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文档简介
1、实验八实验八 血型鉴定及交叉配血血型鉴定及交叉配血实验实验(一)ABO血型鉴定 1 1实验原理实验原理 红细胞膜上具有血型糖蛋白,作为抗原,也称为凝集原;ABO血型就是根据红细胞表面抗原来确定的,根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原,将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。 血清中含有相应的特异性抗体称为凝集素。 凝集原和相应的凝集素特异性结合,使红细胞凝集成团,进而引起红细胞破裂,产生溶血。 ABO血型鉴定的原理是利用红细胞凝集试验,将待测血液分别与已知含A抗体和B抗体的标准血清混合,观察是否发生凝集现象,判断待测血液红细胞上有何种抗原,由此确定待测血液的血型。ABO血型分类ABO血型正反定
2、型结果 (一)ABO血型鉴定2 2血型鉴定方法血型鉴定方法标记凹载玻片:左上角写A,右上角写B。分别吸取标准A血清和标准B血清各1滴滴于双凹载玻片左端和右端。采血针刺破左手无名指尖,待血液出来后,用2支毛细滴管吸取血液,分别加入到玻片左、右两侧的血清内,并用牙签搅拌,使标准血清与血液混匀。(切勿混用毛细滴管和牙签!)手持玻片转动数次,转动时玻片应保持在一个水平面上,然后置室温下5min后观察结果。肉眼观察:如果外观略呈花边状或锯齿状,看上去有沉淀,则多为凝集;如果血滴呈均匀状态,边缘整齐,则多为不凝集。进一步在低倍镜下观察:在低倍镜下,如果观察到红细胞凝集成团,或尚有少数游离细胞,则为凝集现象
3、;如果红细胞均为游离状态,则为不凝集。根据镜下所见有无凝集现象判定血型。取干净载玻片取干净载玻片滴加定型剂滴加定型剂消毒消毒取血取血消毒消毒取血取血消毒消毒观察观察记录结果记录结果用7075的酒精消毒取血部位用针扎一下消毒部位,使血冒出,立即滴一滴血液在抗A或B上。 再用7075的酒精擦洗消毒刚用针扎的部位,然后再取一滴血液于抗B或A上。 观察有无凝集,并按下表判定结果。 血型抗A试剂抗B试剂ABOAB+-+-+-+呈现均匀的淡红色时,表明不凝集,用呈现均匀的淡红色时,表明不凝集,用“一一”号表示。号表示。 在试剂里凝结成絮团状,形成鲜明的对比,表明凝集,用在试剂里凝结成絮团状,形成鲜明的对比,表明凝集,用“十十”号表示。号表示。(二)交叉配血试验 交叉配血的要求交叉配血的要求 交叉配血的目的交叉配血的目的交叉配血试验方法交叉配血试验方法 盐水介质配血方法盐水介质配血方法患者献血者主侧次侧 抗球蛋白配血方法抗球蛋白配血方法 抗球蛋白方法配血方法抗球蛋白方法配血方法 酶介质配血方法酶介质配血方法 酶介质配血方法酶介质
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