高中生物选修1《生物技术实践》复习知识梳理

1、专题1 传统发酵技术的应用课题1 果酒和果醋和制作一、基础知识（一）果酒制作的原理1菌种主要是 ，属于 生物，新陈代谢类型 ， 有氧时，进行 ，大量繁殖，反应式为： 无氧时，能进行 发酵，反应式为： 。2酵母菌繁殖的最适温度20左右，酒精发酵一般控制在 。3自然发酵过程中，起作用的主要是 。也可以在果汁中 加入人工培养的酵母菌。（二）果醋制作的原理1菌种主要是 ，属于 生物，新陈代谢类型为 。只有在 氧气充足时，才能进行旺盛的生命活动。变酸的酒表面观察到的菌膜就是 在 液面大量繁殖形成的。2 当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的 分解成 ，当缺少糖源时，醋 酸菌将 变为 ，再变为 ，反应简

2、式为 。3醋酸菌的最适合生长温度为 。4菌种来源：到生产食醋的工厂或菌种保藏中心购买，或从食醋中分离醋酸菌。二、实验设计1、流程图挑选葡萄 冲洗 榨汁 发酵 发酵 2、制作实例实验材料：葡萄、榨汁机、纱布、醋酸菌（或醋曲）、发酵瓶（如右图）、 气泵、体积分数为70%的酒精等。实验步骤1 对发酵瓶、纱布、榨汁机等实验用具进行清洗并消毒。先用温水反复 冲洗几次，再用体积分数为 的酒精擦拭消毒，晾干待用。2取葡萄500g，去除枝梗和腐烂的子粒。3用清水冲洗葡萄12遍除去污物。（注意不要反复多次冲洗，原因是 ）4用榨汁机榨取葡萄汁后，将其装入发酵瓶中。（如果没有合适的发酵 装置，可用500mL的塑料瓶

3、替代。但注入的果汁量不要超过塑料瓶总体积的 ，留 有 的空间，目的是 。）5将发酵瓶置于适宜的温度（ ）下发酵。6由于发酵旺盛期CO2的产量非常多，因此需要及时排气，以防止发酵瓶爆裂。（如果 是简易发酵装置，每天 瓶盖24次，进行排气。这样做的目的是 。）710天后，取样检验。例如，可以检验 、 的含量、进行酵母菌的镜检等工作。8 当果酒制成以后，可在发酵液中加入醋酸菌（或醋曲），然后移至 条件 下发酵，适时用气泵向发酵液中 。（如果没有充气装置，可以将瓶盖 打开，在瓶口上盖上纱布。）三、操作提示（一）材料的选择与处理选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行 ，然后 。（二）防止发酵液被污染1、榨汁

4、机要清洗干净，并晾干。 2、发酵瓶要清洗干净，用体积分数 的酒 精消毒。3、装入葡萄汁后，封闭充气口。4、果汁发酵后是否有酒精产生，可以用 来检验。在 条件下，重铬 酸钾与酒精反应呈现 。请分析此装置中的充气口、排气口和出料口分别有哪些作用。为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接？结合果酒、果醋的制作原理，你认为应该如何使用这个发酵装置？答：充气口是在 发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出 的；出料口是用来取样的（可根据所取样液的 来判断取样的先后顺序）。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是 。使用该装置制酒时，应该 充气口；制醋时，应将充气口连接气

5、泵，输入 。课题2 腐乳的制作一、基础知识腐乳制作的原理1 腐乳的发酵有多种微生物的协同作用，其中起主要作用的是 ，它是一种 生物，新陈代谢类型是 。2 等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的 分解成小分子的 和 ； 脂肪酶可以将 水解成 和 。3 现代的腐乳生产是在严格的 条件下，将优良 菌种直接接种在豆腐上， 这样可以避免其他菌种的污染，保证产品的质量。二、实验设计1、实验流程让豆腐 加 腌制加 装瓶 腌制。2、制作实例实验材料：含水量 的豆腐，粽叶，盘子，盐，黄酒，米酒，糖，香辛料等，广口玻璃瓶，高压锅等。实验步骤1将豆腐切成3cm×3cm×1cm若干块。2将豆腐块平放在

6、铺有干粽叶的盘内（粽叶可以提供菌种，并能起到保温的作用），每块豆腐等距离排放，周围留一定的空隙。豆腐上面再铺上干净的粽叶。气候干燥时，将平盘用保鲜膜包裹，但不要封严，以免湿度太高，不利于毛霉的生长。3将平盘放在温度为 的地方，毛霉逐渐生长，大约5d后，豆腐表面丛生直立菌丝。4当毛霉生长旺盛，并呈淡黄色时，去除保鲜膜及铺在上面的粽叶，使豆腐块的热量和水分能够迅速散失，同时散去霉味，这一过程一般持续36h以上。5豆腐凉透后，将豆腐间的连在一起的菌丝拉断，并整齐排在容器内，准备腌制。6长满毛霉的豆腐块（以下称毛坯）分层摆放，分层加盐，并随层高而 ，在接近瓶口表面盐要铺 一些，以 ，约腌制8d。（豆腐

7、与盐质量分数比为51）7将黄酒、米酒和糖、香辛料等混合制成卤汤。卤汤酒精含量控制在 左右为宜。8将广口玻璃瓶刷洗干净，用高压锅在1000C蒸汽灭菌30min，将腐乳成坯摆入瓶中，加入卤汤和辅料后，将瓶口用酒精灯加热灭菌，用胶条密封。在常温下，一般六个月即可以成熟。三、操作提示 （一）控制好材料的用量1、用盐腌制时，注意控制盐的用量。盐的浓度过低， ，可能导致豆腐腐败；盐的浓度过高，会 。2、乳汤中酒的含量应控制在 左右。酒精含量过低， ，可能导致豆腐腐败；酒精含量过高，会 。（二）防止杂菌污染1、用来腌制腐乳的玻璃瓶，刷干净后要用沸水消毒。2、装瓶时要迅速小心；加入乳汤后要用胶条将瓶口密封；封

8、瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。四、产物鉴定 可根据 来判断腐乳的品质。 专题二 微生物的实验室培养1、培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。2、培养基按照物理性质可分为液体培养基 半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。3、按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，可重复性好，常用于微生物的分离鉴定。天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，取材

9、方便，常用于实际工业生产。3、按照培养基的用途，可将培养基分为基础培养基、选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。4、培养基的化学成分包括 、 、 、 等。 ·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用 碳源。单质碳不能作为碳源。 ·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源

10、）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用 。 ·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加 ，培养霉菌时须将培养基的pH调至 性，培养细菌是需要将pH调至 性；培养厌氧型微生物是则需要提供 的条件。5、无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行 。将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行 。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 附近进行。实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。无菌

11、技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？答：无菌技术还能有效避免 。6、消毒与灭菌的区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌方法有 。 灭菌方法：接种环、接种针、试管口等使用 ；玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用灭菌方法是 ； 培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用灭菌方法是 。表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线

12、灭菌法，所用器械是紫外灯 。比较项理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分生活状态的微生物不能灭菌强烈全部微生物能7、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）方法步骤：配制培养液（计算、 、溶化）、调节 、（分装、包扎）、 、 搁置斜面或 。（2）倒平板操作的步骤： 将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出 棉塞。 右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。 用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培 养基（约1020mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。 等待平板冷却凝固，大约需510min。然后，将平板倒过来放置

13、，使培养皿盖在 下、皿底在上。·倒平板操作的讨论 1.培养基灭菌后，需要冷却到 左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分 ，又可以防止 。4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。8、分离纯化大肠杆菌（1）微生物分离的方法最常用的是 和

14、。（2）平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。将聚集的菌种逐 步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来 的肉眼可见的子细胞群体，这就是 。（3） 稀释涂布平板法是将菌液进行 ，然后将不同稀释度的菌液分 别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两 步。（4） 用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成单个 细胞，从而能在培养基表面形成 ，以便于分离纯化菌种。（5）平板划线法操作步骤：将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞。将试管口通过火焰。将 的接种环伸入菌

15、液中蘸取一环菌液。将试管通过火焰，并塞上棉塞。左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条 平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养皿。 接种环，待其 后，从第一区域划线的 开始往第二区域内划 线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线 。将平板 放入培养箱中培养。·平板划线操作的讨论1. 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线

16、时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。（6）涂布平板操作的步骤：将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。取少量菌液，滴加到培养基表面

17、。将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却810s。 用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布平板操作的讨论涂布平板的所有操作都应在 附近进行。9、菌种的保存（1）对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。 临时保藏方法 将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养。当菌落长成 后，将试管放入4的冰箱中保藏。以后每36个月，都要重新将菌种从旧的培 养基上转移到新鲜的培养基上。 缺点：这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。（2）对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。 在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘油后灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘

18、油充分混匀后，放在20的冷冻箱中保存。10、确定培养基制作是否合格的方法 将未接种的培养基在恒温箱中保温12天（对照），无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。专题4 酶的研究与应用课题1 探讨加酶洗衣粉的洗涤效果一、基础知识1加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类： 、 、 和 。其中，应用最广泛、效果最明显的是 和 。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的 或小分子的 ，使污迹从衣物上脱落。同样道理，其他酶也是将大分子物质分解为小分子物质，从而使洗衣粉具有更好的去污能力。2、使用加酶洗衣粉时，影响酶活性的因素有 、 、 等，为此，科学家

19、通过 生产出了特殊的酶，并制成酶制剂，解决了这个问题。3、加酶洗衣粉可以降低 和 的用量，使洗涤剂朝 的方向发展，减少对环境的污染。二、实验设计项目实验探究加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果探究温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响探究不同类型加酶洗衣粉洗涤效果的影响自变量自变量处理因变量因变量观察指标无关变量无关变量的控制实验结果实验结论课题2 酵母细胞的固定化课题背景1、 问题：酶对环境条件敏感，易失活；溶液中的酶很难回收，不能再次利用，提高了生 产成本；反应后的酶会混合在产物中，如不除去，会影响产品质量。设想：将酶固定在 上。优点：使酶既能与反应物 ，又能与产物 ，同时，固定在载体上的酶还可 以

20、。2、 问题：一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都是通过 一系列的酶促反应才能得到的。设想：将合成酶的 直接固定。优点：成本 ，操作 。一、基础知识固定化技术1、固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括 、 和 。2、一般来说，酶更适合采用 和 固定，而细胞多采用 固定化。这是因为细胞体积比酶分子的体积大；体积大的细胞难以被 或 ，而个小的酶容易从包埋材料中 。3、包埋法法固定化细胞，即将微生物细胞均匀地包埋在 的载体中。常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。4、从操作的角度考虑，固定化酶和固定化细胞两种技术

21、中，更为容易的是 ，对酶活性影响更小的是 。固定化细胞固定的是 （一种或一系列）酶。如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应，应选择 技术。如果反应物是大分子，应该采用 技术。二、实验操作（一）制备固定化酵母细胞1酵母细胞的活化活化就是处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态，活化剂是 。2配制物质的量的浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液3配制海藻酸钠溶液加热溶化海藻酸钠时要注意 加热，重复几次，并不断 ，直到海藻酸钠熔化为止。如果加热太快，海藻酸钠会发生 。4海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合 将海藻酸钠溶液 ，加入 的海藻酸钠溶液，进行充分搅拌，使其混合均匀，在转移至注射器中。5固定化酵

22、母细胞以 的速度 地将注射器中的溶液 到刚配制好的CaCl2溶液中，并浸泡30min（时间）左右。（二）用固定化酵母细胞发酵1将固定好的酵母细胞（凝胶珠）用 冲洗2-3次（目的是 ）。2将10%葡萄糖溶液转移至锥形瓶中，加入固定好的酵母细胞，置于 下发酵24h（时间）。三、结果分析与评价（一）观察凝胶珠的颜色和形状如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠浓度浓度 ，该种凝胶珠包埋的酵母细胞数目 ，影响实验效果；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠浓度浓度 ，制作失败，需要再作尝试。（二）观察发酵的葡萄糖溶液利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味

23、。四、课题延伸工业生产中，细胞的固定化技术是在严格的 条件下进行的。类型优点不足直接使用酶催化效率高，低耗能、低污染等。对环境条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量。固定化酶酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用。一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。固定化细胞成本低，操作更容易。固定后的酶或细胞与反应物不容易接近，可能导致反应效果下降等。专题5 DNA的粗提取与鉴定一、基础知识（一）提取DNA的方法提取生物大分子的基本思路是选用

24、一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。（1）DNA的溶解性：l DNA和蛋白质等其他成分在 中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（请画出DNA的溶解度与NaCl溶液浓度的关系曲线图）l 此外，DNA 酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。（2）DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解 ，但是对DNA 影响。大多数蛋白质不能忍受

25、oC的高温，而DNA在 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 ，但对DNA 影响。（二）DNA的鉴定在 条件下，DNA遇 会被染成 色，因此 可以作为鉴定DNA的试剂。二、实验设计（一）实验材料的选取 凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的 ，同时用玻璃棒 ，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用 。例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的 和 ，进行充分的 ，过滤后收集研磨液。（三）去除滤液中的杂质 方案一 利用DNA在不

26、同浓度的NaCl溶液中 的不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。方案二 直接在滤液中加入嫩肉粉，反应1015min，嫩肉粉中的 能够分解蛋白质。方案三 将滤液放在 的恒温水浴箱保温1015min，注意严格控制温度范围。（四）DNA的析出与鉴定 1、将处理后的溶液过滤，加入与滤液 ，静置23min，溶液中会出现 ，这就是粗提取的DNA。用玻璃棒 搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分。2、取 支20ml的试管，各加入物质的量浓度为 的NaCl溶液5ml，将丝状物放入 试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向 支试管中各加入4ml的 试剂。混合均匀后，将试管置于 中加热5min，待试管冷

27、却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变 。实例：用鸡血细胞液粗提取DNA并鉴定步骤操作图示1、提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液（已在课前配好）510mL，注入到50ml烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20mL，同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌5min，然后，用放有纱布的漏斗将血细胞过滤至1000mL的烧杯中，取其滤液。2、溶解细胞核内的DNA将物质的量浓度为2molL的NaCl溶液40 mL加入到滤液中，并作玻璃棒沿一个方向搅拌1min，使其混合均匀，这时DNA在溶液中呈溶解状态。3、析出含DNA的粘稠物沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向不停地轻轻搅拌

28、，这时烧杯中有丝状物出现。继续加入蒸馏水，溶液中出现的黏稠物会越来越多。当黏稠物不再增加时停止加入蒸馏水。4、滤取含DNA的粘稠物用放多层纱布的漏斗，过滤溶液至1000 mL的烧杯中。取纱布上的黏稠物。5、将DNA的粘稠物再溶解取一个50 mL烧杯，向烧杯内注入物质的量浓度为2molL的NaCl溶液20 mL。用钝头镊子将纱布上的黏稠物夹至NaCl溶液中，用玻璃棒沿一个方向不停地搅拌3min，使黏稠物尽可能多地溶解于溶液中。6、过滤含DNA的氯化钠溶液取一个100 mL烧杯，用放有两层纱布的漏斗过滤以上溶液。取其滤液（DNA溶于滤液中）。7、提取含杂质较少的DNA在上述滤过的溶液中，加入冷却的

29、、体积分数为95的酒精溶液50 mL（加入时动作要慢），并作用玻璃棒沿一个方向搅拌，溶液中会出现含杂质较少的丝状物。当玻璃棒上出现丝状物缠绕时，继续慢慢搅拌，至不再增加时，用玻璃棒将丝状物卷起，并用滤纸吸取上面的水分。8、DNA的鉴定取两支20 mL的试管，各加入物质的量浓度为0.015molL的NaCl溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4 mL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，等试管冷却后，观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化。三、操作提示1、以血液为实验材料时，每100ml血液中需要加入3g ，防止 。2、加入

30、洗涤剂后，动作要 ，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要 ，以免加剧 ，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。3、二苯胺试剂要 ，否则会影响鉴定的效果。（2009江苏）3、下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是 A固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显B固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧C利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件 D利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物（2010江苏）7右图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是A.过程和都只能发生在缺氧条件下B.过程和都只发生在酵母细胞的

31、线粒体中C.过程和都需要氧气的参与D.过程所需的最适温度基本相同（2010江苏）19、根据下列相关实验操作预期结果合理的是 A、实验 B实验 C实验 D实验（2010江苏）25右图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图下列叙述正确的是 A刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵 母菌混合制备混合液 B图1中X溶液为氯化钙溶液，其作用 是使海藻酸钠形成凝胶珠 C图2发酵过程中搅拌的目的是为了使 培养液与酵母菌充分接触 D图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后 再转移到图2装置中（2011年江苏卷）3下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是 A腐乳制作所需要的适宜

32、温度最高 B果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵 C使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 D使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA（11年新课标卷）39.有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：（1） 在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体 培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。 （3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降 解能力 。（4） 通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法

33、有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求试验操作应在酒精灯 附近进 行，以避免周围环境中微生物的污染。（2011年江苏卷）15下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是 A酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶 B透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化 C棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤 D多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层（2012江苏卷）17下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是 A从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小 B作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药 C尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用 D将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，

34、目的是洗去CaCl2和杂菌（2012江苏卷）18下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是 A洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度 B将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝 C常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取 D用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少（2012江苏卷）21下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，合理的是 A在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长 B条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸 C果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小 D将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量（2012海南卷）30.回答下列关于腐乳制作的问题：（

35、1） 腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了该发酵过程，其中起主 要作用的微生物是 ，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为 和 ；其产生的 能将豆腐中的脂肪水解为 和 。（2）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制 生长。（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的防腐作 用外，还能使腐乳具有独特的 。（2012上海卷）9酶在大规模产业化应用中的核心问题是固定化技术，而酶固定化所依据的基本原理在于酶具有 A热稳定性 B催化高效性 C催化特异性 D可反复使用性（2012上海卷）高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀

36、粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图15所示。（1）过程称为_，过程是为了_。来源:中国教育出版网（2）号培养基称为_(按功能分)；该培养基中除了加入淀粉外，还需加入 另一种重要的营养成分_。 A琼脂 B葡萄糖 C硝酸铵 D碳酸氢钠（3）一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了_。在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该酶的最佳温度范围进行测定。图16中的曲线表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，即图16中的曲线。（4） 根据图中的数据，判断该酶使用的最佳温度 范围是_。 A40一

37、50 B50一60 C60一70 D70-80（5）据图判断下列叙述错误的是_。 A该酶只能在最佳温度范围内测出活性 B曲线35数据点是在80时测得的 C曲线表明80是该酶活性最高的温度 D曲线表明该酶的热稳定性在70之后急剧下降来源:中教网（2013江苏卷）4. 某同学用洋葱进行DNA 粗提取和鉴定实验，操作错误的是A. 加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨 B. 用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的 DNAC. 加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌 D. 加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热（2013江苏卷）6. 下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是A. 可用包埋法制备固定化酵母细胞 B. 反应产物对固定

38、化酶的活性没有影响C. 葡萄糖异构酶固定前后专一性不同D. 固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应（2013江苏卷）14. 某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。下列相关叙述正确的是A. 酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度较高B. 先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵C. 与人工接种的发酵相比，自然发酵获得的产品品质更好D. 适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖（2013江苏卷）17.将图中果酒发酵装置改装后用于探究酵母菌呼吸方式的实验，下列相关操作错误的是A.探究有氧条件下酵母菌呼吸方式时打开阀aB.经管口3取样检测酒精和CO2的产生情况C.

39、实验开始前对改装后整个装置进行气密性检查D.改装时将盛有澄清石灰水的试剂瓶与管口2连通（2013江苏卷）18.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是A.培养基分装到培养皿后进行灭菌 B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养 D.培养过程中每隔一周观察一次（2013新课标II卷）39.临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：（1） 为了从样本中获取致病菌单菌落，可用 法或 法将样本接种 于固体培养基表面，经过选择培养

40、、鉴别等步骤获得。（2） 取该单菌落适当稀释，用 法接种于固体培养基表面，在37培养箱中 培养24h，使其均匀生长，布满平板。（3） 为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸 片均匀至于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈， 说明该致病菌对抗生素A ；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明 该致病菌对抗生素B ；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说 明 ；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一 个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的 。（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素 。（