sysmexXN原理学习课程

1、XN机型机型细胞检测通道B4DIFF+WNRB3B4+RETB2B4+PLT-FB1B4+RET+PLT-FA2B4+WPC+RETA1B4+WPC+RET+PLT-F第1页/共35页第一页，编辑于星期六：二十三点 三分。基本原理基本原理WNRWDFWPCRETPLT-F通道半导体激光+流式细胞术+核酸荧光染色第2页/共35页第二页，编辑于星期六：二十三点 三分。溶血剂：Lysercell WNR染色液：Fluorocell WNRWNR散点图 SFL：侧向荧光 FSC：前向散射光 BASOWBCNRBCDebris项目WBC, NRBC, BASO报警信息PLT Clumps?, NRBC

2、Present, WBC Abnormal Scattergram原理：WNR通道New嗜碱性粒细胞 淋巴细胞单核细胞粒细胞（中性粒细胞嗜酸性粒细胞等）有核红细胞红细胞弱中强极弱极弱中中强侧向荧光(SFL) 前向散射光(FSC)细胞膜通过溶血荧光第3页/共35页第三页，编辑于星期六：二十三点 三分。NRBC为常规报告参数的临床意义u自动修正白细胞计数u 新生儿白细胞计数的正确u溶血性贫血病人的诊断、治疗u放化疗病人的治疗监测u重症ICU病人的预后u有效降低推片复检率第4页/共35页第四页，编辑于星期六：二十三点 三分。由于在CBC模式下该通道用于WBC测定，因此可以在全体样本中测得NRBC计数

3、，以及由NRBC数修正过的WBC数据。 但是如果遇到白细胞散点图异常，仍然需要显微镜检查由于采用荧光染色进行检测，红细胞没有被染色，所以不存在红细胞溶血不良所造成的影响。 没有采用荧光染色的仪器做出来的结果会偏高 卫生部临检中心下发质控品的WBC结果上报： WBC+NRBC#（因为非配套质控品中的白细胞固化比较严重，不能正常染色，部分白细胞当成了NRBC检测）WNRWNR通道的要点通道的要点第5页/共35页第五页，编辑于星期六：二十三点 三分。原理原理：WDFWDF通道通道溶血剂：Lysercell WDF染色液：Fluorocell WDFWDF散点图 SSC：侧向散射光 SFL：侧向荧光项

4、目NEUT, LYMPH, MONO, EO, IG报警信息Atypical lymph?, Blast/Abn Lymph?,IG present, PLT Clumps?, WBC Abnormal Scattergram淋巴细胞单核细胞中性粒细胞嗜酸性粒细胞 异型淋巴粒细胞幼稚白细胞溶血染色侧向散射光(SSC) 侧向荧光(SFL)中中弱弱中强弱弱中强弱中EONEUTLYNPHDebrisMONOIGAty_Lymph(HFLC)BlastAbn_Lymph异淋出现在领域的细胞数可以参考HFLC (参考参数项目)等同于XE-2100中的Other第6页/共35页第六页，编辑于星期六：二十三

5、点 三分。HFLC代表什么细胞？ HFLC代表什么细胞？异型淋巴（正常白细胞分类散点图正常，异常报警Atypical lymphAtypical lymph? ?）异常淋巴（散点图异常，没有完整的五分类结果，有灰色散点，仪器报警Blast/Abn LymphBlast/Abn Lymph? ?）原始细胞（髓系） （散点图异常，没有完整的五分类结果，有灰色散点，仪器报警Blast/Abn LymphBlast/Abn Lymph? ? ） IG代表什么细胞？部分杆状核、晚幼粒细胞、中幼粒细胞、早幼粒细胞（深蓝色散点，仪器报警IG presentIG present ，该报警需要在IPU中打开）7

6、第7页/共35页第七页，编辑于星期六：二十三点 三分。血小板聚集PLT ClumpsPLT ClumpsNegativeNegativeWDF chWDF chWidth - FSCWidth - FSC大量血小板聚集在一起大量血小板聚集在一起血小板聚集，直方图异常血小板聚集，直方图异常第8页/共35页第八页，编辑于星期六：二十三点 三分。白细胞聚集 仪器报警： Difference between WNR and WDF 对策： 采用3R功能，自动检测LW模式，采用WDF通道检测WBC 水浴重检WNR(FSCW-FSC)WDF(FSCW-SFC)第9页/共35页第九页，编辑于星期六：二十三点

7、 三分。可以监测大量血小板聚集和白细胞聚集可以定量检测原始细胞和异型淋巴细胞（HFLC）、幼稚粒细胞(IG)低值白细胞模式可以提高精密度为临床提供准确的停药时机，提高幼稚细胞的灵敏度WDFWDF通道的要点通道的要点第10页/共35页第十页，编辑于星期六：二十三点 三分。原理原理：WPCWPC通道通道溶血剂：Lysercell WPC染色液：Fluorocell WPCWPC散点图SSC：侧向散射光 SFL：侧向荧光FSC：前向散射光WBCWBCBlastAbn LymphBlastAbn Lymph项目HPC(参考参数)标志Abnormal lymph?, Blasts?, Atypical

8、lymph?异常淋巴细胞原始细胞 成熟白细胞溶血染色侧向散射光(SSC)侧向荧光(SFL)前向散射光(FSC)中强弱中强弱中弱弱弱强弱强HPCHPC第11页/共35页第十一页，编辑于星期六：二十三点 三分。在WPC通道，采用荧光染色可以区分Abnormal Lymph和Blast的异常细胞。主要作用：1）白血病的初步筛选，2）降低复检率，3）HPC的定量检测，用于PBSCT干细胞采集时间的判断WPCWPC通道的要点通道的要点第12页/共35页第十二页，编辑于星期六：二十三点 三分。原理：原理：RETRET通道通道稀释剂：CELLPACK DFL染色液：Fluorocell RETRET散点图

9、SFL：侧向荧光 FSC：前向散射光 RBCPLT-OLFRHFRMFR项目RET, RET-He标志RET Abnormal scattergram, Fragments?白细胞网织红细胞 红细胞侧向荧光(SFL)前向散射光 (FSC)染色弱中强强强强第13页/共35页第十三页，编辑于星期六：二十三点 三分。14FRC#FRC#，FRC%FRC% 原来没有红细胞碎片没有标准 现在需要报告裂片红细胞的百分比需要镜检至少500个红细胞 主要见于血栓性血小板减少性紫癜、DIC、微血管病性溶血性贫血、心源性溶血性贫血、化学中毒、肾功能不全FRC GateCorrected area for smal

10、l RBC第14页/共35页第十四页，编辑于星期六：二十三点 三分。ICSH的形态学标准-2014年15现在需要报告裂片红细胞的百分比，需要镜检至少500个红细胞第15页/共35页第十五页，编辑于星期六：二十三点 三分。 高EPO浓度加速RET在骨髓中的释放速度，RET在骨髓中带网时间缩短，在外周血中带网时间延长，造成外周血RET增高的假象。 绝大部分贫血疾病，EPO与HCT或HGB呈规律性的反比，根据贫血程度对网织红细胞进行纠正，即RPI（网织红细胞生成指数）RPI(网织红细胞生成指数)第16页/共35页第十六页，编辑于星期六：二十三点 三分。RPI的计算公式 Hematocrit Reti

11、s-residence in the Blood 45 % 1 day35 % 1,5daysShift25 % 2 days 15 % 2,5 days RPI = Reti % x Hct 0,45 (Ideal Hct) x residence Retis in the Blood天数 = -5HCT + 3.25R = 100.511.522.5300.10.20.30.40.5第17页/共35页第十七页，编辑于星期六：二十三点 三分。RPI的临床意义 正常人RPI为1.0（建议建立适合自己的参考范围） 若RPI为0.1，表示骨髓有效造血能力为正常的10%，如重度再障、巨细胞性贫血。

12、若RPI为3.0，表示骨髓有效造血能力为正常的3倍，这是诊断溶血状态的可靠依据。 若RPI为2.0左右，表示造血代偿能力不足，或贫血治疗有效后的恢复过程中。第18页/共35页第十八页，编辑于星期六：二十三点 三分。可以定量检测红细胞碎片。增加了RET-He报告参数。 可以检测RPI（网织红细胞生成指数） PLT-O可以排除大部分碎片的干扰，用于报告PLTRETRET通道的要点通道的要点第19页/共35页第十九页，编辑于星期六：二十三点 三分。稀释剂：CELLPACK DFL染色液：Fluorocell PLTPLT-F散点图SFL：侧向荧光FSC：前向散射光RBCPLT-FIPFWBC项目PL

13、T, IPF标志PLT Abnormal scattergram,PLT Clumps?原理：PLT-F通道红细胞血小板IPF(未成熟血小板）侧向荧光(SFL)前向散射光(FSC)强弱中弱染色弱中中强中第20页/共35页第二十页，编辑于星期六：二十三点 三分。Fluorocell PLT主要对含核酸丰富的细胞内构造进行染色小胞体（核糖体RNA）线粒体（MtDNA）红细胞红细胞1m小胞体线粒体原理：PLT-F通道PLT-FPLT-FIPFIPF第21页/共35页第二十一页，编辑于星期六：二十三点 三分。SFLSFLSFLSFLFSCFSCPLT-O (XE)PLT-O (XE)PLT-F (XN

14、)PLT-F (XN)FSCFSCPLT-FPLT-FPLT-OPLT-OIPFIPFIPFIPFLower size PLTLower size PLTLower size PLTLower size PLTPLT-FPLT-F与与PLT-OPLT-O的差异的差异PLT-F通道的染液对通道的染液对PLT的染色效果更敏感的染色效果更敏感检测颗粒数是检测颗粒数是PLT-O或或PLT-I的的5倍倍第22页/共35页第二十二页，编辑于星期六：二十三点 三分。23IPF（RP）的临床意义 血小板减少症的病因学诊断 生成减少：再障、白血病及肿瘤，由于骨髓受抑制，血小板总数减少， RP比例大致正常，而RP

15、绝对值明显低于正常。破坏增加：ITP，骨髓生成血小板加快，外周血中新生血小板增多，使RP比例升高。但由于血小板寿命缩短，使RP绝对值减少。脾亢虽有血小板减少，但RP比例接近正常，RP绝对值亦低于正常水平消耗增加：TTP，DIC，虽有血小板减少，但RP比例接近正常，RP绝对值亦低于正常水平。 第23页/共35页第二十三页，编辑于星期六：二十三点 三分。血小板聚集24血小板聚集散点图血小板未聚集散点图第24页/共35页第二十四页，编辑于星期六：二十三点 三分。由于选择性染色血小板，故网织红细胞难以染色。另外，也不会受到红细胞碎片的影响。5倍计数，即使是血小板低值样本，也可高精度检测。结果与参考方法

16、几乎一致IPF仅在PLT-F通道可以检测。鉴别血小板减少的原因敏感的监测血小板聚集PLT-FPLT-F通道的要点通道的要点第25页/共35页第二十五页，编辑于星期六：二十三点 三分。血细胞通过电阻值发生变化脉冲被检测当血细胞通过检测部小孔时，电阻信号信号的大小与通过的细胞体积呈正比电阻变化的次数细胞数感应区域(感应电阻变化的区域）时 间电阻值红细胞血小板基本原理：直流阻抗法通道：RBC/PLT计数粒子较多，重复性好正确测定体积信息阻抗法的优点第26页/共35页第二十六页，编辑于星期六：二十三点 三分。RBC/PLTRBC/PLT通道通道 鞘流电阻抗法直接测量直接测量： RBC:红细胞数 PLT

17、:血小板数 根据脉冲信号解析测量解析测量： HCT:红细胞压积 PCT：血小板压积 根据直方图解析测量解析测量： RDW-SD：红细胞分布宽度 RDW-CV：红细胞分布宽度 PDW：血小板分布宽度 P-LCR：大血小板比率 计算：计算： MCV:平均红细胞体积 MCH:平均血红蛋白含量 MCHC:平均血红蛋白浓度 MPV:平均血小板体积第27页/共35页第二十七页，编辑于星期六：二十三点 三分。RDW-CV 点L1和L2在总分布区域中的出现频率为68.26%，使用下列方程计算RDW-CV： RDW-SD/RDW-CVRDW-SD/RDW-CVRDW-SD 假设峰值高度为100%，在20%频率水

18、平上的分布宽度即为RDW-SD。单位用fL表示，其中1fL = 10-15L。RDW-CV (%)= 100L2-L1L2+L1第28页/共35页第二十八页，编辑于星期六：二十三点 三分。MCV/MCH/MCHCMCV/MCH/MCHC MCV(红细胞平均体积)=HCT/RBC MCH(平均红细胞血红蛋白含量)=HGB/RBC MCHC(平均红细胞血红蛋白浓度)=HGB/HCT第29页/共35页第二十九页，编辑于星期六：二十三点 三分。血小板直方图血小板直方图 分布范围：LD(26)Fl;UD(12-30）fl之间 反映参数：PLT、MPV、PDW 高位干扰：小RBC、大血小板，血小板聚集 低位干扰：电流、尘埃等PLPU100 %20 %10 fl20 fl30 fl40 fl12 fl第30页/共35页第三十页，编辑于星期六：二十三点 三分。PDW/ P-LCR PDW 假设峰值高度为100%，在20%频率水平上的分布宽度即为PDW。单位用fL表示，其中1 fL = 10-15L。 P-LCR P-LCR为由12 fL界标或更大界标得到的巨型血小板的比值。计算时，将固定界标与高界标之间的粒子数，同低界标与高界标之间的粒子数相比而得到一个比值。第31页/共35页第三十一页，编辑于星期六：二十三点 三分。2-2.2-2.基本原理基本原理： SLS-S