - -螺旋螺旋2021/3/14332021/3/1434（2 2） - -折叠折叠2021/3/1435（3） -转角和无规卷曲转角和无规卷曲 - -转角转角无规卷曲是用来阐述没有确定规律性的那部

17、无规卷曲是用来阐述没有确定规律性的那部分肽链结构。分肽链结构。 2021/3/1436(二二)蛋白质的三级结构蛋白质的三级结构疏水键、离子键、氢键和疏水键、离子键、氢键和 Van der Waals力等。力等。 主要的化学键主要的化学键整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置。整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置。即肽链中所有原子在三维空间的排布位置。即肽链中所有原子在三维空间的排布位置。定义定义 2021/3/1437亚基之间的结合力主要是疏水作用亚基之间的结合力主要是疏水作用, ,其次是其次是氢键和离子键。氢键和离子键。( (三三) )蛋白质的四级结构蛋白质的四级结构蛋白质分子中各亚基的空

18、间排布及亚基接蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用触部位的布局和相互作用, ,称为称为蛋白质的四级蛋白质的四级结构结构。有些蛋白质分子含有二条或多条多肽链有些蛋白质分子含有二条或多条多肽链, ,每每一条多肽链都有完整的三级结构一条多肽链都有完整的三级结构, ,称为蛋白质的称为蛋白质的亚基亚基 (subunit)。2021/3/1438血红蛋白血红蛋白的四级结构的四级结构 2021/3/1439肌红蛋白与血红蛋白的结构肌红蛋白与血红蛋白的结构 2021/3/1440蛋白结构的层次总结蛋白结构的层次总结2021/3/1441三、三、蛋白质结构与功能的关系蛋白质结构与功能的关系

19、The Relation of Structure and Function of Protein2021/3/1442镰形红细胞镰形红细胞Sickle Cell一级结构是空间构象的基础一级结构是空间构象的基础 （一）蛋白质一级结构与功能的关系（一）蛋白质一级结构与功能的关系 2021/3/1443牛核糖核酸酶的牛核糖核酸酶的一级结构一级结构二二硫硫键键2021/3/1444 天然状态天然状态, ,有有催化活性催化活性 尿素、尿素、 -巯基乙醇巯基乙醇 去除尿素、去除尿素、-巯基乙醇巯基乙醇非折叠状态非折叠状态, ,无活性无活性二、蛋白质空间结构与功能的关系二、蛋白质空间结构与功能的关系 20

20、21/3/1445第三节第三节蛋白质的理化性质与分离纯化蛋白质的理化性质与分离纯化The Physical and Chemical Characters and Separation and Purification of Protein2021/3/1446一、一、蛋白质的两性电离蛋白质的两性电离 蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外, ,氨氨基酸残基侧链中某些基团基酸残基侧链中某些基团, ,在一定的溶液在一定的溶液pHpH条件下条件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。都可解离成带负电荷或正电荷的基团。 * 蛋白质的等电点蛋白质的等电点( isoelec

21、tric point, pI) 当蛋白质溶液处于某一当蛋白质溶液处于某一pH时时,蛋白质解离成蛋白质解离成正、负离子的趋势相等正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子即成为兼性离子,净电荷净电荷为零为零,此时溶液的此时溶液的pH称为称为蛋白质的等电点。蛋白质的等电点。2021/3/1447二蛋白质的胶体性质二蛋白质的胶体性质 蛋白质属于生物大分子之一蛋白质属于生物大分子之一,分子量可自分子量可自1万至万至100万之巨万之巨,其分子的直径可达其分子的直径可达1100nm,为胶粒范围之内。为胶粒范围之内。 * * 蛋白质胶体稳定的因素蛋白质胶体稳定的因素颗粒表面电荷颗粒表面电荷水化膜水化膜2021/3

22、/1448+带正电荷的蛋白质带正电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质在等电点的蛋白质水化膜水化膜+带正电荷的蛋白质带正电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质不稳定的蛋白质颗粒不稳定的蛋白质颗粒酸酸碱碱酸酸碱碱酸酸碱碱脱水作用脱水作用脱水作用脱水作用脱水作用脱水作用溶液中蛋白质的聚沉溶液中蛋白质的聚沉2021/3/1449三、蛋白质的变性、沉淀和凝固三、蛋白质的变性、沉淀和凝固 * 蛋白质的变性蛋白质的变性(denaturation)在某些物理和化学因素作用下在某些物理和化学因素作用下,其特定的空其特定的空间构象被破坏间构象被破坏,也即有序的空间结构变成无序的也即有

23、序的空间结构变成无序的空间结构空间结构,从而导致其理化性质改变和生物活性从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。的丧失。2021/3/1450造成变性的因素造成变性的因素 变性的本质变性的本质 破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。质的一级结构。 引起蛋白质变性的原因可分为物理和化学因素引起蛋白质变性的原因可分为物理和化学因素两类。物理因素可以是加热、加压、乙醇、丙酮、两类。物理因素可以是加热、加压、乙醇、丙酮、紫外线照射、超声波的作用等紫外线照射、超声波的作用等; ;化学因素有强酸、化学因素有强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂十二烷基磺酸钠强碱、重金属

24、离子及生物碱试剂十二烷基磺酸钠(SDS)(SDS)等。等。2021/3/1451 应用举例应用举例临床医学上临床医学上, ,变性因素常被应用来消毒及灭变性因素常被应用来消毒及灭菌。菌。1.加热、加压。加热、加压。 2. 75%乙醇。乙醇。3.紫外灯照射紫外灯照射4. 4.重金属离子中毒的高蛋白洗胃。重金属离子中毒的高蛋白洗胃。5.生物碱试剂检测生物碱试剂检测蛋白尿。蛋白尿。此外此外, ,低温防止蛋白质变性也是有效保存蛋低温防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂（如疫苗等）的必要条件。白质制剂（如疫苗等）的必要条件。 2021/3/1452若蛋白质变性程度较轻若蛋白质变性程度较轻,去除变性因素后去

25、除变性因素后,蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能功能,称为称为复性复性(renaturation) 。2021/3/1453 天然状态天然状态, ,有催化活性有催化活性 尿素、尿素、 -巯基乙醇巯基乙醇 去除尿素、去除尿素、-巯基乙醇巯基乙醇非折叠状态非折叠状态, ,无活性无活性2021/3/1454* * 蛋白质沉淀蛋白质沉淀在一定条件下在一定条件下, ,蛋白疏水侧链暴露在外蛋白疏水侧链暴露在外, ,肽链肽链融会相互缠绕继而聚集融会相互缠绕继而聚集, ,因而从溶液中析出。因而从溶液中析出。变性的蛋白质易于沉淀变性的蛋白质易于沉淀, ,有时蛋白质发

26、生沉淀有时蛋白质发生沉淀, ,但并不变性。但并不变性。 * 蛋白质的凝固作用蛋白质的凝固作用(protein coagulation) 蛋白质变性后的絮状物加热可变成比较坚固蛋白质变性后的絮状物加热可变成比较坚固的凝块的凝块, ,此凝块不易再溶于强酸和强碱中。此凝块不易再溶于强酸和强碱中。 2021/3/1455四、蛋白质的紫外吸收四、蛋白质的紫外吸收由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸和色氨酸,因此在因此在280nm波长处有特征性吸收峰。波长处有特征性吸收峰。蛋白质的蛋白质的OD280与其浓度呈正比关系与其浓度呈正比关系,因此可作因此可作蛋白质定量

27、测定。蛋白质定量测定。2021/3/1456五、蛋白质的呈色反应五、蛋白质的呈色反应茚三酮反应茚三酮反应(ninhydrin reaction) 蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚三酮反应。三酮反应。 双缩脲反应双缩脲反应(biuret reaction)蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与硫酸铜共热硫酸铜共热,呈现紫色或红色呈现紫色或红色,此反应称为此反应称为双缩脲双缩脲反应反应,双缩脲反应可用来检测蛋白质水解程度。双缩脲反应可用来检测蛋白质水解程度。2021/3/14571.1.丙酮沉淀、盐析丙酮沉淀、盐析*使用使用

28、丙酮沉淀丙酮沉淀时时,必须在必须在04低温下进行低温下进行,丙丙酮用量一般酮用量一般10倍于蛋白质溶液体积。蛋白质倍于蛋白质溶液体积。蛋白质被丙酮沉淀后被丙酮沉淀后,应立即分离。除了丙酮以外应立即分离。除了丙酮以外,也也可用乙醇沉淀。可用乙醇沉淀。 *盐析盐析(salt precipitation)是将硫酸铵、硫酸钠是将硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等加入蛋白质溶液或氯化钠等加入蛋白质溶液, ,使蛋白质表面电使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏荷被中和以及水化膜被破坏, ,导致蛋白质沉淀。导致蛋白质沉淀。 六、蛋白质的分离和纯化六、蛋白质的分离和纯化2021/3/14582.2.电泳电泳蛋白质在高于

29、或低于其蛋白质在高于或低于其pIpI的溶液中为带电的溶液中为带电的颗粒的颗粒, ,在电场中能向正极或负极移动。这种在电场中能向正极或负极移动。这种通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术质的技术, , 称为称为电泳电泳(elctrophoresis) 。根据支撑物的不同根据支撑物的不同, ,可分为薄膜电泳、凝可分为薄膜电泳、凝胶电泳等。胶电泳等。 2021/3/1459几种重要的蛋白质电泳几种重要的蛋白质电泳*SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于蛋白质常用于蛋白质分子量的测定。分子量的测定。*等电聚焦电泳等电聚焦电泳,通过蛋白质等

30、电点的差异而通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。分离蛋白质的电泳方法。*双向凝胶电泳双向凝胶电泳是蛋白质组学研究的重要技是蛋白质组学研究的重要技术。术。2021/3/14603.3.透析及超滤法透析及超滤法* 透析透析(dialysis)利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。开的方法。* * 超滤法超滤法 应用正压或离心力使蛋白质溶液透过有一定截留应用正压或离心力使蛋白质溶液透过有一定截留分子量的超滤膜分子量的超滤膜,达到浓缩蛋白质溶液的目的。达到浓缩蛋白质溶液的目的。2021/3/14614.层析层析层析层析(chromatogr

31、aphy)分离蛋白质的原理分离蛋白质的原理待分离蛋白质溶液（流动相）经过一个固待分离蛋白质溶液（流动相）经过一个固态物质（固定相）时态物质（固定相）时, ,根据溶液中待分离的蛋根据溶液中待分离的蛋白质颗粒大小、电荷多少及亲和力等白质颗粒大小、电荷多少及亲和力等, ,使待分使待分离的蛋白质组分在两相中反复分配离的蛋白质组分在两相中反复分配, ,并以不同并以不同速度流经固定相而达到分离蛋白质的目的速度流经固定相而达到分离蛋白质的目的 。2021/3/1462蛋白质分离常用的层析方法蛋白质分离常用的层析方法* * 离子交换层析离子交换层析: :利用各蛋白质的电荷量及性质利用各蛋白质的电荷量及性质不同

32、进行分离。不同进行分离。* * 凝胶过滤凝胶过滤(gel filtration)又称分子筛层析又称分子筛层析, ,利用利用各各蛋白质分子大小不同分离。蛋白质分子大小不同分离。2021/3/14632021/3/14642021/3/1465（五）超速离心（五）超速离心* * 超速离心法超速离心法(ultracentrifugation)既可以既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量。白质的分子量。 *蛋白质在离心场中的行为用蛋白质在离心场中的行为用沉降系数沉降系数(sedimentation coefficient, S)表示表示,沉沉降系数与蛋白质的密度和形状相关降系数与蛋白质的密度和形状相关 。2021/3/1466因为沉降系数因为沉降系数S大体上和分子量成正比大体上和分子量成正比关系关系,故可应用超速离心法测定蛋白质分子量故可应用超速离心法测定蛋白质分子量,但对分子形状的高度不对称的大多数纤维状但对分子形状的高度不对称的大多数纤维状蛋白质不适用。蛋白质不适用。2021/3/14672、-折叠折叠(-pleated