含量和有关物质方法学验证方案

1、一般项目方法学验证方案表一原料药检测项目及方法学验证方案名称 检测项目 方法学验证起始原料 性状、溶解度、鉴别、比旋度（手残留溶剂、有关物质、含量性中心）、干燥失重、炽灼残渣、残留溶剂、重金属、有关物质、含量中间体 性状、有关物质、纯度 有关物质、纯度API 性状、溶解度、引湿性、熔点、残留溶剂、粒度、有关物质、含量 比旋度（手性中心）、鉴别、干燥失重或水分、硫酸盐、氯化物、重金属、炽灼残渣、残留溶剂、粒度、晶型、有关物质、含量表二片剂检测项目及方法学验证方案名称 检测项目 方法学验证片剂 性状、鉴别、水分、重量差异、 有关物质、溶出度、含量均匀度、有关物质、溶出度、含量均匀度、 含量、微生物

2、限度含量、微生物限度表二 有关物质方法学验证内容名称 有关物质色谱条件有关物质方法学验证 HPLC摸索起始原料 检测波长的初选、分 分离度、仪器精密度、 不加校正因子的主成离度、检测波长的确 LOD、溶液稳定性、空 分自身对照法疋 白干扰中间体 检测波长的初选、分 分离度、仪器精密度、 面积归一化法离度、检测波长的确 LOD、溶液稳定性、空疋 白干扰API 检测波长的初选、分 分离度、强制降解试验、 不加校正因子的主成离度、检测波长的确 仪器精密度、 LOD、溶 分自身对照法疋 液稳定性、空白干扰、耐用性分离度、强制降解试验、 加校正因子的主成分系统适用性、仪器精密 自身对照法度、LOD、LO

3、Q、线性、溶液稳定性、空白干扰、耐用性外标法分离度、强制降解试验、系统适用性、仪器精密度、方法精密度、中间精密度、溶液稳定性、空白干扰、 LOD、LOQ、线性、回收率表四有关物质色谱条件摸索名称 试验内容 备注检测波长的初选 分别取各杂质及供试品加甲醇（或乙腈）溶解溶剂：能溶解供试品或各杂质的单一溶剂（可 向并稀释制成各约含 XXug/ml （般 10ug/ml ）合成咨询溶剂及供试品或各杂质的溶解情 况）的溶液，进行 UV扫描（200nm? 400nm ）浓度：吸光度读数以在 0.3 ? 0.7 之间为宜色谱条件摸索（流动先查文献或各国药典 API 的保留时间一般在 5? 15min，主峰峰

4、型相、色谱柱的摸索） 好，理论板数 5000 以上。API 的配制浓度：根据扫描结果分离度 分别取各杂质及供试品配成一定浓度，分别进杂质与主峰的分离度应大于 1.5样。分离度溶液：配制成含 API 的浓度及各杂质浓 度为1 %（ API 的有关物质测定浓度）（进 6 针）检测波长的确定 在流动相条件下进行 U V扫描表五 有关物质方法学验证具体内容试验内容 溶液配制方法 溶液配制份数 进样针数 评定标准 备注系统适用性 分别取供试品、各杂质适量， 供试液 1 份 进 6 针 杂质峰峰面积 RSD <2.0% ; 杂质为订入标准中的加流动相超声溶解，并稀释 保留时间 RSD <.0%

5、 ; 杂质配制成约含供试品 XXmg/ml 杂质峰的拖尾因子 <2.0 ;和含杂质各 1% （相当于供试 分离度及理论塔板数应符合质品浓度 XXmg/ml ）的混合溶 量标准的规定液作为系统适用性溶液。方法专属性 1 精密量取流动相 供试液 1 份 每份各 1 针 空白溶剂应无干扰；精密度 在规定的测试条件下，同一均质供试品，经多次取样进行一系列检测所得结果之间的接近程度（离散程度）仪器精密度 供试液及自身对照液 自身对照液 1 份 进 6 针 峰面积 RSD ?.0%供试液仪器精密度供试液 1 进 6 针 峰面积 RSD ?.0% ;份 保留时间 RSD 胡.0%检测限 供试品或杂质适

6、量， 用流动 供试品溶液 1 份 检测限 2 针； S/N 为或 2。 研究的所有杂质相溶解并逐级稀释定量限 供试品或杂质适量， 用流动 供试品溶液 1 份 定量限 6 针； S/N >10。主成分及杂质峰保留 外标法测定的杂质相溶解并逐级稀释 时间的相对标准差应不大于2.0 % ，峰面积的相对标准差应不大于 5.0% 。溶液稳定性 供试液 供试液 1 份 0、 1、2、4、6、8、 主成分的含量变化的绝对值24 小时各进 1 针 <2.0% ;杂质含量的绝对值在 ±).1 %以内，并不得出现新的大于报告限度的杂质峰面积及峰面积的归一化含量主峰的拖尾因子不得大于 2.0

7、;耐用性 供试液 调流动相 pH 变化±）.2 1 份供试液和 1 份系统 适用主峰与杂质峰必须达到基线分调流动相配比变化 ±5% 系统适用性溶液性溶液，各条件下进离；主峰与杂质峰分离度符合质柱温艾°C （如有柱温） 2 针量标准；不同（批号）色谱柱 各条件下的峰面积 RSD 符合流速相对值变化支 0 %规定； 缓冲液中盐的浓度± 0 %杂质含量的绝对值在 ±）.1 %以内供试液 6 份 供试品进 1 针 方法精密度 供试液报告限以上的杂质个数一致，外 标法杂质对照品溶液进 3 针 杂质对照品溶液 1 份杂质对照品溶液计算杂质的含量， RSD

8、不 得大于15% 。中间精密度 供试液 供试液 6 份（另一个人员、 供试品进 1 针 报告限以上的杂质个数一致，外杂质对照品溶液 不同仪器、不同时间）杂质对照品溶液进 6 针 标法计算杂质的含量， 12 个数 据 RSD 不得大于 20%。杂质对照品溶液 1 份线性 不同浓度的各杂质对照品溶 至少 5 个浓度（ LOQ ? 限度的 各进 2 针 相关系数（ R）不得小于 0.9990 , Y液 150% ) 轴截距应在 100% 响应值的 25% 以内，响应因子的相对标准 差应不大于10%。各浓度下的平均回收率应在 回收率 供试液 供试液 9 份（三个浓度： 50% 、 供试液各进 2 针80%-120% （低浓度为定量限，杂质对照品溶液 限度、120% 各 3 份） 杂