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文档简介
1、绪论 时间/年 实质 开创者 特点各国劳动人民,其中尤以我国制曲酿酒技术著称未见细菌等微生物个体凭实践利用微生物的有益活动微生物的定义 微生物的发展史史前期成熟期初创期奠基期发展期约8000年前1676朦胧阶段微生物学开始建立建立了一整套微生物学研究方法(显微镜)列文虎克微生物先驱者16761861形态描述阶段每个时期的代表人物、事件18611897生理水平研究阶段巴斯德微生物学奠基人科赫细菌学奠基人巴氏灭菌,酒类发酵18971953生态研究阶段“酒化酶”研究微生物代谢青霉素的发现E.Büchner生物化学奠基人(爱德华·布赫纳)1953至今J·Waton和F
2、183;Crick分子生物学奠基人分子生物学水平研究阶段DNA双螺旋结构微生物的五大共性体积小,面积大吸收多,转化快生长旺,繁殖快适应强,易变异分布广,种类多以微米记,比表面积大大肠杆菌在1h内可分解其自重100010000倍乳糖,产盶假丝酵母菌合成蛋白质的能力比大豆强100万倍均能举例说明在合适的生长条件下,细胞分裂1次仅需12.520min高温、高酸、高盐、高辐射、高压、低温、搞碱或高毒等都有惊人适应力只要条件合适,它们就可随遇而安,微生物的总数约在50万至600万种之间推荐精选第一章 原核生物的形态、构造和功能一、形态和染色:大小、形状、重量,最大细菌特有成分 形状:(球状、杆状和螺旋状
3、);重量:若以每个细胞湿重约10-12g计,则大约109个E.coli细胞才达。最大细菌:纳米比亚嗜硫珠菌直径为0.321.00mm肉眼清楚看到;大小:若把1500个细胞的直径相连仅等于芝麻的长度(3mm) 细胞壁:功能、结构图、G+和G-的区别、G染色机理细胞膜:功能、成分、成分 P24基本结构细胞质和内含物:PHB P26聚-羟丁酸或聚羟基丁酸酯核区:特点 P27裸露,无核膜、核仁,化学成分:是一个大型的环状双链DNA分子,一般不含。 0.253.00mm细菌的形态构造及其功能二、构造:鞭毛:定义、判断、菌毛功能 判断:电镜观察染色法后在光镜下观察半固体。穿刺试验 功能:运动芽孢:定义、结
4、构图、伴孢晶体 又称内毒素:少数芽孢杆菌产生的糖蛋白昆虫毒素。在形成芽孢的同时会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规则的白质晶体特殊结构1.裂殖:定义、模式图糖被:定义及功能、意义 P2728 二分裂繁殖方式菌毛:功能 又称纤毛、仐毛、线毛或须毛(吸附作用)性毛:交配作用 三分裂 复分裂用于生产抗生菌,污水处理放线菌:定义、生长条件、繁殖方式蓝细菌:定义支原体:定义衣原体:定义立克次氏体:定义 生长条件:含水量较低,有机物较丰富,呈微碱性土壤菌落定义 穿刺培养是否长鞭毛群体特征 半固体培养基作用 厌氧培养 纯种细菌在半固体培养基上生长时,会出现许多特有的培养形状,因此对菌种鉴定十分重要菌膜:形成条
5、件 液体培养基表面推荐精选细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的应用了解大致情况 细菌应用:酸奶、泡菜、黄原胶、食品添加剂、污水处理 推荐精选第二章 酵母菌 霉菌细胞器:内质网、高尔基体、溶酶体、微体、线粒体和叶绿体等 真菌:酵母菌、霉菌; (只有真核微生物才有)真核生物: 真菌、显微藻类、原生动物; C核构成:核被膜、染色体、核仁和核基质 在食品中的应用:酒类的生产,面包的制作、乙醇和甘油发酵,石油及油品的脱蜡,伺用,药用蛋白的生产单细胞存在营养菌丝、气生菌丝、菌丝体出芽繁殖特点发酵糖产能 霉菌营养体的基本单位是菌丝,其直径通常为310um,比细菌放线菌。繁殖方式:产孢子,担孢子结构霉菌细胞壁含甘露聚
6、糖毛霉、根霉、曲霉的繁殖形态图 (丝状真菌)含糖量、酸度大环境生长 溶菌酶 水解 蜗牛消化酶细胞壁:成分、功能 成分:呈三明治状外层为甘露聚糖,内层为葡聚糖,中央夹着一层蛋白质形态:球状、卵圆状、椭圆状、柱状和香肠状 麦角:维生素D的前体 细胞膜:甾醇形态和构造 酵母 细胞核:由多孔核膜包裹起来的定形C核芽殖:定义,假菌丝子囊孢子:酵母菌是以形成子囊和子囊孢子的方式进行有性繁殖的生活史生命周期:周期图、生活史菌落特征能与其他几类微生物进行对比推荐精选 P64 担孢子第三章 病毒(寄生) 与人类的关系有利:制成生物防治剂是生物学基础研究,有害:造成传染病致癌污染 中的。 真病毒:至少含有核酸和蛋
7、白质的两种组分 类病毒:只含具有独立侵染性的RNA组分 非细胞生物 亚病毒因子 拟病毒:只含不具独立侵染性的RNA组分定义、分类 卫星病毒:与真病毒伴生的缺陷病毒定义和特性 形体极其微小必须在电镜下才能观察没有细胞结构 卫星RNA:只含与侵染无关的RNA组分 每一种病毒只含一种核酸无产能酶系无蛋白质和核。 朊病毒:只含单一蛋白质组分(如疯牛病毒)特性:7点 以核酸和蛋白质等“元件”的装配实现其大量繁殖对一般抗生素不敏感,但对干扰素敏感 在离体条件下,以无生命的生物大分子状态存在,并可长期保持其。 有些病毒的核酸还能整合到宿主的基因组中,并诱发潜伏性感染大小:1:10:100病毒、细菌和真菌直径
8、比约为1:10:100构造:核心 、衣壳、3种典型形态、T4形态图形态和构造化学成分病毒的形态:核酸位于他的中心核心,蛋白质包围在核心周围衣壳群体形态:噬菌斑*、包涵体、枯斑形状多样如蝌蚪状噬菌斑:噬菌体在菌苔上形成的“负菌落”包涵体:植物C中的病毒,枯斑:由植物病毒在植。1繁殖:5个过程说明,循环图 吸附、侵入、增值(复制与生命合成)、成熟(装配)和裂解(释放)效价的测定:效价定义及测定方法、噬菌斑定义(步骤可不掌握)噬菌体繁殖方式液体稀释法玻片快速测定法单层平板法一步生长曲线:画图并能解释说明 较常用且较精确方法为双。溶源性:判断方法、温和噬菌体3种形式推荐精选亚病毒类病毒、拟病毒、朊病毒
9、定义噬菌体与发酵工业、生物防治、基因工程病毒与实践第四章 微生物的营养与培养基能源谱:化能自养 微生物的6类营养要素 配制微生物培养基时首选:K2HPO4和MgSO4水的生理功能:散热C的主要组。运输营养物质的载体良好的。维持各种生物大分子的稳定性参与某些重要的生物化学反应碳源、氮源能源、生长因子、无机盐、水定义及生理功能 能源:能源谱 化学物质(化能营养型) 有机物:化能异养微生物的能源(同碳源) 无机物:化能自养微生物的能源(不同于碳源) 辐射能(光能营养性):光源自养和光能异养微生物的能源四种营养类型能源、氢供体、基本碳源、微生物代表微生物的营养类型单纯扩散:不通过膜上载体蛋白,高浓度低
10、浓度,不耗能,运输前后溶质分子不变1繁殖:5个过程说明,定义、载体有无、运送方向、是否耗能、运送前后分子是否变化、简易图促进扩散:需要载体,高浓度低浓度,不耗能,运输前后溶质分子不变营养物质进入细胞方式主动运输:需要载体,低浓度高浓度,耗能,运输前后溶质分子不变基团移位:需要载体,低浓度高浓度,耗能,运输前后溶质分子改变目的明确:定义 控制方法 真菌需C/N比较高的培养基(似动物的素食)细菌大。营养协调:碳氮比、C、N源种类 PH:内源调节的方法主要有2种 菌需C/N比较低的培养基(似动物。)四个原则 借磷脂缓冲液进行调节理化适宜:各种微生物pH范围及控制方法、渗透压水活度范围 以CaCO3作
11、备用碱进行调节 范围,适宜PH:细菌为6.57.5,放线菌为7.58.5,酵母菌为3.86.0,霉菌为4.05.8,藻类为6.07.推荐精选。经济节约化学反应式:培养基按成分分按物理状态分种类 渗透压:是某水溶液中一个可用压力来量度的物化指标,高渗溶液会使C发 生质壁分离,而低渗溶液则会使C吸水。高的膨压,这对C壁脆弱或丧失的各种缺壁细胞 水活度:在同温同压下,某溶液的蒸汽压与纯水蒸汽压之比生长最低w细菌:0.900.98酵母菌:。 霉菌:0.800.87 分别能举例说明,固氮培养基、EMB培养基配方及功能*按对微生物的功能分:增值培养基、加富培养基定义 氧化还原电势测定:刃天青,在无氧条件下
12、呈无色,在有氧条件下。液 PH值相关,一般在中性时呈紫色,碱性时呈蓝色酸性。微含氧溶液中,则呈粉红色第五章 微生物的新陈代谢EMP 糖酵解途径HMP中文名,特点底物脱氢的4条途径 戊糖磷酸途径ED 2酮3脱氧6磷酸葡糖酸(KDPG)途径TCA三羧酸循环(好氧)特点:底物按常规方式脱氢后,脱下的氢经完整的呼吸链传递,最终被外源分子氧接受,产生水并释放。(无氧)特点:底物按常规方式脱氢后,经部分呼吸链传递,最终由氧化态的无机物或有机物受氢,并完成氧化磷酸。 好氧呼吸 无氧呼吸定义、特点同、异型酒精发酵递氢和受氢 发酵只产生 葡萄糖 乳酸发酵。氢受体:有机物同、异型乳酸发酵 葡萄糖 乳酸,乙醇,乙醇
13、和。推荐精选定义 P136是指大气中的分子氮通过微生物固受酶的催化而还原成氨的过程,生物界中只有原核生物才具有固氮能力生物固氮6要素ATP的供应还原力【H】及其传递载体固氮酶还原底物N2镁离子严格的厌氧微环。均能解释其原理,举例说明赖氨酸发酵营养缺陷型菌株接触正常的反馈调节肌苷酸的生产代谢调节在发酵工业中的应用抗反馈调节的突变株解除反馈调节 当培养液内生物素含量很高时,C膜的结构十分致密它通过生理学手段 阻碍。分泌,并引起反馈抑制。这时,只需添加适量 的青霉素,也有。产量的效果。通过细胞膜缺损 突变控制细胞膜的渗透性 应用谷氨酸生产菌的油酸缺陷型菌株在限量。的 培养基中,也能因C膜发生渗漏而提
14、高谷氨酸产量。第六章 微生物的生长及其控制直接法:测体积法称干重法测生长量 比浊法:分光光度法测定生长繁殖的方法间接法生理指标法:测含氮量法直接法:血球计数板细菌含氮量为其干重的12.5%,酵母菌为7.5%,霉菌为6.5%,含氮量乘以6.25即为除蛋白含量平板菌落计数法计繁殖数 间接法亨盖特滚管培养法 (厌氧菌的菌落计数法)推荐精选定义 环境条件诱导法个体生长与同步培养氯霉素抑制细菌蛋白质合成细菌芽孢诱导发芽机械筛选法获得方法 过滤法密度梯度离心法膜洗脱法特点 生长速率常为零细胞形态边长或增长细胞内的RNA尤其是rRNA含量增高成 代谢十分活跃对外界不良条件如Nacl溶液浓度、温度和抗生素等理
15、化因素反应接种龄:以指数期接种龄的种子接种则子代培养物的延滞期就短接种量:大,则延滞期短(种子发酵培养基=1:10,v/v)培养基成分:一般要求发酵培养基的成分与种子培养基的成分尽量接近种子损伤度延滞期 敏感。影响因素微生物的生长规律单细胞微生物的生长曲线 推荐精选生长速率R最大,因而C每分裂一次所需的时间一代时或原生质增加一倍所需的倍增时间最短C进行平衡生长,故菌体各部分的成分十分均匀酶系活跃,代谢旺盛。特点对数期。指数期尤其是处于指数期中期的微生物因其。具有整个群体的生理特征较一致。C各成分平衡。增长和生长速率恒定等优点,故是用作代谢、生理。和酶学等研究的良好材料,是增殖噬菌体的。最适宿主
16、,也是发酵工业中用作种子的最佳材料。特点:自溶,进一步合成或释放对人类有益的抗生素等次生代谢物,芽孢杆菌则释放毒孢。原因:外界环境对继续生长越来越不利,从而引起C内的分解代谢明显超过合成代谢,继而导致大量菌体死亡。公式:计算代时、生长常数 繁殖代数X2=X12n以对数表示lgX2=lgX1+nlg2所以影响因素、意义 n=(lgX2lgX1)/lg2=3.322(lgX2lgX1)菌种:不同菌种其代时差别极大营养成分:同一种微生物,在营养丰富的培养基上生长时其代时较短,反之则长营养物质浓度:营养物质浓度既影响微生物的生长速率又可影响它的生长总量培养温度 营养物尤其是生长限制因子的耗尽营养物的比
17、例失调如C/N比不合适酸、醇霉素或H2O2等有害代谢产物的累积PH、氧化还原电势等物理化学条件越来越不适宜原因 (菌体数量 达到最高) 稳定期对以生产菌体或与菌体生长相平行的代谢产物(scp、乳酸等)为目的某些发酵生产来说,稳定期是产物的最佳收获时期(菌体及代谢产物如乳酸、氨基酸);对维生素碱基氨基酸等物质进行生物测定来说,稳定期是最佳测定时期。此外,通过对稳定期到来原因的研究还促进了连续培养原理的提出和工艺技术的创建生产实践意义衰亡期 (出生率<死亡率)当微生物以单批培养的方式培养到指数期的后期时,一方面以一定速率连续流入新鲜培养基和通入无菌空气(厌氧菌例外)并立即搅拌均匀;另一方面,
18、利用溢流的方式,以同样的流速不断流出培养物定义连续培养 恒浊器、恒化器的原理、目的 (目的:使微生物 处于较长的稳定期)最是温度并不等于生长得最高时的培养温度,也不等于发酵速率或积累代谢产物最高时的培养温度,更不等于积累某一代谢产物最高时的代谢产物影响微生物生长的主要因素温度基点,按温度对W分类生长温度三基点最低:一般为-10-5,极端为-30最适:(嗜冷菌:<20,一般为15;中温菌:2045,室温菌约25,体温菌约37;嗜热菌>45,一般为5060)最高:一般为8095,极端为105150温度好氧菌:专性好氧菌(需氧在正常大气压下通过呼吸产能)兼性厌氧菌(以呼吸为主,兼营发酵产
19、能;以呼吸为主,兼营厌氧呼吸产能)微好氧菌(需在微量氧1.013.04kpa下生活)厌氧菌:耐氧菌(不需氧,只以发酵产能,氧无毒害)【严格】厌氧菌(氧有害或致死,以发酵或无氧呼吸产能)氧的关系,对W的分类氧气厌氧菌的毒害机制推荐精选 特点:分子氧对它们有毒,即使短期接触也会抑制甚至致死在空气或含有10%的CO2的空气中,它们在固体或半固体培养基表面不能生长,只有在其深层无氧处或在低氧化还原电势的环境中才能生长生命活动所需的能量是通过发酵、无氧呼吸、循环光和磷酸化或甲烷发酵等提供C内缺乏SOD和C色素氧化酶,大多数还缺过氧化氢酶 以氧离子或过氧根离子的形式存在(有毒的)pH值的控制方法:制标,制
20、本Hhshdfoi pH值 pH调节 过酸时加NaOH,NaCO3等碱液中和 治标 过碱时加H2SO4,HCl等酸液中和在150170下维持12h后,可达到彻底灭菌的目的 治本 过酸时加适当氮源:加尿素、NaNO3.NH4OH或蛋白质等提高通气量灭菌、消毒、防腐、化疗 过碱时加适当碳源:加糖、乳酸、醋酸、柠檬酸或油脂等降低通气量 形成沉淀物概念 有机物:如多肽类沉淀种类及特点 无机物:如磷酸盐,碳酸盐等沉淀褐变:产生氨基酸、焦糖或黑色素;霉变破坏营养,提高色泽有害影响高温灭菌有害微生物的控制改变pH影响高压蒸汽灭菌因素高温对培养基成分的有害影响及其防止一般为降低pH降低浓度高温灭菌:干热灭菌法
21、(火焰灼烧法,烘箱内热空气灭菌法)湿热灭菌(消毒)法(常压下:巴士消毒法(LTH法HTST法)煮沸消毒法,间歇灭菌法;加压下:常规加压灭菌法:高温蒸汽灭菌法,连续加压灭菌法)气温低时会增加冷凝水特殊加热法 分别灭菌:对易破坏的含糖培基灭菌时 低压灭菌:对含有易被高温破坏成分过滤除菌法防止法的培养基其他方法化学消毒剂抗生素定义,青霉素作用机制 抑制肽尾与肽桥间的转肽作用 主要抗G+细菌抑制转氨酶的合成 食品腐败的原因分析* 干扰肽聚糖单体之间肽键的形成,从而抑制肽聚糖的合成 第七章 微生物的遗传变异和育种3个经典实验 经典转化实验 遗传型、表型、变异、饰变推荐精选灭菌、消毒、防腐、化疗 噬菌体感
22、染实验 植物病毒的重建实验7个水平:不需掌握遗传变异的物质基础遗传物质在微生物细胞内存在的部位和方式细胞水平细胞核水平染色体水平核酸水平基因水平密码水平核苷酸水平定义和特点相对分子质量小,便于DNA的分离和操作呈环状,使其在化学分离质粒的操作优点原核生物的质粒过程中能保持性能稳定有不受核基因组控制的独立复制起始点拷贝数多,使外源DNA可很快扩增存在抗药性基因等选择性标记,便于含质粒克隆的检出和选择F质粒定义分类,重点掌握营养缺陷型定义及特点 只能在加有该酶合成产物的培养基中才能生长,不能在基本培养基上生长只能在完成特点:7个,重点是自发性、不对应性基因突变 培养基或相应的补充培养基上生长 自发
23、性不对应性稀有性独立性可诱变性稳定性可逆性自发性和不对称性的实验基因突变和诱变育种 Luria等的变量试验Newcombe的涂布试验Lederberg等的影印平板试验创造新型、高效筛选方法利用和创造形态,生理与产量间的相对指标:淀粉酶变色圈的大小(用碘液显色)氨基酸(茚三酮试剂)柠檬酸(溴甲酚绿)光复活作用暗修复作用紫外线对DNA的损伤及其修复选择简单有效的诱变剂艾姆氏试验原理和示意图*诱变育种的几个原则挑选优良的出发菌株最好选用来自生产中的自发突变菌株选用具有有利于进一步研究或应用性状的菌株如生长快、营养要求低等可选用已发生过其他突变的菌种选用对诱变剂敏感性较高的曾变变异株紫外线杀菌机理:。
24、嘧啶对UV的敏感性比嘌呤强得多,。光化学反应产物主要是嘧啶二聚体(TT,TC,CC)。水合物,相邻嘧啶形成二聚体后,造成局部DNA。无法配对,从而引起卫生委员的死亡或突变处理单细胞、孢子悬液合适的诱变剂量 如:在UV作诱变剂中,倾向采用相对杀菌率为70%75%甚至30%利用协同效应 70%的剂量。 产量突变株的筛选 抗药性突变株的筛选推荐精选 营养缺陷型突变株的筛选高效筛选方案3种培养基营养缺陷型的筛选方法*转化定义感受态转染定义原核生物的基因重组定义结合E.coli F质粒的4种存在方式及相互关系定义基因重组和杂交育种原生质体融合操作过程和示意图*真核微生物的基因重组 (了解即可)定义操作过
25、程基因工程推荐精选应用控制传代次数良好培养条件利用不易衰退的细胞衰退的防止措施有效的保藏方法纯种分离复壮措施菌种的衰退、复壮和保藏宿主体复壮淘汰衰退个体菌种保藏方法比较:保护剂的种类推荐精选第八章 微生物的生态为什么说土壤是m的大本营 (由于土壤具备了各种微生物生长发育所需的营养,水分、空气、酸碱度、渗透压条件,所土壤 以成了微生物生活的良好环境)各种微生物在土壤的分布规律 细菌(108)>放线菌(107,孢子)>霉菌(106,孢子)>酵母菌(105)>藻类(104)微生物在自然界的分布 >原生动物(103)其他大肠菌群作为水检测的主要指标原因 (因为这类细菌是温
26、血动物肠道中的正常菌群,数量极多,用它们。灵敏的推断该 良好的饮用水,其细菌总数应<100个/ml,当>500个/ml时就不宜作饮用水了。1ml自来水中的细菌总数不可超过100个(37,培养24h),而1000ml自来水中的大肠菌群则不能超过3个(37,48h)凡含尘埃越多越贴近地面的空气,其中的微生物含量就越高 水源是否曾与动物粪便接触以及污染程度)互生定义 如:好氧性自生固氮菌于纤维素分解菌、植物内生菌与植物、人体肠中正常菌群与人共生 地衣与绿藻(菌藻共生)地衣与蓝细菌(菌菌共生)根瘤菌与植物、微生物与昆虫瘤微生物与。寄生均能举例说明微生物与生物环境间的关系 噬菌体与宿主菌、真菌中的Erysiphe(白粉菌属)以及全部的植物病毒,冬虫夏草拮抗 制作泡菜和牲畜的青贮饲料过程中存在拮抗关系推荐精选捕食 原生动物捕食细菌和藻类,捕食性真菌如何从自然界分离菌株:环境 增值 分离 性能测定 保藏 菌种筛选一般步骤:采集菌样 富集培养 纯种分离 性能测定 菌种保藏该章 第三节 微生物与自然界物质循环不需掌握生物地球化学循环微生物与
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