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文档简介

1、用分光光度法粗测金黄色葡萄球菌菌悬液的浓度实验目的：通过对同一菌液同时测吸光度值与平板菌落计数，将两个结果做标准曲线。标准曲线做出后， 通过测吸光度值间接反应菌悬液的浓度，用于指导菌悬液的制备。实验设备：U-2900型分光光度计波长为 600nm比色皿厚度：cm实验材料：空白对照液：0.9%无菌氯化钠溶液稀释液： 0.9%无菌氯化钠溶液营养肉汤培养基实验菌种：金黄色葡萄球菌（新鲜培养物）实验步骤：1.将金黄色葡萄球菌的新鲜培养物接种至营养肉汤培养基中，在 3035恒温培养箱中培养1824h。2. 在无菌阳性室按无菌操作将培养后的金黄色葡萄球菌用 0.9%无菌氯化钠溶液稀释成不同浓度的菌悬液 。

2、具体为分别吸取营养肉汤培养液 0.1ml,0.2ml,0.3ml,0.4ml,0.5ml，0.6ml，0.7ml 到 10ml 0.9%无菌氯化钠溶液中，稀释成 7 种不同浓度的原始菌悬液。序号分别为 1-7 号。2.1 平板菌落计数法测活菌浓度取 14 个营养琼脂培养基平板，分别从每个原始菌液中，取0.2ml 的菌悬液，用平板涂布法，涂于平板中，标明序号，每个稀释度涂2 块平板 . 37培养箱培养 72 h 后，可见菌落形成，选取菌落数在 3 0300 间的平板进行计数， 每组稀释度相同的平板取平均值作为菌落数. 计算出原菌液细菌浓度，作为细菌菌液的标准浓度。2.2 分光光度法测菌悬液吸收值同时将以上 5 种原始菌液在波长为 600nm 下测定吸光度。用 0.9% 无菌氯化钠溶液作为空白对照，记录各原始菌液的吸光度值。表一：平板菌落计数与吸光度值对比记录序号吸取原培养加样到平稀 释原始菌液的液的量（ ml ）板上的量倍数平板计数菌落数吸光度值含菌量（ cfu）-原始菌液（ml）（cfu）10.10.25 倍0.01820.20.25 倍0.02930.30.25 倍0.04940.40.25 倍0.05850.50.25 倍0.07660.60.25 倍0.08270.70.25 倍0.1023 结果计算对同一菌液同时测吸光度值与进行平板菌落计数，将平板菌落计数所

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