细菌生长繁殖与培养

1、学习目的1.1.掌握细菌生长繁殖的条件；掌握细菌生长繁殖的条件；2.2.掌握细菌与医学相关的合成代谢掌握细菌与医学相关的合成代谢产物及其意义；产物及其意义；3.3.了解细菌的遗传与变异；了解细菌的遗传与变异；（一）（一）2.12细菌的生长曲线细菌的生长曲线活菌数的对数活菌数的对数培养时间培养时间迟缓期迟缓期 对数期对数期 稳定期稳定期衰退期衰退期 1人工培养的意义人工培养的意义（1）传染病的诊断与治疗）传染病的诊断与治疗 （2）生物制品的制备）生物制品的制备 （3）细菌的鉴定与研究）细菌的鉴定与研究 2培养基培养基 是由适合于细菌生存的各种营养物质配制而成的营养基质。是由适合于细菌生存的各种营

2、养物质配制而成的营养基质。 按用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选按用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基和厌氧培养基等。择培养基和厌氧培养基等。 按物理性状可分为液体、固体和半固体培养基。在液体培按物理性状可分为液体、固体和半固体培养基。在液体培养基中加入一定量的凝固剂（多为琼脂）即成为固体或半固养基中加入一定量的凝固剂（多为琼脂）即成为固体或半固体培养基。体培养基。 3 3细菌在培养基中的生长现象细菌在培养基中的生长现象 （1 1）细菌在液体培养基中的生长现象）细菌在液体培养基中的生长现象 不同细菌在液体培养基中生长繁殖可出现均不同细菌在液体培养基中生长繁殖可

3、出现均匀混浊、沉淀和形成菌膜三种现象，临床应用匀混浊、沉淀和形成菌膜三种现象，临床应用的澄清透明的注射液若发现上述任何一种现象，的澄清透明的注射液若发现上述任何一种现象，均表明已被细菌污染，禁止使用。均表明已被细菌污染，禁止使用。（2） 细菌在半固体培细菌在半固体培养基中的生长现象养基中的生长现象 经常用于做动力试验：经常用于做动力试验：即将细菌穿刺接种于半即将细菌穿刺接种于半固体培养基中，经培养固体培养基中，经培养后，无鞭毛的细菌沿穿后，无鞭毛的细菌沿穿刺线生长，穿刺线清晰；刺线生长，穿刺线清晰；有鞭毛的细菌则沿穿刺有鞭毛的细菌则沿穿刺线向周围扩散生长，穿线向周围扩散生长，穿刺线模糊不清，用

4、于检刺线模糊不清，用于检查细菌的动力查细菌的动力 （3）细菌在固体培养基中的生长现象）细菌在固体培养基中的生长现象 菌落：把细菌接种到固体培养基表面，一般经菌落：把细菌接种到固体培养基表面，一般经 37，1824小时培养，单个细菌就可以生长繁殖成肉眼可见细小时培养，单个细菌就可以生长繁殖成肉眼可见细菌集团，称之。不同细菌形成的菌落大小、形状、颜色不同，菌集团，称之。不同细菌形成的菌落大小、形状、颜色不同，即菌落特征，有利于鉴别细菌种类即菌落特征，有利于鉴别细菌种类 人工培养基在医学领域中的应用v 1 感染性疾病的病原学诊断和治疗v 2 细菌学研究v 3 生物制品的制备v 4 基因工程1. 细菌

5、的分解代谢产物及其临床意义细菌的分解代谢产物及其临床意义 （1）（2）v 热原质热原质 细菌在代谢过程中产生的一种多糖，注入人和动物体细菌在代谢过程中产生的一种多糖，注入人和动物体内能引起发热反应，故名热原质。多由革兰阴性菌产生，热原内能引起发热反应，故名热原质。多由革兰阴性菌产生，热原质耐高温，不被高压蒸气灭菌（质耐高温，不被高压蒸气灭菌（121 30min）所破坏，常）所破坏，常通过滤过或吸附除去液体中大部分热原质，蒸馏法效果最好。通过滤过或吸附除去液体中大部分热原质，蒸馏法效果最好。 v 毒素毒素 毒素是病原菌合成的对机体有毒害作用的物质，有内毒毒素是病原菌合成的对机体有毒害作用的物质，

6、有内毒素和外毒素两种。素和外毒素两种。v 侵袭性酶侵袭性酶 某些细菌产生的能增强侵袭力的胞外酶。某些细菌产生的能增强侵袭力的胞外酶。2.细菌的合成代谢产物及其意义细菌的合成代谢产物及其意义（1）与致病有关的合成代谢产物）与致病有关的合成代谢产物（2）与治疗疾病有关的合成代谢产物v 抗生素抗生素 由某些微生物产生的，并能抑制或杀灭其他微生物由某些微生物产生的，并能抑制或杀灭其他微生物的物质称为抗生素。的物质称为抗生素。 广泛应用于感染性疾病的治疗。广泛应用于感染性疾病的治疗。 v 维生素维生素 某些细菌合成的维生素除供自身需要外，还可分泌某些细菌合成的维生素除供自身需要外，还可分泌到细菌体外。如

7、人体肠道的大肠埃希菌能合成到细菌体外。如人体肠道的大肠埃希菌能合成b族维生素和族维生素和维生素维生素k，供人体吸收利用。，供人体吸收利用。（3）与鉴别细菌有关的代谢产物v 色素色素 是细菌产生的有色物质。如金黄色葡萄球菌产生非水是细菌产生的有色物质。如金黄色葡萄球菌产生非水溶性金黄色色素如铜绿假单胞菌产生水溶性绿色色素，在细溶性金黄色色素如铜绿假单胞菌产生水溶性绿色色素，在细菌鉴别上有一定的意义。菌鉴别上有一定的意义。v 细菌素细菌素 某些细菌可产生仅对有亲缘关系的细菌具有抗菌作用某些细菌可产生仅对有亲缘关系的细菌具有抗菌作用的蛋白质或蛋白质与脂多糖的复合物，成为细菌素。的蛋白质或蛋白质与脂多

8、糖的复合物，成为细菌素。（1） 形态结构变异形态结构变异 ： 指细菌的形态结构在某些因素影响下发生的变异。指细菌的形态结构在某些因素影响下发生的变异。 （2）菌落变异：菌落变异：s-r（3）毒力变异毒力变异 ： 指细菌在一定条件下毒力的减弱或增强。指细菌在一定条件下毒力的减弱或增强。 如卡介苗如卡介苗(bcg) （4） 耐药性变异耐药性变异 ： 指细菌对某一抗菌药物由敏感变为有抵抗力。指细菌对某一抗菌药物由敏感变为有抵抗力。 1.1.细菌的常见变异现象细菌的常见变异现象基因变异在医学实践上的意义v1 用来诊断疾病v2 疾病治疗v3 疾病预防v4 基因工程方面目标检测目标检测 菌落菌落 耐药性变

9、异耐药性变异二、二、 选择题选择题1多数细菌生长繁殖的最适多数细菌生长繁殖的最适ph是（是（ ） aph 7.27.6 bph 6.56.8 cph 8.08.8 dph 4.44.6 eph 562细菌生长繁殖的条件不包括（细菌生长繁殖的条件不包括（ ） a丰富的营养物质丰富的营养物质 b必要的气体环境必要的气体环境 c合适的温度合适的温度 d合适的酸碱度合适的酸碱度 e充足的光线充足的光线3. 注射液中出现哪种现象说明被细菌污染？注射液中出现哪种现象说明被细菌污染？ () a沉淀沉淀 b.絮状物絮状物 c.混浊混浊 d.菌膜菌膜 e.以上都是以上都是 三、三、 简答题简答题 细菌有哪些合成

10、代谢产物？与致病性和医药有关的各是哪细菌有哪些合成代谢产物？与致病性和医药有关的各是哪些？些？ 第第3节节 细菌与外界环境细菌与外界环境v 学习目标学习目标1、简述细菌在自然界和正常人体的分布状况。、简述细菌在自然界和正常人体的分布状况。2、列出常用的热力消毒灭菌法及适用范围。、列出常用的热力消毒灭菌法及适用范围。3、分析紫外线的杀菌原理、作用、特点及应用。、分析紫外线的杀菌原理、作用、特点及应用。4、概述常用化学消毒剂的浓度、作用机制、概述常用化学消毒剂的浓度、作用机制、 用途及影响因素。用途及影响因素。5、了解医院感染的概念。、了解医院感染的概念。细菌的分布细菌的分布v细菌在自然界的分布细

11、菌在自然界的分布 土壤中的细菌土壤中的细菌 水中的细菌水中的细菌 空气中的细菌空气中的细菌 v细菌在正常人体的分布细菌在正常人体的分布 正常菌群的概念及意义正常菌群的概念及意义 正常菌群正常菌群 正常人体的体表及与外界相通的腔正常人体的体表及与外界相通的腔道中，存在着不同种类、数量和比例的道中，存在着不同种类、数量和比例的微生物。这些微生物在正常情况下对人微生物。这些微生物在正常情况下对人体无害称正常微生物群又称正常菌群。体无害称正常微生物群又称正常菌群。正常菌群的生理作用v1. 生物拮抗作用v2. 营养作用v3. 免疫作用v4. 其他作用：抗衰老，抑制肿瘤条件致病菌v 在特定条件下，正常菌群

12、与人体之间以及正常菌群之间的平衡可被破坏而引起疾病，这些细菌称为条件致病菌。v1 寄居部位发生改变v2 机体免疫力下降v3 菌群失调与菌群失调症：又称二重感染，常见于长期应用大量抗生素的病人。条件致病菌引起疾病的条件条件致病菌引起疾病的条件消毒灭菌的基本概念消毒灭菌的基本概念v 1 1 清洁清洁 将被微生物污染了的无生命表面还原为安全水平将被微生物污染了的无生命表面还原为安全水平的处理过程。的处理过程。v 2 2 消毒消毒 指用物理或化学方法杀死物体或环境中病原微生物指用物理或化学方法杀死物体或环境中病原微生物的方法的方法v 3 灭菌 杀灭物体上所有病原性与非病原性微生物以及细菌芽孢的方法v

13、4 防腐 指防止或抑制微生物生长繁殖的方法v 5 无菌和无菌操作 无菌是指无活的微生物防止微生物进入机体或物体的操作技术称为无菌操作或者无菌技术。二，清洁法v将物品用清水冲洗，再用洗涤剂刷洗，除去物品上的所有污秽，最后用清水洗净。常用于墙壁，地面，桌椅，病床等的清洁以及物品消毒灭菌前的准备。v 三，消毒与灭菌法物理消毒灭菌法v 热力消毒灭菌法热力消毒灭菌法 6230min 72 30s min2 电磁波辐射杀菌法v日光暴晒法：最简单，最经济v 辐射杀菌法辐射杀菌法 紫外线紫外线 265266nm 杀菌原理杀菌原理 用途与缺陷用途与缺陷 电离辐射电离辐射 x射线、射线、射线、高速电子射线、高速电

14、子 微波消毒法微波消毒法生物净化法除菌：生物净化法除菌：经常用于手术室和病房经常用于手术室和病房v 滤过除菌法滤过除菌法 0.22m 不耐热血清、超净工作台等不耐热血清、超净工作台等化学消毒灭菌法v 1 化学消毒剂的作用机制：v 有的可以使菌体蛋白质凝固变性或使酶蛋白失去活性，而致细菌代谢障碍，有的则破坏菌体细胞壁或细胞膜的结构，改变其通透性，使菌体破裂，溶解，导致细菌死亡。v 2 化学消毒剂的使用原则：v 根据消毒剂的性能和病原体的特性，选择合适的消毒剂。v 严格掌握消毒剂的有效浓度，消毒时间和使用方法v 消毒前须将物品清洗擦干。v 浸泡消毒后的物品于使用前要用生理盐水冲洗v 注意温度和酸碱度对消毒剂作用效果的影响化学消毒剂的使用方法v 浸泡法：用于耐