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1、第九章第九章 种子健康检验种子健康检验张园莉 郑军丽 张瑞珍 姚天茏 庄泽龙主讲:张 丽第九章第九章 种子健康检验种子健康检验第九章第九章 种子健康检验种子健康检验第九章第九章 种子健康检验种子健康检验第九章第九章 种子健康检验种子健康检验由于种子带病的类型和病原物的不同,其病害检验的方由于种子带病的类型和病原物的不同,其病害检验的方法也不相同主要有以下几种:法也不相同主要有以下几种:第三节第三节 种子病原物的检验方法种子病原物的检验方法 一、一、肉眼检验肉眼检验 1. 1. 适用范围适用范围 二二、过筛检验过筛检验 1. 1.适用范围适用范围 三、洗涤检验三、洗涤检验 四、漏斗分离检验四、漏
2、斗分离检验 1. 1.适用范围适用范围 检验种子外部所携带的检验种子外部所携带的线虫线虫。 检验原理检验原理: 种传线虫在水中和有空种传线虫在水中和有空气的条件下会活化,具有气的条件下会活化,具有趋趋水性和向地性水性和向地性,钻出种子游,钻出种子游进水中,用显微镜检查水中进水中,用显微镜检查水中的线虫。的线虫。 2. 2.检验方法检验方法u将种子用将种子用2 2层纱布包好,放入备层纱布包好,放入备好的漏斗内,漏斗需好的漏斗内,漏斗需10 10 15cm15cm口径,下口接约口径,下口接约10 cm10 cm长的橡皮长的橡皮管一根,用弹簧夹夹住;管一根,用弹簧夹夹住;u加水使种子浸没,放在加水使
3、种子浸没,放在20 20 2525的环境中浸的环境中浸101024h24h;u用离心管接取浸出液,再放在用离心管接取浸出液,再放在2000r/min2000r/min的离心机中离心的离心机中离心5min,5min,取下部沉淀液置于载玻片上检取下部沉淀液置于载玻片上检查线虫。查线虫。 五五、萌芽实验萌芽实验 1. 1.适用范围适用范围 种子携带的病菌,无论是在种子表面,种子携带的病菌,无论是在种子表面,还是潜伏在种子内部,还是潜伏在种子内部,只要在种子萌发阶段只要在种子萌发阶段开始为害或长出病菌的,都可用此种方法进开始为害或长出病菌的,都可用此种方法进行检验行检验 。 2. 2.检验方法检验方法
4、 1)吸水纸法)吸水纸法 2)砂床法)砂床法 六、分离培养检验六、分离培养检验1. 1.适用范围适用范围 主要用于主要用于发育较慢发育较慢的致病真菌、潜伏的致病真菌、潜伏在种子内部的、表面的病原菌,也可用来在种子内部的、表面的病原菌,也可用来确定病菌潜伏的部位。确定病菌潜伏的部位。2. 2.检验方法检验方法1 1)数取试样)数取试样400400粒;粒;2 2)预处理预处理: : 检验种子内部的病原菌时,可用检验种子内部的病原菌时,可用乙醇、乙醇、0.1%0.1%的升汞,或的升汞,或0.1%0.1%的次氯酸钠作的次氯酸钠作表面消毒后,用无菌水洗涤;表面消毒后,用无菌水洗涤;3 3)培养培养: :
5、 每个培养皿播每个培养皿播1010粒种子于培养皿表粒种子于培养皿表面,面,20 20 22 22 黑暗条件下培养黑暗条件下培养5 5 7d7d检检查;查; 马铃薯葡萄糖琼脂培养基常用于培养真马铃薯葡萄糖琼脂培养基常用于培养真菌,牛肉汁培养基常用于培养细菌。菌,牛肉汁培养基常用于培养细菌。 七、噬菌体检验七、噬菌体检验 1. 1.适用范围适用范围 所以所以 2. 2.检验方法检验方法称一定重量的种子,根据称一定重量的种子,根据其传播方式,取其带病的部位进行,加入其传播方式,取其带病的部位进行,加入一定量的灭菌水,浸泡一定量的灭菌水,浸泡 0.5 0.5 1h1h,并不断,并不断搅拌,滤纸过滤,取
6、滤液搅拌,滤纸过滤,取滤液 1ml 31ml 3个重复,个重复,分别放入分别放入3 3个培养皿中个培养皿中;加入加入1ml指示菌液(大于指示菌液(大于9亿个菌亿个菌/ml)混匀,混匀,3 5min后加入后加入10ml溶化并冷溶化并冷却至却至45 50 的固体平板培养基,放入的固体平板培养基,放入25 28 的恒温箱中培养的恒温箱中培养10 12h,观察观察噬菌斑数。噬菌斑数。 八、接种指示植物法八、接种指示植物法 利用喷雾接种、针刺接种,汁液摩擦接利用喷雾接种、针刺接种,汁液摩擦接种等适宜的方法接种到指示植物(寄主)。种等适宜的方法接种到指示植物(寄主)。九、血清学检验九、血清学检验 采用特制的抗血清,利用血清学反应采用特制的抗血清,利用血清学反应检查细菌、病毒、类菌原体的一类方法。检查细菌、病毒、类菌原体的一类方法。十、隔十、隔离种植检离种植检验验u有些有些种子所种子所带的带的病病害或害或杂草,杂草,有时有时不易发不易发现症状或病原物,需要在生长发育阶段进行现症状或病原物,
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