布比卡因与左旋布比卡因对大肠癌细胞的作用及其与内质网应激通路的相关性研究_第1页
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文档简介

1、布比卡因与左旋布比卡因对大肠癌细胞的作用及其与内质网应激通路的相关性研究目的：研究1mM布比卡因与1mM左旋布比卡因培养24-48小时后人大肠腺癌 细胞系 Caco-2 的各项肿瘤细胞活性指标以及内质网应激通路标志蛋白的表达水 平,包括： 癌细胞迁移能力 ,核蛋白 Ki67, 膜联蛋白 V(Annexin V) 和碘化丙啶 (PI),78kDa葡萄糖调节蛋白(Grp78)和C/EBP同源蛋白(CHOP。方法：本实验于 体外培养人大肠腺癌细胞株 Caco-2并将细胞随机分为四组：空白组(N组)；载体 对照组(V组)-1mM DPBS液;布比卡因组(B组)-1mM盐酸布比卡因；左旋布比卡因 组(L

2、组)-1mM盐酸左旋布比卡因。各组在相同条件下培养 24 小时后(划痕实验取 24 小时与 48 小时两个时间 点), 使用细胞划痕实验以检测癌细胞的迁移能力; 使用免疫荧光技术计算 Ki67阳性率比较组间细胞周期情况；使用流式细胞术检测膜联蛋白 V和碘化丙啶的表 达情况以研究大肠癌细胞的凋亡水平 ; 使用蛋白免疫印迹法和免疫荧光实检测内 质网应激通路标志蛋白Grp78和CHOP勺表达水平与核聚集现象。结果：在连续 48小时体外培养过程中 , 布比卡因组 (p<；0.01) 与左旋布比卡因组 (p<；0.001) 的大肠癌细胞迁移速度显著慢于空白组与载体对照组 ； 在 24小时 培育后

3、,B组与L组的癌细胞胞核中Ki67的阳性率(B组为54.93 7.64,L组为 57.23 8.04)显著低于 N组(92.33 6.74)和 V组(98.66 1.17)(p<0.01); 通过流式细胞术测得 24 小时培育后 , 布比卡因与左旋布比卡因处理并未引起大 肠癌细胞的显著凋亡；通过Western Blot和免疫荧光技术测得相比N组和V 组,Grp78在B组和L组中表达明显降低(p<0.05),而CHOPS B组和L组中表结论：在体外培养的条件下,1mM布比卡因或左旋布比卡因24-48小时的处理 可使人大肠腺癌细胞的迁移能力与增殖能力受到同等水平的显著抑制但不能诱 发凋亡 , 其分子机制可能与酰胺类局麻药物对癌细胞内质网应激通路的强化有关。 但须注意的

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