生物分离工程完整版

1、一、选择题:1、生物分离过程的一般步骤包括d。a、预处理和固液分离b、初步纯化c、高度纯化和成詁加工d、a, b和c2、生物悬浮液常用的预处理方法有：doa、加热法b、调节悬浮液的ph值的大小c、凝聚和絮凝d、a, b和c3、冇机溶液沉淀是利用亲水性的有机溶剂a,从而降低溶质的溶解度来实现的。a、降低水的活度b、降低溶质的浓度c、增加水化层厚度d、提高介质的介电 常数5、 反胶团萃取是利川两性表面活性剂在b冇机溶剂中亲c性基团自发向 内形成反微团的的原理而实现的。a、极性b、水c、非极性d、脂6、双水相萃収是利用b的原理。a、物质在互不相溶的两相间的分配系数的差界b、物质在互不相溶的两水相间的

2、 分配系数的差界c、物质在互不相溶的两相间的溶解度的差异 d、物质在互不相溶的 两水相间的溶解度的旁异7、反渗透膜分离的原理是boa、利用反渗透膜，使溶液中的水能通过而使溶质浓缩的过程b、利用渗透膜，使溶 液屮的水能通过而使溶质浓缩的过程c、利用渗透膜，使溶液屮的溶质能通过而水分了 被截留的过程d、利川反渗透膜，使溶液中的溶质能通过而水分了被截留的过程8、电泳分离是利用物质的_b_差异进行分离的方法。a、在力场中沉降速度b、在电场屮泳动速度c、pl d、相对分子质量9、细胞的化学破碎的推动力为boa、胞内外的蒸汽压差b、胞内外的渗透丿弋差c、机械力d、浓度差二、填空题1、高效液相色谱分离方法中

3、，液-液色谱是以_液体作为流动相；以 固定在固2、完桀的萃取操作过程一共分三个步骤，分别为一萃取,洗涤和反萃取°3、离子交换树脂的组成：载体，活性基i才i和可交换离子。4、根据分离机理的不同，色谱法可分为吸附色谱，石色谱，肉子交换色谱，凝胶色 谱 c 5、双相电泳中，第一相是 等电凝胶；第二相是 凝胶电泳 。6、物料中所含水分可分为 化学结合水，物理结合水，机械结合水三种;7、电泳用凝胶制备时，过硫酸彼的作用是；甲义双丙烯酰胺的作用是 ； temed的作用是o9、简单地说，离子交换过程实际上只有外部扩散，内部扩散，化学交换反应三个步骤。10、电泳过程中，加入淚酚兰的冃的是一指示蛋口的

4、迁移位置 。11、吸附剂按孔道结构区分_ 多孔型介质和凝胶介质。12、常用的工业起晶方法：自然起晶法、刺激起晶、晶种起晶法三、名词解释题凝聚：添加盐类破坏细胞双电层，导致细胞聚集絮凝：添加絮凝剂在细胞间形成桥架作用。超临界流体萃取：当一种流体处于其临界点的温度和压力z下，则称z为超临界流体。使用 超临界流体作为萃取剂的萃取方法。膜分离：利用具有一定选择性透过特性的过滤介质进行物质的分离纯化。包含体：外源基因在基因工程菌中高水平表达时，通常会形成不溶性、无活性的蛋白聚集体。 凝胶过滤色谱（gle filtration chromatography）:利川凝胶粒子作为固定相是根据料液屮 溶质相对分

5、了质蜃的差别进行分离的液相色谱法四、简答题1、请结合图示简述凝胶排阻色谱（分子筛）的分离原理。f10w-snial proteins cen enter beacfe and ve retirdedcolumnpoacdandc gd bc«(bi arge pr(h<in< arc ex eluded from the be.、and pz tlvuiimh liic wbnm find答：凝胶排阻色谱的分离介质（填料）具有均匀的网格结构，其分离原理是具有不同分子量的溶质分子，在流经柱床是，由于人分子难以进入凝胶内部，而从凝胶颗粒之间流出，保胡时 间愆：而小分子溶质可以

6、进入凝胶内部，由于凝胶多孔结构的 阻滞作用，流经体积变大，保留吋间延长。这样，分子量不同 的溶质分子得以分离。2、绘制结晶过程屮饱和i1u线和过饱和1111线图，并简述其意义。结品过程屮的饱和温度曲线和不饱和温度曲线的简图如下图所示:s-s 1111线为饱和温度曲线，在其下方为稳定 区，在该区域溶液为不饱和溶液，不会自发结 晶；t-t曲线为过饱和温度曲线，在其上方为不 稳定区，能够自发形成结晶；温度3、何谓亲和吸附，有何特点?图1011饱和曲线与过饱和曲线s-s 1111线和t-t曲线之间为亚稳区，在该区 域，溶液为过饱和溶液，但若无晶种存在，也 不能自发形成晶体。答：亲和吸附是吸附单元操作的

7、一种，它是利用亲和吸附剂与目标物之间的特殊的化学作用实现的高效分离手段。亲和吸附剂的组成包括：惰性载体、手愕链、特界性亲和配 基。亲和吸附的特点是高效、简便、适用范围广、分离速度快、条件温和，但载体制备 难度人，通用性差，成本较高。4、蛋口质盐析的两种方法和适用的范围，以及影响盐析的因素ks盐析法：一定的ph和温度下通过改变盐离了浓度进行盐析，此时b影响较小， 此法由于蛋白质对离子强度的变化非常敏感，易产生共沉淀现象，沉淀的分辨率低，故常用 于提収液的前处理。b盐析法：一定的盐离子浓度下改变ph和温度进行盐析，b影响鮫大，用于后期， 分辨率高。影响盐析的因素无机盐的种类和浓度：影响ks值。温度

8、与ph值:影响p值。5、萃取操作中的乳化现象概念、产生原因以及乳化对分离的影响乳化即水或有机溶剂以微小液滴形式分散丁有机相或水相中的现彖。产生乳化的主要原因是发酵液中存在的蛋口质相固体颗粒等物质,这些物质具有表而活 性剂的作用，使有机溶剂（油）和水的表而张力降低 油或水易于以微小液滴的形式分散于水 相或油相中。产生乳化后使有机相和水相分层困难，出现两种夹带：发酵废液（萃余液）屮夹带何机溶剂（举取液）微滴，使fi标产物受到损失；有机溶剂（萊取相）中夹帯发酵液（萃余液）， 给后处理操作带来闲难。五、讨论题1请说明在进行sds page电泳z前，样品的处理方法，并解禅其原因；并结合sdspage电泳的分离原理说明未知蛋口质分子量的测定方法。答：sds是一种阴离了去污剂，作为变性剂和助溶性试剂，能断裂分子内和分 子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二级、三级结构；而强还 原剂，如二硫苏糖醇、b-疏基乙醇能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。因此，在样品和凝胶中加入sds和还原剂后，蛋口质分子被解聚为纽成 它们的多肽链，解聚示的氨基酸侧链与sds结合示，形成带负电的蛋白 质-sds胶束，所带电荷远远超过了蛋口质原有的电荷量，消除了不同分 子间的电荷差杲；同时，蛋白质-sds聚合体的形状也基本相同，这就消 除了在电泳过程中分子形状对迁移率的影响。