生物样品预处理方法综述与探究

1、生物样品预处理方法综述与探究摘要：生物样品的种类复朵而多样，因而生物样品的预处理方法则显得尤为 重耍，它是建立分析方法的重要环节，已经被广泛应用于多个领域。生物样品预 处理的目的，就是对被测元素或破坏样品的有机物进行提取、净化，甚至浓缩， 这样被测的元素就会表现出來，后面再测定就方使多了。本文主要概扌舌和论述了 超临界流体萃取技术、固相萃取技术、固相微萃取技术等儿种比较前沿的生物样 品的预处理技术，分析了其优缺点，并简单描述了一下生物样品处理的发展方向 和前景。关键词：生物样晶，超临界流体萃取，固相萃取，固相微萃取0引言近年來，随着科技的迅速发展和有力推动，生物样品预处理技术也得到了快速的发展

2、 和卬证，并取得了不少的成就。那么无机元素、有机元素分析的样品预处理方法都有哪些？ 有什么不同呢？超临界流体萃取技术、固相萃取技术、固相微萃取技术等新技术的出现解决 了这些难题，这些技术具有速度快、效率高、污染小等优点，应该被大力宣传和推广，并尽 早投入牛产牛活中。1超临界流体萃取技术超临界流体(supercritical fluid,简称scf)指处于超过物质本身的临界压力和临 界温度吋的流体。具有溶解度大、扩散和运动性强的特点。超临界流体萃取技术 (supercritical fluid extraction , sfe)就是把超临界流体当作溶剂,萃取出来一些有 效组分，接着进行分离的一门

3、技术。已经被广泛应用于医药、食品、化妆品以及一些天然产 物的分析方血。以前都使用以硅胶为材料的吸附剂，近年来一些新型的吸附剂相继出现，填 补了不少空白。他们具有容量高、选择性和疏水性都较好，在反相条件下対亲水性物质保留 时间较长等优点。超临界流体萃取技术的优点主要表现在，对脂溶性成分、挥发性成分、 热敏物质及小分子菇类等的提取很明显。具体要求：必须不低于临界温度和压力，让超临界 流体萃取成分，当恢复到常温和常压的时候，溶解成分会很快与气态的超临界流体分开。002 属于非极性溶剂，常被用作萃取剂使用在该技术中。对于非极性和低极性的化合物的溶解性 很强，但对于大多数无机盐、极性较强的物质却很难溶解

4、。添加甲醇、乙醇、内酮、乙酯等 改性剂是个可行的办法，该技术在生物碱类、黄酮类、皂貳类等的应用方面表现力不俗。 2固相萃取技术固相萃取技术自20世纪70年代诞生以來，以其高效、高选择性、高度自动化的特点, 被广泛应川于各种生物样品的分离和纯化。固相萃取技术(spe)就是把液体样品屮的目标 化合物进行吸附，将样品的干扰化合物和基体分开，再川洗脱液或加热解吸附洗脱。口前主 要有两种洗脱方法比较常见:其一，牛物介质的亲和力强，会被分离物直接洗脱；其二被分析 物的亲和力要强，用对被分析物亲和力强的溶剂洗脱目询，固相萃取剂研究的重点是把非极 性基团、极性、高分子树脂或离子交换基团混合使川的吸附剂。固相萃

5、取剂按照种类划分, 般可分为正相、反相利离子交换固相萃取三类，这是常见的分类方法。要根据分析物的溶解度、极性、pka等性质，选取适合的固相萃収柱，如果是非离子性 物质的话，要使用极性相似的固相萃取柱。强离子型分析物则川离子交换固相萃取。固相萃 取一般可分为活化、上样、淋洗和洗脱四步。新一代的聚合物吸附剂，例如waters的oasis hlb,既简化了样品制备过程，又有很宽的ph范围，可以萃取疏水、亲水、碱性、酸性或中 性组分，血浆、尿液等生物样品的制备比较适合2讥spe技术在牛物样本分析屮发挥着重要 的作用，已经取得了不小的突破，例如新型固定相萃取剂与白动化操作设备等的理论研究。3固相微萃取技

6、术固相微萃取技术(solidphasemiero 一 extraetion, spme)是一种比较前沿的样品前处理 技术，最早用來分析环境中的有机物，在食品、药物和牛化等领域，这种新的捉取技术受到 了高度的关注。它具有廉价、容易、与分析系统兼容、易于自动化、效率高等优点。spme 萃取模式可分成直接固相微萃(di rect 一 spme)和顶空固相微萃取(headspace-spme, hs 一 sfme)两种。涂层一般有聚丙烯酸酯、聚二甲基硅氧烷，混合涂料主要有聚乙二醇-二乙烯基苯、聚二 甲基硅氧烷-二乙烯基苯等。该技术的特点是高效、简捷、灵敏度高，集制备、分离于一体, 将以前的取样、萃取、

7、浓缩及进样多部分析操作变成为一个过程，故大的优点在操作过程中 不需耍使用溶剂，既节约资源，又比綾坏保。分析挥发和半挥发性成分，固相微萃取技术比 较适合，而对于复杂基质的分析却不尽人意。固相萃取已经被广泛运用于食品、环境化学、生物学等领域，复杂n标物样品微量或痕 量的分离、富集和分析表现明显。4生物样品预处理方法的选择生物样品种类众多，性能也不一样，选择起來比较棘手，对于不同的样品要采取不同的 预处理方法，要有针对性，才能取得理想的效果，一般主要有三种方法。4.1在常温下需要长时间反应的样品这种方法相对简单，只需要把准备好的样品放置一彼，不用管它，第二天再放进些消解 炉消解就口j以了，效果也是不

8、错的。42反应剧烈的样品这种方法也不复杂，首先需要把准备好的样品放在电子控温加热板上进行加温加热，而 且还要不停的摇晃溶样杯，仔细观察溶样杯，这时候会发现有少量或浅色气体冒出时，取下 后进行微波消解就可以了。4. 3.预处理时间长的难处理样品这种方法相对复杂些，仍然采川放过夜的方法，第二犬再进行消解处理。观察并测量样 品的体积变化，溶液体积如果小于6毫升时，应该及时的加水或酸，始终保持体积不小于6 毫升，最后再进行微波消解就可以了。5结束语随着人们所而对的分析体系越來越复杂，人们采用的分析手段越來越高。在市场和技术 的双重驱动下，现代分析的发展将越來越快，生物技术将跨入了一个崭新的时代。总之，

9、每 种处理方法都各有特点，有利有弊，在实际操作屮，要根据化合物的物理化学性质，选择合 适的前处理方法才能事半功倍。参考文献1 broich j r,hoffman d b, goldner s j, et al. liquid solid extraction of lyophilized biological material for forensic analysis. t. application to urine samples for detect ion of drugs of abuse. j chromatogr, 1971, 63:3092 oshihara k, kiyonami r, shi mi zuy, et al. determination of urinary pyrra-line by solid-phase extraction and high performance liquid chromatography.biol pharm bull, 2001,24(8):8633 uitema a d, reinders c, tibben m m, et al. sensitive gas chromato-grap