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文档简介

1、叶绿素含量的测定植物生理学实验报告 实验题目：叶绿素含量的测定姓名 班级 学号 一、 实验原理和目的 根据朗伯比尔定律，某有色溶液的吸光度a与其中溶质浓度c和液层厚度l成正比 。叶绿素(丙酮)在652nm(混合）、663nm、645nm有最大吸收峰。叶绿素(95%乙醇)在665nm、649nm，类胡萝卜素在470nm有最大吸收峰，根据在分光光度计下测定的吸光度，求得叶绿素的含量二、 实验器具和步骤 植物材料： 女贞实验器具： 分光光度计；电子天平； 研钵； 试管； 小漏斗；滤纸； 吸水纸； 移液管 ；量筒； 剪刀试剂： 95乙醇（或80丙酮）；石英砂；碳酸钙粉步骤：1.称取剪碎的新鲜样品 左右

2、，放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及35ml 95乙醇，研成均浆，继续研磨至组织变白。静置35min2. 取滤纸1张，置漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，过滤到10ml试管中，用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。 3.用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入漏斗中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至10 ml ，摇匀4. 把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95乙醇为空白，在波长665nm、649nm、470nm下测定吸光度5. 计算公式： 叶绿素的含量（mg/g）= (浓度×提取液体积×稀释倍数）/样品鲜重。 ca=；cb= c类= 单位：mg/l 三、 实验数据和作业2、计算叶绿素含量 计算公式： 叶绿素的含量（mg/g）= (浓度×提取液体积×稀释倍数）/样品鲜重。ca=；cb= c类= 单位：mg/l由上面的公式进行代入计算，有： ca=* cb=* c类=（1000*）/245=则：叶绿素含量=（*10*1）/=四、 数据分析实验中可能清洗研钵和滤纸不是特别干净可能造成误差五、 思考题 为什么提取叶绿素时干材料一定要用 80的丙酮，而新鲜的材料可以用无水丙酮提取？ 答：因为叶绿素存在于叶绿体内囊体上与其上

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