溶出度分析方法验证

1、 验证总体的一部分验证总体的一部分 ICHICHQ2(R1)Q2(R1)规定参数规定参数 USPUSP提供额外帮助提供额外帮助 验证参数验证参数 验证标准验证标准 贯彻药品生命的验证理念贯彻药品生命的验证理念 验证总体的一部分验证总体的一部分 期望高精密度值期望高精密度值 差异总体影响因素差异总体影响因素 ICH Q2(R1)ICH Q2(R1)提供了清晰的指南提供了清晰的指南 不要忘记溶出程序的其他部分：不要忘记溶出程序的其他部分：溶出测试本身溶出测试本身取样方法取样方法转移，处理和保存转移，处理和保存分析结果的计算分析结果的计算- -不需要不需要+ +需要需要(1)(1)如果做了重复性就无

2、需如果做了重复性就无需做中间精密度做中间精密度分析程序类别 含量测定-溶出度(仅指测定)-含量/效价参数参数 精确度精确度+精密度精密度重复性重复性中间精密度中间精密度 + +(1)+(1) 专属性专属性 +检测性检测性-定量限定量限-线形线形+范围范围+ 举例举例空白：所有辅料包括包衣空白：所有辅料包括包衣三批空白混合样品，与最大规格和最小三批空白混合样品，与最大规格和最小规格比例一致规格比例一致适当时加入墨印，沉降篮，胶囊壳适当时加入墨印，沉降篮，胶囊壳转移至装有转移至装有3737溶出介质的单个溶出杯中溶出介质的单个溶出杯中采用该方法装置在采用该方法装置在150rpm150rpm转动转动3

3、030至至6060分钟分钟 如空白干扰超过如空白干扰超过2 2替代的检测波长替代的检测波长替代的分析方法替代的分析方法扣除参比波长的读数扣除参比波长的读数使用扫描光谱的二阶导数使用扫描光谱的二阶导数基线扣除基线扣除( (校正因子校正因子) )干扰物的去活性干扰物的去活性 HPLCHPLC分析分析 和药物在相同保留时间处出峰和药物在相同保留时间处出峰 外来峰注入标准溶液并比较保留时间外来峰注入标准溶液并比较保留时间 如保留时间太接近，向药物中加入空白溶如保留时间太接近，向药物中加入空白溶液液 HPLCHPLC分析分析 延长空白，标准和样品溶液的运行时间获延长空白，标准和样品溶液的运行时间获得色谱

4、图来识别洗脱晚的化合物得色谱图来识别洗脱晚的化合物 溶出介质，过滤的空白溶液，标准溶液和溶出介质，过滤的空白溶液，标准溶液和过滤溶出样品的典型色谱图过滤溶出样品的典型色谱图 在空白图谱中未出现干扰峰在空白图谱中未出现干扰峰 不超过不超过5 5(V/V)(V/V)的有机溶剂来增强制备标的有机溶剂来增强制备标准溶液的药物稳定性准溶液的药物稳定性 制备份药物的标准溶液，范围覆盖该制制备份药物的标准溶液，范围覆盖该制剂规格溶出曲线从最低期望浓度的剂规格溶出曲线从最低期望浓度的2020至最高浓度的至最高浓度的+20+20 至少双份至少双份 最高浓度应不超过仪器的线性范围最高浓度应不超过仪器的线性范围 合

5、适的最小平方衰退程序合适的最小平方衰退程序 r r2 2 0.980.98 轴截距在轴截距在9595置信区间必须不明显偏离置信区间必须不明显偏离0 0浓度水平浓度水平( () )制剂规格的溶制剂规格的溶出度出度药物浓度药物浓度(ug/ml)(ug/ml)平均吸收值平均吸收值（n=2n=2）吸收单一值吸收单一值40403.23153.23150.126800.126800.12680.12680.12500.12503.49243.49240.137050.137050.13780.13780.13630.136360605.02625.02620.200000.200000.20220.202

6、20.19780.19784.90644.90640.193350.193350.19490.19490.19180.191880809.00309.00300.356550.356550.36000.36000.35310.35318.84128.84120.352300.352300.35610.35610.34850.348510010013.292713.29270.528250.528250.53500.53500.52150.521512.911712.91170.509850.509850.51390.51390.50580.505812012012.525912.52590.6

7、10950.610950.61800.61800.60390.603915.655315.65530.612650.612650.61750.61750.60780.6078 通常为释放过程中药物粉末最低期望浓度通常为释放过程中药物粉末最低期望浓度的的-20-20到最大浓度的到最大浓度的+20+20 至少个浓度水平，每个水平测试次至少个浓度水平，每个水平测试次 合适时加入空心胶囊，混合包衣，墨印和合适时加入空心胶囊，混合包衣，墨印和沉降篮沉降篮 空白中混合量应与制剂中一致空白中混合量应与制剂中一致 装置和根据方法中规定的条件测试装置和根据方法中规定的条件测试辅料和药物粉末的混合物辅料和药物粉末

8、的混合物 难溶性药物储备液药物溶解在有机溶难溶性药物储备液药物溶解在有机溶剂中剂中( (最大不超过最终体积的最大不超过最终体积的5 5) ) 储备液转移至溶出杯中储备液转移至溶出杯中 回收率通常为称样量的回收率通常为称样量的9595-105-105 缓释制剂的酸化阶段缓释制剂的酸化阶段篮法，篮法，100rpm,HPLC100rpm,HPLC制备对照品溶液制备对照品溶液溶出杯中加入不多于溶出杯中加入不多于1000mL1000mL的溶出介质，加的溶出介质，加入一片空白片入一片空白片溶液介质加热到溶液介质加热到37375 5加入加入mLmL对照品溶液对照品溶液4545分钟后取样，过滤，分钟后取样，过

9、滤，分析分析理论值回收率16.3897.5096.3497.92平均下限95 CL上限95 CL97.2595.2299.2981.8897.9498.0897.57平均下限95 CL上限95 CL97.8697.2198.52106.4598.7898.2497.90平均下限95 CL上限95 CL98.3197.2099.41131.8098.5596.8597.33平均下限95 CL上限95 CL97.5895.4099.75平均(n=12)97.75RSD 0.7095CI平均0.44篮法，篮法，100rpm,HPLC100rpm,HPLC由线性实验中导出：线性关系由线性实验中导出：线

10、性关系标准标准处方中加入标准处方中加入标准线性斜率：线性斜率：11.190511.190511.154011.1540Y Y截至：截至：-7.0650-7.0650-7.5006-7.5006相关因子：相关因子：0.99990.99990.99950.9995斜率比例斜率比例( (点样点样标准标准) )99.6799.67 基线对基线对APIAPI的干扰的干扰 基于不同剂型的不同假设：基于不同剂型的不同假设：辅料溶于辅料溶于API-API-即恒定的比例关系即恒定的比例关系辅料在辅料在APIAPI溶出前悬浮并溶解即辅溶出前悬浮并溶解即辅料量恒定，料量恒定， APIAPI逐渐增加逐渐增加( (标准

11、加入技术标准加入技术) )辅料难溶或不溶即机质不溶，辅料难溶或不溶即机质不溶， APIAPI溶出溶出 所有适用的概念可参照制剂技术判定所有适用的概念可参照制剂技术判定 系统重复性系统重复性一份对照品溶液多次测定一份对照品溶液多次测定计算计算RSDRSD 方法重复性方法重复性制备相同浓度的样品溶液多份制备相同浓度的样品溶液多份从准确度和线性数据推出从准确度和线性数据推出NO.NO.3030分钟后药物溶出度分钟后药物溶出度%标示量标示量200mg200mg400mg400mg600mg600mg800mg800mg1 1100.8100.8100.9100.9100.8100.897.797.79

12、9.099.02 2104.1104.198.698.6103.0103.097.797.796.896.83 3103.9103.9102.9102.9100.5100.5104.6104.6100.7100.74 4102.5102.5100.2100.2102.5102.5105.1105.1103.4103.45 5104.5104.5100.9100.9102.3102.3101.5101.5100.5100.56 6103.4103.4100.0100.0101.2101.298.398.399.299.2制剂规格制剂规格mgmg20020040040060060080080080

13、0800数据个数数据个数6 66 66 66 66 6平均值平均值%103.2103.2100.6100.6101.7101.7100.8100.899.999.9标准值标准值1.361.361.411.411.021.023.433.432.202.20相对标准偏差相对标准偏差（%）1.321.321.411.411.001.003.403.402.202.20最小值（最小值（%）100.8100.898.698.6100.5100.597.797.796.896.8QQ80%80%80%80%80%80%80%80%80%80%取样时间取样时间30min30min30min30min30m

14、in30min15min15min30min30min 随机因素对方法精密度的影响随机因素对方法精密度的影响 覆盖药品规格范围覆盖药品规格范围 至少两个分析员在不同日期测定至少两个分析员在不同日期测定 使用含量均匀度高且品质好的药品使用含量均匀度高且品质好的药品 永远不要使用一种已经成功上市的商业永远不要使用一种已经成功上市的商业样品样品 两个分析员溶出结果的平均值相差不得两个分析员溶出结果的平均值相差不得超过超过 10%10%，当该时间点的溶出量小于，当该时间点的溶出量小于85%85%时；时； 5%5%，当该时间点的溶出量大于，当该时间点的溶出量大于85%85%时时 可接受标准可根据特定产品

15、规定可接受标准可根据特定产品规定第第1 1天天/ /仪器仪器1/1/分析员分析员1 1第第2 2天天/ /仪器仪器1/1/分析员分析员2 2平均回收率平均回收率制剂规格制剂规格药物溶出度药物溶出度制剂规格制剂规格药物溶出度药物溶出度（n=12n=12）200mg200mg100.8100.8200mg200mg106.2106.2104.1104.1104.9104.9103.9103.9101.0101.0102.5102.5105.6105.6103.98%103.98%104.5104.5105.4105.4103.4103.4105.5105.5400mg400mg100.9100.9

16、400mg400mg98.998.998.698.6101.0101.0102.9102.999.899.8100.17%100.17%100.2100.2100.4100.4100.9100.998.998.9100.0100.099.599.5篮法，篮法，100rpm,HPLC100rpm,HPLC通过不同方法参数的差异，根据统计学设计测试溶出度的耐受性通过不同方法参数的差异，根据统计学设计测试溶出度的耐受性( (方法中的方法中的“样品制备部分样品制备部分”) )：因素因素低水平低水平中水平中水平高水平高水平转篮速度转篮速度95rpm95rpm100rpm100rpm105rpm105rp

17、m表面活性剂浓度表面活性剂浓度0.20%0.20%0.25%0.25%0.30%0.30%温度温度363637373838酸浓度酸浓度0.9mM0.9mM1.0mM1.0mM1.1mM1.1mM分析员分析员A An/an/a8 8仪器仪器1 1n/an/a2 2制剂规格制剂规格1 1n/an/a2 2这是个有意义的验证吗？这是个有意义的验证吗？这可以是方法开发的一部分吗？这可以是方法开发的一部分吗？请提供论据请提供论据HPLCHPLC 1 1 流动相组分的差异流动相组分的差异流速流速值值色谱柱类型色谱柱类型分离温度分离温度波长波长光谱分析光谱分析波长波长对照品溶液对照品溶液过一定时间再分析过一

18、定时间再分析在每个时间间隔点与新鲜配制的对照品比在每个时间间隔点与新鲜配制的对照品比较较结果是原始结果的结果是原始结果的98%98%至至102%102% 样品溶液样品溶液室温保存室温保存过一定时间再分析过一定时间再分析结果与原始结果比较结果与原始结果比较结果是原始结果的结果是原始结果的98%98%至至102%102%必要时溶液可以避光保存必要时溶液可以避光保存方法可说明溶液的有效期方法可说明溶液的有效期必要时溶液要避光必要时溶液要避光必要时使用玻璃仪器替代塑料容器必要时使用玻璃仪器替代塑料容器采取方法采取方法配制溶出介质并室温保存配制溶出介质并室温保存2828天天采用相似因子比较曲线采用相似因子比较曲线确认仪器的有关性能参数确认仪器的有关性能参数确证材料，如对照品和试剂确证材料，如对照品和试剂说明采用的方法，目的和范围说明采用的方法，目的和范围进行仪器的预验证进行仪器的预验证规定性能参数和可接受标准规定性能参数和可接受标准制定验证方案或验证操作规程制定验证方案或验证操作规程制定验证试验制定验证试验进行全面的内部进行全面的内部( (和外部和外部) )验证试验验证试验必要时调整方法参数或和可接受标准必要时调整方法参数或和可接受标准1010在验证报告中记录验证试验和结果在验证报告中记录验证试验和结果1111制定再验证的可接受标准制定再验证的可接受标准1212制定常规执行方法的标准制