实验报告甘氨酸的含量测定

1、甘氨酸的含量测定电位滴定法生药1011第四组一J应用范围：本方法釆用滴応法测定甘氨酸原料药中甘氨酸的含量。本方法适用于甘氨酸原料药。二、供试品无水屮酸溶解后，加冰酷酸，照电位滴定法，用高氯酸滴定液滴定， 并将滴定的结果用空口试验校正，根据滴定液使用量，计算甘氨酸的含量。三. 原理：氨基酸分子中含有一NH：和一C00H,为两性物质，在水溶液中，它的酸式电 离和碱式电离的趋势都很弱（如氨基乙酸其竣基上的氢Kd二2. 5X1O-10,氨基作为 碱Kb二2. 2X10"）,因此无法准确滴定。但在非水介质（如冰乙酸）中，可以用HClOi作滴定剂，结晶紫为指示剂准确 滴定氨基酸，产物为氨基酸的高

2、氯酸盐，呈酸性。结晶紫在強酸介质中为绿色，pH二2左右为蓝色，pH>3时为紫色，可以指示此 反应的滴定终点。（由紫色到蓝色到蓝绿到绿色到黃色变化）四. 实验材料1、试剂：（1）冰酷酸（2）无水甲酸（3）高氯酸滴定液（0. Imol/L）（4）结晶紫指示液（5）基准邻苯二屮酸氢钾2、仪器设备：电位滴定仪、酸度计或电位差计、容量瓶、烧杯、磁力搅拌器、搅拌子等五. 操作步骤1 高氯酸滴定液（olmol/L）试样制备配制：取无水冰醋酸（按含水量计算,每lg水加醋5f5.22mL） 750mL,加入高 氯酸（70'72%） 8. 5mL,摇匀，放冷，加无水冰醋酸适量使成lOOOmL,摇匀，

3、放 置24小时。若所测供试品易乙酰化，则须用水分测定法测定本液的含水量，再 用水和酷酊调节至本液的含水量为0. 01%"0. 2%o2.结晶紫指示液取结晶紫0. 5g,加冰醋酸lOOmL使溶解。3标定：取在105°C干燥至恒重的基准邻苯二屮酸氢钾约0. 16g,精密称定，加 无水冰酷酸20mL使溶解，加结晶紫指示液1滴，用本液缓缓滴定至蓝色，并将 滴定结果用空白试验校正。每lmL高氯酸滴定液（0. lmol/L）相当于20. 42mg的 邻苯二屮酸氢钾。根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量，算出本液的浓 度。4. 酸度计的校正（1）接通电源，开机预热5mino(2)用蒸

4、憎水冲洗电极，并用滤纸吸干，然后将电极放入pH已知的标准缓冲 溶液中(PH 6.864)摇动烧杯，使电极前端玻璃球与标准缓冲溶液充分接触。转 动标定旋钮，使仪器度数等于标准缓冲溶液的pH值。标定完成后将电极清洗干 净，并用滤纸吸干。同样的方法再标定pH 4.003的标准缓冲液。5. 供试品的电位滴定精密称取供试品约70mg,加冰醋酸25mL,照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0. lmol/L)滴定，并将滴定的结果用空口试验校正。每ImL高氯酸滴定液(0. lmol/L)相当于 7. 507mg 的 GHsNOa注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取” 系指量取体积的

5、准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。六、实验结果1原始数据(1 )标定项目加二1h 2平均值HC104滴定虽:/mL5.55.45.45(2)电位滴定V/mL024566.36.56.76.97E/mv3623864124314855265856246456522 数据处理(1)标定KHP+HC1O4 H2P+KC1O4=5.45*10-3 C-1204加=V hgcmC*'Mkhp*-1所以，高氮酸滴立液浓度C=0.1438mol/L(2)甘氨酸含量测定甘氨酸含量二G+ HC1O4HGC1O4gg心 X 100沧me原始数拯一阶微分二阶微分V/mLE/mvE/zWVaE

6、/ aVV03621210.52238613343.754412194.53555431545.5127.75.82564851376.156326.2756.35262956.4-5006.56.55851956.6-4506.76.76241056.8-233.36.8756.9645706.957652由二阶微分法知滴立终点为6.4 mL所以，甘氨酸含量=X 100% 羊0.143SX6.4XlQ-X7x070.07“=98.70%iukhp=V hcicmCMkhp0.16=5.45*10弋204.2=5.45*109C Vhcio4 MgX100%。収 X6.4Xex75.07xl0

7、0%0.07电位j商定去将盛有供试品溶液的烧杯置电磁搅拌器上，浸入电极，搅拌，并自滴定管中分次滴加滴定液；开始时可每次加入较多的量，搅拌，记录电位； 至将近终点前，则应每次加入少量，搅拌，记录电位；至突跃点已过，仍应继续滴加几 次滴定液，并记录电位。滴定终点的确定 用坐标纸以电位(E)为纵坐标，以滴定液体积(V)为横坐标， 绘制EV曲线，以此曲线的陡然上升或下降部分的中心为滴定终点。或以 E/AV (即 相邻两次的电位差和加入滴定液的体积差之比)为纵坐标，以滴定液体积(V)为横坐标, 绘制(AE/ AV) -Vllh,与厶E/AV的极大值对应的体积即为滴定终点。也可采用二 阶导数确定终点。根据

8、求得的 E/AV值，计算相邻数值间的差值，即为匕Z 2>,绘制(A<2>E/AV<2» 一V曲线，曲线过零时的体积即为滴定终点。如系供指示剂变色域的选择核对，滴定前加入指示剂，观察终点前至终点后的颜色变化，以选定该品种终点时的指示剂颜色。电位滴定法选用2支不同的电极= 1支为指示电极，其电极电势随溶液中被分析成分 的离/浓度的变化而变化；另1支为参比电极，其电极电势固定不变。在到达滴定终点时， 因彼分析成分的离了浓度急剧变化而引起指示电极的电势突减或突增，此转折点称为突 跃点。电位滴定仪作滴定分析时的使用方法：本仪器可以用于各种类型的电位滴左，用户根据不同的电

9、极，插后而板的电极插孔，如有的 电极不能直接插入Q9插孔中，则可用本仪器提供的Q9插头：连线用鳄鱼夹住电极头即可。A、按图1所示，装好滴左装置，将电磁阀两头的硅胶管分别用力套入滴泄管和滴液管 的接头上。B、将电磁阀插入仪器后部的插孔中，在滴泄管中加入标准溶液。C、按“快滴”键，调肖电磁阀螺丝，使标准液流下，赶走液路部分全部气泡。D、按“慢滴”键，同样调巧电磁阀螺怨，使慢滴速度为每滴0.02ml左右。E、重新加满标准液，按短滴键，使滴左管中的标准液调节到零刻度。F、选择开关這"预设"档，调节预设电位器至使用者所滴溶液的终点电位值，mv值 和PH值通用，如终点电位为-800mv,则调右终点电位器使数显为-800,如终点电 位为8.5PH,则调节终点电位器使数显为850即可。G、预设好终点电位后，选择开关按使用要求置mv或PH档，此时"预设”电位器就 不能再动了。H、用户在作滴左分析时，为了要保证滴泄精度，不