霉菌毒素的控制及解决办法

1、霉菌毒素的控制/检测方法以及解决方案控制饲料原料中霉菌毒素的办法控制饲料原料中霉菌毒素的办法 农作物的耕种农作物的耕种: 种植对霉菌有抵抗力的品种种植对霉菌有抵抗力的品种 使用有效的昆虫控制方法使用有效的昆虫控制方法 维持好的灌溉系统维持好的灌溉系统 实行良好的耕作实行良好的耕作, 农作物轮换农作物轮换, 杂草控制杂草控制 收割时收割时: 适当的收割时间适当的收割时间 迅速降低水份迅速降低水份 除去多余的雑质除去多余的雑质 收获后及储藏收获后及储藏: 保护储藏的原料保护储藏的原料/产品不被水份产品不被水份, 昆虫昆虫, 及其它环境因素的侵害及其它环境因素的侵害 保存原料保存原料/产品在干燥干净

2、的表面产品在干燥干净的表面 测试所有要使用的原料的霉菌毒素测试所有要使用的原料的霉菌毒素 贮存桶及管路的定期清理贮存桶及管路的定期清理 先进先出先进先出 收获后收获后, 加工加工, 制造制造: 测试所有要使用的原料及成品的霉菌毒素测试所有要使用的原料及成品的霉菌毒素 监控加工过程以维持高品质的产品监控加工过程以维持高品质的产品 贮存桶及加工设备的定期清理贮存桶及加工设备的定期清理 依照依照GMP程序程序控制饲料原料中霉菌毒素的办法 饲喂动物饲喂动物: 保存产品在干燥干净的表面保存产品在干燥干净的表面 先进先出先进先出 贮存桶及饲喂系统的定期清理贮存桶及饲喂系统的定期清理 水槽的定期清理水槽的定

3、期清理 垫料垫料控制饲料原料中霉菌毒素的办法如何解决霉菌毒素的危害？如何解决霉菌毒素的危害？霉菌毒素的预防霉菌毒素的预防1 控制饲料原料的质量。关键在于严格控制控制饲料原料的质量。关键在于严格控制原料的含水量，一般要求玉米、高粱、稻原料的含水量，一般要求玉米、高粱、稻谷等的含水量应不超过谷等的含水量应不超过14%；大豆及其饼粕、；大豆及其饼粕、麦类、糠麸类、甘薯干、木薯干等的含水麦类、糠麸类、甘薯干、木薯干等的含水量应不超过量应不超过13%；棉籽饼粕、菜籽饼粕、向；棉籽饼粕、菜籽饼粕、向日葵饼粕、亚麻仁饼粕、花生仁饼粕、鱼日葵饼粕、亚麻仁饼粕、花生仁饼粕、鱼粉、骨粉及肉骨粉等的含水量应不超过粉

4、、骨粉及肉骨粉等的含水量应不超过12%。霉菌毒素的预防霉菌毒素的预防2 预防：预防： 使用优质防霉剂，预防原料或成品使用优质防霉剂，预防原料或成品饲料霉变。饲料防霉剂种类很多，目前使饲料霉变。饲料防霉剂种类很多，目前使用最广泛的是丙酸及其盐类（包括丙酸钠、用最广泛的是丙酸及其盐类（包括丙酸钠、丙酸钙、丙酸铵和二丙酸铵）、山梨醇及丙酸钙、丙酸铵和二丙酸铵）、山梨醇及其盐类、双乙酸钠等是常用的防霉剂。饲其盐类、双乙酸钠等是常用的防霉剂。饲料一旦污染应使用有效的霉菌毒素吸附剂。料一旦污染应使用有效的霉菌毒素吸附剂。霉菌毒素的控制霉菌毒素的控制1) 物理、化学处理法物理、化学处理法2）生物转化法）生物

5、转化法3）吸附法（霉菌毒素吸附剂）吸附法（霉菌毒素吸附剂）霉菌毒素的脱毒霉菌毒素的脱毒 物理化学方法？物理化学方法？方便性如何？方便性如何？适口性如何？适口性如何？吸附剂法吸附剂法 为了减少损失， 很多学者采用一些物质作为霉菌毒素的吸附剂来处理霉变饲料， 即在饲料中添加可以吸附霉菌毒素物质， 使毒素在经过动物肠道时不被动物所吸收， 直接排出体外。例如：甘露低聚糖，水合铝硅酸盐类，膨润土，蒙脱石等。市场上霉菌毒素吸附剂产品主要类型市场上霉菌毒素吸附剂产品主要类型 黏土类吸附剂；黏土类吸附剂； 酵母细胞壁提取物；酵母细胞壁提取物； 酶解毒剂；酶解毒剂； 微生物解毒剂；微生物解毒剂； 中草药制剂；中

6、草药制剂； 硅及铝 地球上最丰富的矿物质 不同的硅及铝组合造成不同的粘土类粘土类吸附剂是自然矿产 粘土类吸附剂都带负极 硅铝酸盐硅铝酸盐Aluminosilicates高岭土高岭土(1:1): 水合硅铝酸盐水合硅铝酸盐Al2(Si2O5)(OH)8 延展性差延展性差, 带负极带负极沸石粉沸石粉:水合硅铝酸盐水合硅铝酸盐Na2Al2Si3O10.2H2O 火山灰火山灰,可能污染许多矿物质及重金属可能污染许多矿物质及重金属 结构像蜂窝结构像蜂窝-分子筛分子筛, 可吸引大小适当带负极的可吸引大小适当带负极的分子分子 最常用在滤水器的滤芯最常用在滤水器的滤芯膨润土膨润土 (2:1):Montmoril

7、lonites, Sodium and calcium bentonites (Na,Ca)X(Al,Mg)2Si4O10(OH)2.nH2O 火山灰类的天然矿产火山灰类的天然矿产 水合钙钠硅铝酸盐水合钙钠硅铝酸盐 延展性比较好延展性比较好,吸水后膨胀吸水后膨胀 增加饲料流动性增加饲料流动性膨润土如何吸附黄曲霉菌毒素膨润土如何吸附黄曲霉菌毒素H2O: 高极性OOOOCH3OOAflatoxin B1膨润土如何吸附黄曲霉菌毒素膨润土如何吸附黄曲霉菌毒素Divalent InterlayercationsCa+Na+orOOOOOOCH3粘土类吸附剂的局限性粘土类吸附剂的局限性 添加剂量高添加剂量

8、高 (1-3%) 吸附力取决于分子大小及带正价的分子吸附力取决于分子大小及带正价的分子 只能吸附带极性的黄曲霉毒素只能吸附带极性的黄曲霉毒素 但是也吸附矿物质但是也吸附矿物质, 例如锰例如锰, 锌锌, 镁镁 (Chestnut et al. 1992), 铜及钠铜及钠 (Kramer 1993), 尤其是使用量尤其是使用量 0.5% 对吸附呕吐毒素对吸附呕吐毒素, T-2毒素毒素, 玉米赤霉烯酮玉米赤霉烯酮 (Orr et al. 1988; Kubena et al. 1998), 赭曲霉毒素赭曲霉毒素A (Huff et al. 1992), 蛇形菌毒素蛇形菌毒素 (Kubena et a

9、l. 1993), 高羊茅毒素高羊茅毒素 (Chestnut et al. 1992)无效无效 可能有二恶英可能有二恶英(dioxins)及重金属的污染及重金属的污染 对环保有负面的影响对环保有负面的影响吸附剂法的缺陷吸附剂法的缺陷酶法分解霉菌毒素酶法分解霉菌毒素OOOOOOCH3OOOOOOCH3OHOOOOOOCH3OOOOOOCH3OHOO黄曲霉毒素 B1黄曲霉毒素 B2黄曲霉毒素 G1黄曲霉毒素 G2使用酶分解黄曲霉毒素一种酶可能可以分解所有的单端孢霉烯类毒素单端孢霉烯类毒素(Trichothecenes)O OC HC H3 3H HO OO HO HO OO HO HZearale

10、noneN NO OO HO HFusaric acidH O O CH O O CC O O HC O O HH H3 3C CC HC H3 3O OO OC HC H3 3O HO HO HO HO HO HN HN H2 2O OO OC O O HC O O HH O O CH O O CC HC H3 3Fumonisin B1需要同时含有多种的酶但是还有其他的但是还有其他的霉菌毒素霉菌毒素黄曲霉毒素萎蔫酸Penicillic AcidAlternariolFusariocinPenitremCitreoviridinFusarinsPhomopsin桔霉素Islanditoxin

11、Roridins环匹克尼酸LuteoskyrinRubratoxin呕吐毒素串珠镰刀菌毒素Slaframine蛇形菌毒素MonoacetoxyscirpenolDicoumarolNeosolaniolSlaframineStachbotryotoxinsErgotamine赭曲霉毒素SterigmatocystinErgo ToxinsOosporeinT-2毒素FumitremorgenPaspalitremsTremorgens烟曲霉毒素Patulin玉米赤霉烯酮 还有其他300多种, 可能还有数千种未知的霉菌毒素.酶分解霉菌毒素的局限性酶分解霉菌毒素的局限性酵母细胞壁提取物酵母细胞壁提

12、取物改性的葡聚糖利用酵母细胞壁内的葡萄糖甘露聚糖的化学结构与同样属于有机类的霉菌毒素的亲和性，吸附霉菌毒素。类似于肥皂去油的原理，为表面亲和吸附。 改性的葡聚糖的三维螺旋结改性的葡聚糖的三维螺旋结构构改性甘露聚糖改性甘露聚糖-黄曲霉毒素黄曲霉毒素黄曲霉毒素甘露聚糖其他毒素与它的吸附方式其他毒素与它的吸附方式乳酸菌对于霉菌毒素的作用乳酸菌对于霉菌毒素的作用 乳酸菌对于霉菌毒素的去除的作用是目前在食品和人类营养方面一个崭新的课题。目前主要集中在黄曲霉毒素AFb1上。已经有大量研究证实了一些乳酸菌能够很好去除黄曲霉毒素，可能还有其他毒素（参见随附的参考文献）。霉菌毒素检测方法霉菌毒素检测方法n饲料中

13、霉菌及霉菌毒素的检测方法主要有目测法、 薄层色谱法(T LC) 、 高效液相色谱法(HP LC) 、 酶联免疫法(E LISA) 、 放射免疫法(KIA)及气相色谱法等。n快速试纸检测法 薄层层析法薄层层析法(TLC)n T LC法是我国测定食品及饲料中霉菌毒素的国家标准方法是我国测定食品及饲料中霉菌毒素的国家标准方法之一法之一 ,其原理是针对不同的样品其原理是针对不同的样品 ,用适宜的提取溶剂将霉用适宜的提取溶剂将霉菌毒素从样品中提取出来菌毒素从样品中提取出来 ,经柱层析净化经柱层析净化 ,再在薄层板上层再在薄层板上层析展开、析展开、 分离分离 ,利用霉菌毒素的荧光性利用霉菌毒素的荧光性 ,

14、根据荧光斑点的根据荧光斑点的强弱与标准比较测定其最低含量。强弱与标准比较测定其最低含量。n T LC法由于设备简单法由于设备简单 ,易于普及易于普及 ,所以国内外仍在使用所以国内外仍在使用 ,但但该法样品前处理繁琐该法样品前处理繁琐 ,且提取和净化效果不够理想且提取和净化效果不够理想 ,提取液提取液中杂质较多中杂质较多 ,在展开时影响斑点的荧光强度在展开时影响斑点的荧光强度 ,而双向展开虽而双向展开虽避免了杂质干扰，但增加了操作步骤和时间避免了杂质干扰，但增加了操作步骤和时间(叶雪叶雪珠珠 ,2003) 。 液相色谱法液相色谱法(HPLC) HPLC法是近几年发展起来的检测霉法是近几年发展起来

15、的检测霉菌毒素的方法，主要是用荧光检测器菌毒素的方法，主要是用荧光检测器检测检测 。在适宜的流动相条件下，采用。在适宜的流动相条件下，采用反相反相C18柱柱 ，使霉菌毒素同时分离。，使霉菌毒素同时分离。用用 HPLC 法检测，最低检出量法检测，最低检出量0. 08 ng ，回收率为，回收率为 92. 87 % 。该法快速。该法快速而准确而准确 ,但需要昂贵的仪器设备但需要昂贵的仪器设备 。 酶联免疫法酶联免疫法(ELISA)n ELISA 法是法是1971年提出的。基本原理是在合适的年提出的。基本原理是在合适的载体上载体上 ,酶标记抗体或抗原与相应的抗原或抗体形酶标记抗体或抗原与相应的抗原或抗

16、体形成酶标记的抗原抗体复合物成酶标记的抗原抗体复合物 ,在酶底物参与下在酶底物参与下 ,复复合物上的酶催化底物使其水解合物上的酶催化底物使其水解 ,氧化或还原成为另氧化或还原成为另一种带色物质。可用分光光度计进行测定一种带色物质。可用分光光度计进行测定 ,从而可从而可计算出参与反应的抗原和抗体的含量计算出参与反应的抗原和抗体的含量(杨利杨利国国 ,1998) 。该免疫学方法更实际。该免疫学方法更实际 ,其灵敏度与其灵敏度与 TLC 或或 HPLC 法相当或更高法相当或更高 ,因而具有更广阔的因而具有更广阔的应用前景。应用前景。n 该法由于快速、该法由于快速、 灵敏、灵敏、 准确、准确、 可定量

17、、可定量、 操作简便、操作简便、 无需贵重仪器设备无需贵重仪器设备 ,且对样品纯度要求不高等特性且对样品纯度要求不高等特性 ,特别适用于大批量样品的检测。特别适用于大批量样品的检测。金标快速试纸条检测原理金标快速试纸条检测原理l试剂含有被事先固定于膜上测试区（试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的）的AFB1-BSA偶联物和被胶体金标记的抗偶联物和被胶体金标记的抗AFB1特异性抗体。特异性抗体。l测试时，样品滴入试剂盒孔内，如测试时，样品滴入试剂盒孔内，如AFB1在样品中浓度在样品中浓度低于低于5ng/ml时，胶体金抗体不能与时，胶体金抗体不能与AFB1全部结合。这全部结合。这样，胶体金抗体在

18、层析过程中会被固定在膜上的样，胶体金抗体在层析过程中会被固定在膜上的AFB1-BSA偶联物结合，在测试区（偶联物结合，在测试区（T）内会出现一条）内会出现一条紫红色紫红色条带。如果条带。如果AFB1在样品中浓度高于在样品中浓度高于5ng/ml时，胶体金时，胶体金抗体与抗体与AFB1全部结合，从而在测试区（全部结合，从而在测试区（T）内因为竞）内因为竞争反应不会与争反应不会与AFB1-BSA偶联物结合而不出现紫红色偶联物结合而不出现紫红色条带。条带。检测时间短，从样品处理到检测不到半小时。检测时间短，从样品处理到检测不到半小时。采用无毒无害的乙酸乙酯为霉毒素提取剂，提取时短、采用无毒无害的乙酸乙酯为霉毒素提取剂，提取时短、溶剂易于去除，改变了传统脱溶剂长且污染环境和危害溶剂易于去除，改变了传统脱溶剂长且污染环境和危害操作人员的健康等缺点。操作人员的健康等缺点。不需紫外光源、专用检测仪和专业人员，适用于现场和不需紫外光源、专用检测仪和专业人员，适用于现场和基层单位。基层单位。操作简单、结果准确，可逐份检测，故成本低。操作简单、结果准确，可逐份检测，故成本低。 试剂稳定，室温保存，有效期长（至少一年半）。试剂稳定，室温保存，有效期长（至少一年半）。 金标试纸法快速检测的优势金标试纸法快速检测的优势理想的霉菌毒素吸附剂理想的霉菌毒素吸附剂具有吸附不同种