3.2月季的花药培养PPT课件

1、花的结构花的结构:花粉粒(1N)单倍体植株(1N)二倍体纯合子植株(2N)（一）被子植物的花粉发育1.被子植物的花粉是在 中由 细胞 经过 分裂形成的。 所以，花粉是 的生殖细胞一、基础知识：花药花药花粉母花粉母减数减数单倍体单倍体花丝花丝花药：囊状结构花药：囊状结构, ,内有很多花粉内有很多花粉雄蕊P37( (一一) )被子植物的花粉发育被子植物的花粉发育小孢子母细胞小孢子母细胞(2n)( )时期时期(n)( )分裂分裂( )( )细胞核细胞核(n)(n)( ( ) )分裂分裂花粉粒花粉粒( (双核期双核期) )( )居中期居中期(n)( )靠边期靠边期(n)生殖生殖( )( )细胞核细胞核

2、(n)(n)花粉管花粉管( )( )细胞细胞(n)(n) ( )( )细胞细胞(n)(n)( )( )个精子个精子(n)(n)生殖生殖营养营养2 2四分体四分体单核单核单核单核有丝( ( ) )分裂分裂有丝减数填图：(2)在正常情况下,若一个有24对染色体的植物开花， 其一个小孢子母细胞可以产生 个精子， 精子中的染色体数目是 ； 在一枚花药中可以产生很多个花粉。(1)由此可见,被子植物的花粉的发育要经历 时期， 期和 期等阶段。单核双核8 82424条条2个精子和1个营养核的基因型是否相同?相 同1212对？对？【思考1】营养细胞在花粉管生长过程中的作用是什么？【思考2】花粉的染色体组成与体

3、细胞有什么区别？ 为什么？【思考3】减数分裂过程中和被子植物花粉发育 过程中的四分体是一回事吗？为什么？控制花粉的萌发并提供营养。花粉的染色体只有体细胞的一半，无同源染色体（二倍体生物）不是一回事。前者的四分体时期是指同源染色体配对后，一对同源染色体含有四条染色单体的阶段；后者的四分体时期是指4个单倍体的细胞（小孢子）连在一起的时期。( (二二) )产生花粉植株的两种途径：产生花粉植株的两种途径：胚状体胚状体愈愈织织愈伤愈伤组织组织胚状体胚状体【思考4】花药培养产生花粉植株的两种途径的差别主要取决于 。培养基中激素的种类及浓度配比(没有绝对的界限)丛芽丛芽P38第二段【思考6】单倍体性细胞产生

4、的花粉胚,也可发育成为单倍体植株，这和植物的体细胞克隆有区别吗？【思考5】什么是体细胞胚？ 在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。 有区别。单倍体性细胞发育成的单倍体植株表现为高度不育，植物的体细胞克隆的植株可育。P38小字从花药来看,应当选择 (初花期、盛花期、晚花期)的花药;从花粉来看,应当选择 (四分体期、单核期、双核期、萌发期)的花粉，因为单核期以前的花药 ，选择单核期以后的花药接种， ;从花蕾来看,应当选择 (完全未开放、略微开放、完全盛开)的花蕾。2.材料的选择: 花瓣已有些松动又给材料的消毒带来

5、困难，且难以挑选到单核期的花药 ( (三三) )影响花药培养的因素影响花药培养的因素 1. 1.影响花粉植株成功与否和成功率的主要因素：影响花粉植株成功与否和成功率的主要因素： 和 等。材料的选择培养基的组成质地幼嫩，极易破碎 完全未开放初花期单核期P39【思考7】为什么选择合适的花粉发育期是诱导花药培养成功率的重要因素？ 因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体，花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。【思考8】为什么花药的培养要选择完全未开放的花蕾？这种花蕾,可挑选到单核期的花药,菌少、易消毒【思考9】为什么花瓣松动会给材料消毒带来困难？松动后微生物就可能侵入到花

6、药,给材料的消毒带来困难【思考10】除此之外,你认为影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？植物的种类、亲本植株的生长条件、材料的低温预处理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件P38-39P39P39二、实验操作（一）材料的选取1.选择花药时一般通过 确定花粉发育时期， 此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂 是 和焙花青铬钒溶液，它们分别可以 将细胞核染成 色和 色。2.在使用焙花青铬钒溶液时，需要首先将花药用 处理20min。该试剂的配制方法 是将 按体积比为 的比例 混合均匀。 镜检醋酸洋红蓝黑3:1红无水酒精和冰醋酸 卡诺氏固定液P39（二）材料的消毒花蕾花蕾( 酒精酒精 )大约大约

7、30s( )清洗清洗( )吸干水分吸干水分( )24min( )冲洗冲洗70%质量分数为质量分数为0.1%0.1%的氯化汞的氯化汞无菌水无菌水无菌吸水纸无菌吸水纸无菌水无菌水【思考11】月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较， 二者有何不同？ 在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗。【思考12】为什么不直接给花药消毒而是给整个花蕾消毒？ 用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。【思考13】实验完毕后1氯化汞溶液应如何处理？ 收集、回收或运至废物处理场所处置（收集好后，运到垃圾处理站专门处理）实验室内少

8、量HgCl2可以转化成HgS来进行销毁， 即：HgCl2+Na2S=HgS（沉淀）+2NaCl由于HgS溶于过量硫化物中，所以往往需要加入硫酸亚铁 进行共沉淀。3.培养:花药培养利用的培养基是 培养基,pH为 ， 温度为 ,幼苗形成之前 (需要、不需要)光照。2.接种花药:剥取的花药要立刻接种到 培养基上。 每个培养瓶接种 个花药。（三）接种和培养1.剥取花药:消毒后的花蕾,要在 条件下除去花萼、 花瓣。在剥离花药时,要尽量不损伤花药，否则 ,还要彻底除去花丝,因为 : 。 容易从受伤部位产生愈伤组织 与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成 无菌MS710MS5.825不需要P39-40

9、4.培养2030d后,花药开裂,长出 或释放出 。前者还要转移到 上进行分化 培养成再生植株；后者要尽快 并转移到新的 培养基上。5.通过愈伤组织形成的植株，常常会出现 的变化，因而需要鉴定和筛选。愈伤组织胚状体分化培养基 分开染色体倍性【思考14】为什么通过愈伤组织形成的植株会发生 染色体倍性的变化？有些是由花粉发育形成的单倍体植株，有些是由花粉壁细胞发育形成的二倍体植株。【思考15】植物组织培养技术与花药培养技术有何异同？相同点：不同点： 二者均为离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织, 再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。植物组织培养技术所用的外植体为体细胞，染色体数无需加倍。 而花药培养

10、技术取材为花药，培养的为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。总结：总结：1.基因型为AaBb的水稻(条染色体)的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下培养成试管苗。()愈伤组织是花粉细胞分裂形成的不规则的细胞团， 愈伤组织必须从培养基中获得( )( )和 小分子有机物等营养物质。()要促进花粉细胞的分裂分化,培养基中应有( ) ( )两种激素。愈伤组织分化是指愈伤组织 形成芽和根，由芽发育成叶茎。这一过程必须给予 光照，其原因是( )利用光能制造有机物促进 试管苗生长发育。()试管苗的细胞核中有()条脱氧核苷酸链。 试管苗的基因型有： 水水无机盐生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素叶叶24AB Ab aB ab2.(9分)草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代，导致产量降低。品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草 莓微型繁殖的基本过程如下： 外植体 愈伤组织 芽、根 植株请回答：(1)微型繁殖培育无病毒草莓苗时,一般选取_作为外植体，其依据是 。茎尖、根尖茎尖、根尖不含病毒(2)在过程中,常用的MS培养基主要成分包括大量元素