UV仪器操作要点学习课程

1、提纲UV2550的仪器介绍及特点UV2550的基本操作UV2550的维护第1页/共20页第一页，编辑于星期日：七点 二十五分。仪器介绍 UV2550是一款双光束分光光度计 经单色器分光后经反射镜分解未强度相等的两束光，一束通过参比池，一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度，此比值即为式样的透射比，经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。由于两束光同时分别通过参比池和样品池，还能自动消除光源强度变化所引起的误差。第2页/共20页第二页，编辑于星期日：七点 二十五分。性能参数 1.测定波长范围：190900nm 2.谱带宽度：0.15nm 3.分辨率：0.1nm 4.波长重现性：

2、0.1nm 5.杂散光：0.0003%以下 6.测光方式： 双光束方式 7.测光范围： 吸光度-45Abs,透射率，反射率：0.0-999.9% 8.记录范围： 吸光度-9.999-9.999Abs，透射率，反射率：-999.9-9.999 9.基线平坦度： 0.001Abs以内（除去干扰，狭缝2nm,波长扫描） 10.检测器：光电倍增管第3页/共20页第三页，编辑于星期日：七点 二十五分。特点介绍 低杂散光 由于光源发出的光经过单色器时有可能从单色器舱内及其它光学元件表面发生反射，从光学元件表面以及大气中的灰尘也可以发生散射，这些都会产生杂散光。杂散光的存在会对比尔定律产生偏移。 狭缝可选

3、具有0.1nm、0.2nm、0.5nm、1nm、2nm、5nm 共6档光谱带宽选择，通过带宽调节找到最优的测试条件。 连续光经单色器分光，为了要有足够光强,入射光狭缝必须有一定的宽度，因此由出射光狭缝投射到被测溶液的光束，并不是理论要求的严格单色光，而是由一小段波长范围的复合光，由分子吸收光谱是一种带状光谱，吸光物质对不同波长光的吸收能力不同，在峰值位置，吸收能力最强，最大, 其他波长处都变小，因此当吸光物质吸收复合光时，表现吸光度要比理论吸光度偏低，因此导致比耳定律的负偏离。第4页/共20页第四页，编辑于星期日：七点 二十五分。软件介绍UV Probe 包括四个基本组成部分： 1 扫描和分析

4、波长的光谱模块。（定性分析） 控制分光光度计和扫描指定范围内的波长，并记录下扫描范围内各波长的吸收值、透射率、反射率或能量读数。 2 动力学模块。（化学动力学研究） 通过分光光度计观测吸收值、透射率、反射率和能量随时间的改变而发生的变化 3 分析定量数据的光度测定模块。（定量分析） 用于测定样品中某项物质的浓度；使用分光光度计进行测定并描绘标准曲线，然后通过曲线计算未知样品的浓度值；或通过建立和自定义的方程式推导该数值。 4 报告生成器 可通过使用链接或嵌入数据建立并打印自定义报告第5页/共20页第五页，编辑于星期日：七点 二十五分。UV2550一般操作 打开仪器及计算机的电源。 双击桌面上的

5、UVProbe图标 连接仪器及初始化第6页/共20页第六页，编辑于星期日：七点 二十五分。操作标准曲线打来一个模块 （以光度分析为例）第7页/共20页第七页，编辑于星期日：七点 二十五分。 基线校正 基线校正设定当前选择的波长范围内的背景为零，在此范围内的所后续的读数受其影响。基线校正确保在采集数据时有较好的参照点。 仪器空载下点击“基线”，弹出对话框后在开始波长和结束波长中分别输入 700和 300。 完成扫描后，查看列出的基线调零信息。 第8页/共20页第八页，编辑于星期日：七点 二十五分。操作标准曲线 建立方法，选择 编辑 方法，或点击方法图标第9页/共20页第九页，编辑于星期日：七点

6、二十五分。操作标准曲线 查看设置第10页/共20页第十页，编辑于星期日：七点 二十五分。 自动调零 此操作把参比溶液都置于样品池与参比池中，点击“自动调零”，完成后光度计状态栏的吸收值的读数应为零。 注：基线校正、自动调零与池空白的区别 基线校正设定当前选择的波长范围内的背景为零，补偿漂移。关闭过仪器或改变测定波长范围才执行此操作。对光谱分析尤为重要。 自动凋零是使用“自动调零”来对光度计单元在指定波长进行调零和校正细微变化，如因热效应引起的偏差，此操作对吸收值调零，但当选择透射或反射时则被设置为100%。多用于光度分析。 当点击“池空白”时，分光光度计测得一个读数，以后的检测中分光光度计测得

7、的读数都将减去该数。池空白操作的目的在于消除试管对测量结果的影响。用在单池或动力学研究。第11页/共20页第十一页，编辑于星期日：七点 二十五分。操作标准曲线 输入标准曲线各个浓度，鼠标指向相应浓度并把对应浓度的吸收液倒入比色皿中置于样品池，参比溶液对应放在参比池。读取数据。第12页/共20页第十二页，编辑于星期日：七点 二十五分。操作标准曲线第13页/共20页第十三页，编辑于星期日：七点 二十五分。操作标准曲线 生成报告第14页/共20页第十四页，编辑于星期日：七点 二十五分。操作标准曲线第15页/共20页第十五页，编辑于星期日：七点 二十五分。操作测试未知样品 测试完毕后，保存数据文档 。关闭软件，再关仪器电源第16页/共20页第十六页，编辑于星期日：七点 二十五分。 参比池 长程支架 样品池 石英窗第17页/共20页第十七页，编辑于星期日：七点 二十五分。UV2550维护 注意使用条件 使用时室温应保持15-35 ，相对湿度45-80%，防震防电磁干扰，防止腐蚀性气体存在。测量具挥发性溶液样品时，吸收池应加盖。 清洗样品室 清洗样品室底部溅出的液体样品，防止其蒸发和腐蚀样品室，或由于腐蚀而得到错误结果。 保持石英窗的清洁 拆卸吸收池架，取下石英窗，用酒精擦洗。 检查波长精确度 以一定波长范围内的光扫描绘制光谱，