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文档简介
1、会计学1高三一轮基因工程高三一轮基因工程1基因工程的操作流程图基因工程的操作流程图第1页/共26页2植物组织培养流程图植物组织培养流程图第2页/共26页3动物细胞培养流程图动物细胞培养流程图第3页/共26页4单克隆抗体制备流程图单克隆抗体制备流程图第4页/共26页第5页/共26页基基 因因 工工 程程第6页/共26页1基因工程的基本工具基因工程的基本工具第7页/共26页第8页/共26页第9页/共26页(3)将目的基因导入受体细胞:将目的基因导入受体细胞:第10页/共26页(4)目的基因的检测与鉴定:目的基因的检测与鉴定:第11页/共26页BC第12页/共26页2(2012新课标全国卷新课标全国
2、卷)根据基因工程的有关知识,回答根据基因工程的有关知识,回答下列问题:下列问题:(1)限制性内切酶切割限制性内切酶切割 DNA 分子后产生的片段,其末分子后产生的片段,其末端类型有端类型有_和和_。(2)质粒运载体用质粒运载体用EcoR I 切割后产生的片段如下:切割后产生的片段如下:AATTCG GCTTAA为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA 除除可用可用 EcoR I 切割外,还可用另一种限制性内切酶切割切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是,该酶必须具有的特点是_。黏性末端黏性末端平末端平末端切割产生的切割产生的DN
3、A 片段末端与片段末端与EcoR 切割产生的相同切割产生的相同第13页/共26页(3)按其来源不同,基因工程中所使用的按其来源不同,基因工程中所使用的DNA 连接酶有两类连接酶有两类,即,即_DNA 连接酶和连接酶和_DNA 连接酶。连接酶。(4)反转录作用的模板是反转录作用的模板是_,产物是,产物是_。若要。若要在体外获得大量反转录产物,常采用在体外获得大量反转录产物,常采用_技术。技术。(5)基因工程中除质粒外,基因工程中除质粒外,_和和_也可作为运也可作为运载体。载体。(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作
4、为受体细胞,原因是未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是_。大肠杆菌大肠杆菌(Ecoli)T4mRNA (或或 RNA)cDNA(或或 DNA)PCR噬菌体噬菌体动植物病毒动植物病毒未处理的大肠杆菌吸收质粒未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源外源 DNA)的能力极弱的能力极弱第14页/共26页细细 胞胞 工工 程程第15页/共26页1植物体细胞杂交与单克隆抗体的制备过程比较植物体细胞杂交与单克隆抗体的制备过程比较步骤步骤植物体细胞杂交过程植物体细胞杂交过程单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程第一步第一步原生质体的制原生质体的制备备(酶解法酶解法)正常小鼠免疫处理正常小鼠免疫处理第二步第二步原生质体融合
5、原生质体融合(物、化法物、化法)动物细胞融合动物细胞融合(物、物、化、生法化、生法)第三步第三步杂种植株的筛杂种植株的筛选与培养选与培养杂交瘤细胞筛选与杂交瘤细胞筛选与培养培养第四步第四步杂种植株诱导杂种植株诱导与鉴定与鉴定单克隆抗体的提纯单克隆抗体的提纯第16页/共26页2植物组织培养与动物细胞培养的比较植物组织培养与动物细胞培养的比较项目项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养取材取材植物幼嫩部位植物幼嫩部位动物胚胎或出生不久的幼龄动物动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织的器官或组织过程过程第17页/共26页第18页/共26页3下列有关细胞工程的叙述中,不正确的是下列有关细
6、胞工程的叙述中,不正确的是 ()A培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 (2008江苏高江苏高考,考,20A)B去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶酶处理处理(2008全国卷全国卷,5B)C利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制,培育远利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制,培育远缘缘杂种杂种 (2009全国全国卷卷,4A)D二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的 (2010浙江浙江高考,高考,4C). .D第19页/共26页4(201
7、2广东高考广东高考)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是 ()A组织培养组织培养B细胞杂交细胞杂交C显微注射显微注射 D核移植核移植A第20页/共26页(2012浙江高考浙江高考)天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是 ()A提取矮牵牛蓝色花的提取矮牵牛蓝色花的mRNA, 经逆转录获得互补的经逆转录获得互补的DNA, 再
8、扩再扩 增基因增基因BB利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取 基因基因BC利用利用DNA 聚合酶将基因聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞与质粒连接后导入玫瑰细胞D将基因将基因B直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞A第21页/共26页 注:注: 受体种类不同,所用的受体细胞种类也不相同。受体种类不同,所用的受体细胞种类也不相同。 (1)植物:由于植物细胞有全能性,植物体细胞经过植植物:由于植物细胞有全能性,植物体细胞经过植物组织培养能够形成生物体,所以植物的受体细胞一般是体物组织培
9、养能够形成生物体,所以植物的受体细胞一般是体细胞。细胞。 (2)动物:由于不能把动物的一个体细胞培养成一个个体动物:由于不能把动物的一个体细胞培养成一个个体,所以动物基因工程的受体细胞不是体细胞,而是受精卵。,所以动物基因工程的受体细胞不是体细胞,而是受精卵。 (3)微生物:多用原核生物细胞,因为原核生物繁殖快,微生物:多用原核生物细胞,因为原核生物繁殖快,多为单细胞,遗传物质相对较少。多为单细胞,遗传物质相对较少。第22页/共26页细细 胞胞 工工 程程1(2011江苏高考江苏高考)关于现代生物技术应用的叙述,错误的是关于现代生物技术应用的叙述,错误的是()A蛋白质工程可合成自然界中不存在的
10、蛋白质蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒D动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育B第23页/共26页2动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础,在动物细胞动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础,在动物细胞工程的其他技术中都得到了广泛应用。下面是与动物细工程的其他技术中都得到了广泛应用。下面是与动物细胞工程相关的问题,请分析回答:胞工程相关的问题,请分析回答:(1)在进行动物细胞培养时,首先要将动物组织
11、剪碎,然在进行动物细胞培养时,首先要将动物组织剪碎,然后用后用_处理,使其分散成单个细胞,制成细胞悬处理,使其分散成单个细胞,制成细胞悬液。液。(2)动物细胞培养时,要保证细胞必需的营养、适宜的温动物细胞培养时,要保证细胞必需的营养、适宜的温度和度和pH条件,还要提供无菌、无毒和条件,还要提供无菌、无毒和_。气体环。气体环境中境中CO2的作用是的作用是_。为达到无菌、。为达到无菌、无毒的环境条件,除了要对培养液和培养器具进行无菌无毒的环境条件,除了要对培养液和培养器具进行无菌处理外,还要处理外,还要_。胰蛋白酶胰蛋白酶(胶原蛋白酶胶原蛋白酶)适宜的气体环境适宜的气体环境维持培养液中的维持培养液中的pH在培养液中加入一定量的抗生素,定期更换培养液在培养液中加入一定量的抗生素,定期更换培养液第24页/共26页(3)应用于核移植的供体细胞一般选用传代应用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞,原代以内的细胞,原因是因是_。(4)制备单克隆抗体的基础是动物细胞培养技术,单克隆抗体技制备单克隆抗体的基础是动物细胞培养技术,单克隆抗体技术是将在体外培养条件下能术是将在体外培养条件下能_的小鼠骨髓瘤细胞与某种的小鼠骨髓瘤细胞与某种B淋巴细胞融合,筛选出
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