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文档简介
1、实验一显微镜下的生命世界一、实验目的掌握显微镜的使用方法,了解生物细胞形态多样性,了解各基本组织结构、机能。二、实验器材、药品显微镜、剪刀、钱了、刀片、载玻片、盖玻片、锻了、牙签、滴悸、细胞永久装片、组织永久装片、 生理盐水、高猛酸钾、亚甲基蓝。三、实验内容1显微镜的构造及使用;2. 人口腔黏膜上皮细胞临时装片制作及观察;3. 酵母菌水装片制作与观察;4. 植物表皮细胞临时装片制作及观察;5. 动植物组织永久装片观察四、实验步骤(一)显微镜的构造及使用1. 显微镜的棊本构造:显微镜的中部冇一弯曲的柄,称镜臂,棊部为镜座。右手握紧镜臂,左手托 住镜座,保持镜体直立,轻放于实验台上,观察各部分构造
2、。镜座上的短柱叫镜柱。镜臂基部有一方形或 圆形的平台,是载物台(或称镜台)。台的中央有一圆孔,可通过光线,载物台上有镜台x-y驱动器,用 以固定和移动玻片标本。圆孔下面,有由一片或儿片透镜所组成的聚光器,有集射光线于物体的作用。聚 光器附有一组由金属片组成的可变光阑,其侧面伸出一杠杆,可前后移动使光阑开闭。光阑人则光线强, 适于观察色深的物体;光阑小则光线弱,适于观察透明(或白色)的物体。在聚光器下冇反光镜,可将光 线反射到聚光器。内光源显微镜的光源位于镜座靠后方,在镜座右侧有光源按钮,此按钮町前后移动,用 以调节光线的强弱。在载物台的圆孔上方,有一附于镜柄上端的圆筒称镜筒,镜筒上端有接目镜(
3、或称目 镜),有不同规格,可放大不同的倍数。较长的是低倍,较用的是高倍。镜筒下端有可旋转的圆盘叫旋转 器,下面附有2-4个接物锐(或称物镜),以螺旋旋入旋转器内。物镜也有低倍和高倍之分,较短的是低 倍,较长的是高倍,放人的倍数镜头上有标记。还有一个物镜是汕镜,镜筒上有oil或oel字样。转动旋 转器町换不同的物镜。在镜臂上有一组大小相套的螺旋,外周大的叫粗调焦器,中央小的叫细调焦器。显 微镜总放大倍数是接目镜的放大倍数与接物镜的放大倍数的乘积。2. 显微镜的使用方法:使镜臂反对着自己,摆好显微镜。转动粗调焦器,把镜筒向上提起。转动旋 转器,使低倍物镜对准载物台上的圆孔,二者相距约2cm左右,打
4、开光源按钮,一边移动按钮调节光线, 一边对着双筒接fi镜观察,呈现一片均匀白色即町。取一组织装片放载物台上,使材料e对圆孔,用xy 驱动器固定好玻片,转动粗调焦器,使低倍物镜与玻片z间的距离最短,然后向冃镜内边观察边旋转粗调 焦器,直至视野内材料清晰为止,此为调焦点,再以可变光阑调节光线的强弱。低倍镜观察完可转高倍镜。首先将要详细观察的部分移到视野屮央,提升镜筒, 转动旋转盘,换高倍镜,从侧血观察镜筒与玻片间的距 离,使高倍物镜几乎接触玻片为止(大约1mm),再从冃镜观察,转动细调焦器, 一般旋转半圈至一圈即可出现物像,有的显微镜在低倍镜下调好焦,肓接转到高倍镜即可。使用高倍物镜 时,-定要先
5、从低倍物镜开始。准备详细观察的部分,一定要移到视野中央。在高倍镜下调焦点只能用细 调焦器,不能用粗调焦器。光阑耍开大。由低倍镜转高倍镜需多练几次。便用油镜吋,首先在高倍镜下调 准焦点,将要观察的部分移至视野中心,转动旋转器,使汕物锐转到一旁,在盖片上视野中央的位置加一 滴镜头油(具一定折射率),再将油物镜移回,使其镜头 浸入油中,开大光阑,即对看到物像,稍旋细调焦器即可看清物像。用后旋转粗调焦器将物镜和载物台z 间距离拉大,然后将油镜移至旁边,用镜头纸沾镜头清洗液轻轻擦试,不宜用二甲苯或相似溶剂擦试,以 免破坏镜头屮的胶合剂。观察完毕,必须先把物镜转开,然后取出装片。每次实验完毕,都要把高、低
6、倍 镜转向前方,不可对着聚光器。要注意经常保持显微镜的清洁,如金属部分启灰尘时,一定要用柔软洁净 的布擦干净,如镜头有灰时,-定要川特备的镜头纸擦,切勿卅手或其他布、纸等擦试,以免损坏镜头。(二)人口腔黏膜上皮细胞临时装片制作及观察滴一滴0.7%生理盐水在载玻片上,用清水漱口,取一根牙签,把粗端浸入0. 1%高猛酸钾溶液里消毒 后,伸进自己口腔里,在颊部轻刮几下;把牙签头放在载玻片的生理盐水里搅一搅,滴一滴亚叩基蓝溶液, 盖上盖片,低倍镜下观察,找到口腔上皮细胞示,移至视野屮央,转高倍镜观察。(三)酵母菌水装片制作与观察取1滴酵母菌溶液于载玻片上,滴一滴亚甲基蓝溶液,盖上盖片,低倍镜下观察,找
7、到口腔上皮细胞后, 移至视野中央,转高倍镜观察。(四)植物表皮细胞临时装片制作及观察避开大叶脉,撕取植物下表皮置于载玻片上,滴一滴清水,盖上盖玻片,在显微镜下观察。(五)动植物组织永久装片观察选择动植物组织永久装片各2张观察。五、实验作业1. 绘制人口腔黏膜上皮细胞3-4个,并发送照丿fl张;2. 发送酵母菌水装片照片1张;3. 发送植物表皮细胞临时装片照片1张;4. 发送动植物组织永久装片照片各2张。实验二叶绿体色素的综合实验一、基础知识:叶绿体色素是植物吸收太阳光能进行光合作用的重要物质,主要由叶绿素罕叶绿索b、胡萝卜素和 叶黄素组成。从植物叶片中提取和分离色素是对其认识和了解的前提。利用
8、叶绿体色素能溶于启机溶剂的 特性,可用丙酮提取。植物色素包括脂溶性的叶绿体色素和水溶性的细胞液色素,前者存在于叶绿体中,与光合作用有关, 如叶绿素。二、目的要求:掌握分光光度计的使用方法,掌握叶绿体色素的提取方法及其性质。三、实验内容:叶绿体色素的提取和性质测定。四、主要器材、药品:台天平、研钵、量筒、烧杯、漏斗、丙酗、碳酸钙、石英砂、分光光度计、分 液漏斗、移液管、吸球、试管、氢氧化钾、乙讎、甲醇、盐酸、醋酸铜、新鲜植物叶片。五、实验学时:5学时六、操作步骤1称取新鲜叶子0. 2g,放入研钵中加丙酮5ml,少许碳酸钙和石英砂,研磨成匀浆,再加丙酮35ml, 然后以漏斗过滤之,即为色索提取液。
9、2. 叶绿素的荧光现彖取上述色素丙酮提取液少许于试管中,用反射光和透射光,观察提収液的颜色有无不同。反射光观察 到的溶液颜色,即为叶绿素产牛的荧光颜色。3. 光对叶绿素的破坏作用取上述色素丙酮捉取液少许,分装在2支试铮中,1支试管放在黑暗处(或用黑纸包裹),另1支试管放在 强光下(太阳光),经23小时后,观察两支试管中溶液的颜色有何不同?4. 铜在叶绿素分子中的替代作用取上述色素丙酮提取液少许于试管屮,1滴1滴加入浓盐酸,直至溶液出现褐绿色,此时叶绿素分子 已遭破坏,形成去镁叶绿素。然后加酷酸铜品体1小块,慢慢加热溶液,则乂产生鲜亮的绿色。此即表明 铜已在叶绿素分了中替代了原來镁的位置。5.
10、黄色素和绿色素的分离取上述色素丙酮提取液10ml,加到盛有20ml乙瞇的分液漏斗中,摇动分液漏斗,并沿漏斗边缘加入 30ml蒸饰水,轻轻摇动分液漏斗,静宜片刻,溶液即分为两层。色索已全部转入上层乙讎屮,弃去下层丙 酮和水,再用蒸憎水冲洗乙醯溶液1一2次。然后于色素乙瞇溶液中加入5ml 30%k0h甲醇溶液,用力摇动 分液漏斗,静置约10分钟,再加蒸憎水约10ml,摇动后静置分离,则得到黄色素层和绿色素层,分别保 存于试管中。6. 用分光光度计观察、记录如下溶液的投射比(即不能吸收而透过的光量)并解释、分析你观察的 现彖:(1) 色素丙酮提取液(2) 黄色素乙瞇溶液(3) 皂化叶绿素甲醉溶液(4
11、) 被光破坏的色素丙酮溶液(5) 被铜取代了镁的色素溶液。七、实验作业:分析实验数据及结果实验三 螯虾的外形观察和内部解剖一、实验目的:通过对螯虾的外形和内部结构的观察,了解甲壳纲动物在形态结构上的主要特征。二、实验内容:螯虾的外形和内部结构的观察。三、实验材料、药品及用具:螯虾,显微镜,解剖镜,解剖盘,解剖器具。四、实验内容和方法(一) 外形:身体分头胸部和腹部,体表被以坚硕的儿丁质外骨骼。将标本放在解剖盘中,按下列顺 序观察。1头胸部:由头部与胸部愈合而成,外被头胸卬,头胸卬前部中央冇一侧扁的额剑,上缘冇齿79个, 下缘有齿35个。额剑两侧各有一可口由转动眼柄,其上着生复眼。2腹部:长而侧
12、扁。各节的外骨骼可分为背而的背板,腹而的腹板和两侧下垂的侧板。观察体节间如 何连接?这种连接对其运动有何作用?尾节扁平,腹面正小有丿jt门。3附肢:除第一体节和尾节无附肢外,螯虾共有19对附肢,即每体节1对,除第一对触角是单枝型外, 其余都是双枝型。但随着生位置和作用不同而有不同的形态结构。(1) 头部附肢:共5对。从上往下依次为小触角1对,人触鞭1对,人频1对,小频2对。(2) 胸部附肢:共8对,依次为瓠足3对,步足5对,步足细小,而3对末端钳状,第三对最长, 其余末端爪状。试分圻步足的作用。雄虾第五对步足基部内侧各有一雄孔,雌虾第三对步足内侧各有一雌 孔。各足基部有生有羽状鲤,注意其着生位
13、置。(3) 腹部附肢:共5对。雄性笫一腹肢的内肢变成交接器。第二腹肢内肢内侧具一小型雄性附肢。(4) 尾肢1对,与尾节构成尾扇,有何作用?(二) 内部结构:1呼吸器官:用剪刀剪去其右侧餾盖,即可见鲤,观察其足鲍、关节鲤和肢鲤。分析其作用有何不同? 数bl如何?然后仔细移去头胸甲,背板,观察肌肉附着于外骨骼内的情况。2肌肉:为成束横纹肌,往往成对。比较与其它无脊椎动物肌肉的差异。3. 循坏系统:为开管式,观察心脏与血管。(1) 心脏:位于头胸部后端背侧的围心窦内,半透明、多角形肌肉愛。在其背面,前侧面和腹面各 有一对心孔。(2) 动脉:细而透明。由心脏前行的动脉5条,即1条眼动脉,1对触角动脉,
14、1对肝动脉。山心脏 后端发出1条腹上动脉。在胸腹交接处,腹上动脉基部,发岀一条弯向胸部腹面的胸直动脉。4. 生殖系统:雌雄界体,摘除心脏即可见生殖腺。(1) 雄性:粕巢1对,位于围心窦腹而。口色,呈三叶状,両部分离为二叶,后部合并为叶。每 侧精巢发出1条细长的输精管,末端开口于第五对步足基部内侧的雄性牛殖孔。(2) 雌性:卵巢1对,位于围心窦腹面,性成熟时为淡红色或淡绿色,浸制标木呈褐色。颗粒状, 也分三叶,其大小随发育时期不同而冇很大差别。卵巢向两侧腹面发出一对短小的输卵管,其末端开口于 第三对步足基部內侧的雌性生殖孔。在第四、五对步足间的腹甲上,有一椭圆形突起,中有一纵行开口, 内为受梢囊
15、。5. 消化系统:生殖腺下方左右两侧各有一团淡黄色腺体,为肝脏,剪去一侧肝脏,可见肠管前接囊状 的胃。胃分为体前的壁薄的贲门胃和其后较小、壁略厚的幽门胃。剪开胃壁,观察贲门胃内胃燃及幽门胃 内刚毛状结构着生悄况,冇何功能?用银了轻轻提起胃,可见贲门胃前腹方连冇一短管,即食管,食管前 端连于由口器包围的口腔。幽门胃后接中肠。中肠很短,一对肝脏位于其两侧,各以一肝管与z相通。中 肠后即为贯穿整个腹部的后肠,以肛门开口于尾节腹而。6. 排泄系统:剪去胃和肝脏,在头部腹而大触角基部外骨骼内方,对见一团扁圆形腺体即触角腺,为 成虾排泄器官。牛活时绿色,乂叫绿腺,浸制标木常为乳口色,它借宽大而壁薄的膀脱伸
16、出的短管,开口 于人触角基部腹面的排泄孔。7. 神经系统:除保留食管外,将其他内脏器官和肌肉全部除去,小心沿中线剪开胸部底壁,便可见体 腹面正中线处冇一条白色索状物,邵为其腹神经索二,由两条神经干愈合而成。五、作业:绘虾的螯足图,注名各节名称。实验四血液的综合实验一、基础知识:人体红细胞中有凝集原,血清屮有凝集素,相同血型的凝集原和凝集素不能凝集,而 不同血型的凝集原和凝集素能凝集,从而使红细胞凝集沉淀;根据含有的凝集原和凝集索的不同将血液分 成4中类型:有a凝集原、抗a凝集素的a型血、有b凝集原、抗b凝集素的a型血、有a、b凝集原、 无凝集素的ab型血、无凝集原和有抗a、抗b凝集索的0型血;
17、将标准抗a血清和标准抗血清与未知血 型的血液混合,只在前者中凝集的是a型,只在后者小凝集的是b型,在两者小都凝集的是ab型,在两 者中都不凝集的是0型。人的白细胞冇5种:颗粒型的中性粒细胞(占白细胞总数的50 70%),嗜酸性粒细胞(山白细胞总数 的8%左右),嗜碱性粒细胞(占白细胞总数的1%以下),非颗粒型的大单核细胞(占白细胞总数的7%左右) 和淋巴细胞(占口细胞总数的20%左右)。二、实验目的:了解血涂片的制作方法,了解红、口细胞形态、功能,了解出血时间和凝血时间的测 定方法,掌握abo血型的测定原理及方法。三、实验器材、药品、材料:显微镜、采血针、小试管、吸水纸、洁净载片、双凹玻片、牙签、消毒棉签、标准血清a和b、生理 盐水、75%酒粕、消毒棉球、蒸係水、瑞氏染液。四、实验内容和方法:(-)人血涂片的制作及观察川75%酒精棉球消毒左手无名指指端侧面,待酒精挥发后川消毒的采取针刺破皮狀,深约2 3mm,使血 能口然流出。滴一滴血于干净载片上,用另一边缘光滑的载片一侧在血
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