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文档简介
1、骨髓骨髓间充质干细胞间充质干细胞一BMSCs概念二BMSCs微观结构三BMSCs分离、培养、鉴别2021-11-23一五四 BMSCs分化BMSCs运用2021-11-232021-11-232021-11-23骨骨髓髓黄骨髓黄骨髓红骨髓红骨髓血窦血窦造血组织造血组织造血干细胞造血干细胞骨基质细胞(骨基质细胞(间充质干细胞间充质干细胞)骨髓间充质干细胞骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal (bone mesenchymal stem cellsstem cells,BMSCs) BMSCs) 是在骨髓中发现是在骨髓中发现的一种起源于胚胎中胚层,具有自我的一种起源于胚胎中胚层,具有
2、自我复制和多向分化潜能的非造血干细胞复制和多向分化潜能的非造血干细胞。BMSCs对骨髓造血干细胞起支持、诱导作用。2021-11-23骨髓间充质干细胞的基本概念是上世骨髓间充质干细胞的基本概念是上世纪纪7070年代,年代,FriedensteinFriedenstein等在做全骨等在做全骨髓培养时报道了骨髓中有骨髓多能基髓培养时报道了骨髓中有骨髓多能基质干细胞。质干细胞。由于呈成纤维细胞样外观也被称为集由于呈成纤维细胞样外观也被称为集落形成单位成纤维细胞落形成单位成纤维细胞(clony (clony forming units fibroblastsforming units fibrobla
3、sts,CFU-F)CFU-F)或骨髓基质细胞或骨髓基质细胞(bone mesenchymal (bone mesenchymal stem cells BMSCs)stem cells BMSCs)。2021-11-23BMSCsBMSCs有粗细不均的胞质突起有粗细不均的胞质突起, ,透射电透射电镜下胞质中有丰富的细胞器镜下胞质中有丰富的细胞器, ,如核糖体、如核糖体、粗面内质网、分泌小泡、线粒体等,粗面内质网、分泌小泡、线粒体等,细胞表面可见微绒毛突起细胞表面可见微绒毛突起, ,表明该细胞表明该细胞具有较强的蛋白质合成能力具有较强的蛋白质合成能力, ,是其能够是其能够分泌许多生长因子,维持
4、自身生长分分泌许多生长因子,维持自身生长分化,支持造血干细胞造血的结构基础。化,支持造血干细胞造血的结构基础。2021-11-23相邻细胞间还可见到一些细胞膜局部相邻细胞间还可见到一些细胞膜局部电子密度增高、细胞膜内颗粒相互融电子密度增高、细胞膜内颗粒相互融合的缝隙连接。缝隙连接可加强相邻合的缝隙连接。缝隙连接可加强相邻细胞的连接细胞的连接, ,但更重要的是细胞的一种但更重要的是细胞的一种通讯结构通讯结构, ,有利于细胞间信息传递,与有利于细胞间信息传递,与细胞分泌、增殖、分化相关。细胞分泌、增殖、分化相关。2021-11-23目前用于分离目前用于分离BMSCsBMSCs的方法主要有密度的方法
5、主要有密度梯度离心法、贴壁筛选法、流式细胞梯度离心法、贴壁筛选法、流式细胞仪分离法和磁珠分选法。仪分离法和磁珠分选法。流式细胞仪和磁珠分选法虽然可获得流式细胞仪和磁珠分选法虽然可获得较纯的细胞,但是费用昂贵、操作复较纯的细胞,但是费用昂贵、操作复杂、不适合临床应用。杂、不适合临床应用。2021-11-23BMSCsBMSCs的培养方法有二维培养(极低密的培养方法有二维培养(极低密度传代培养,低氧张力下培养度传代培养,低氧张力下培养) ) 、三维培养、静止性细胞培养、三维培养、静止性细胞培养、 动力性动力性细胞培养等。细胞培养等。2021-11-23BMSCsBMSCs没有特异性的抗原表型,对没
6、有特异性的抗原表型,对其鉴定还没有直接的方法。其鉴定还没有直接的方法。2021-11-23对对BMSCsBMSCs进行进行传代培养时可传传代培养时可传2525代,扩代,扩增增5050倍以上。倍以上。 对细胞周期研究发现,对细胞周期研究发现,绝大部分细胞处于绝大部分细胞处于GOGOG1G1期。这提示期。这提示其有高分化能力其有高分化能力。骨髓中所含的少量多能骨髓中所含的少量多能MSCsMSCs是多种细是多种细胞的前体细胞。其在不同的诱导条件胞的前体细胞。其在不同的诱导条件下下, , 能向成骨细胞、成软骨细胞、成能向成骨细胞、成软骨细胞、成纤维细胞、脂肪细胞等中胚层组织细纤维细胞、脂肪细胞等中胚层组织细胞分化。胞分化。2021-11-232021-11-23随着细胞学和组织工程学的发展,利用BMSCs的多向分化性及其可在体外表达多种外
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