临床检验技师考试辅导(11)

1、第五章诊断酶学考纲要求1. 血清酶 熟练掌握（ 1）分类、生理变异与病理生理机制（ 2）酶活性与酶质量测定方法及其评价（ 3）同工酶及其亚型测定的临床意义2. 常用血清酶及同工酶测定的参考值及临床意义掌握（ 1）肌酸激酶及同工酶和其亚型（ 2）乳酸脱氢酶及同工酶（ 3）氨基转移酶及同工酶（ 4）碱性磷酸酶及同工酶（ 5） - 谷氨酰基转移酶及同工酶（ 6）淀粉酶及同工酶（ 7）酸性磷酸酶及同工酶3. 酶促反应动力学 熟练掌握（ 1）酶促反应（ 2）酶活性浓度测定方法一、血清酶（一）血清酶的分类（二）血清酶生理变异及其病理生理机制（三）酶活性和质量测定方法及其评价（四）酶活力测定的影响因素（五）

2、工具酶（六）标本采集要点及酶活性表示法（七）同工酶和亚型测定的临床意义（一）血清酶的分类：根据酶的来源及其在血清中发挥催化功能的情况，可将血清酶分为两大类。1. 血浆特异酶在血浆中发挥特定催化作用的酶。如凝血酶、纤溶酶、胆碱酯酶（CHE）、脂蛋白脂肪酶、铜氧化酶等。（ 1）大多 在肝内合成 ；（ 2）以 酶原状态分泌入血 ，在一定的条件下被激活；（ 3）有的可以作为肝功能试验的一部分。血浆特异酶活性的改变，除了反映血液功能外，还反映来源器官的功能。2. 非血浆特异酶：在血浆中浓度很低，且无功能，又可分为两种。（ 1）分泌酶：指来源于外分泌腺的酶 。如 - 淀粉酶（ AMY）、前列腺酸性磷酸酶（

3、 ACP）、脂肪酶（ LPS）、胃蛋白酶、胰蛋白酶、 ALP 等。在血液中的浓度和其分泌腺体的功能活动和疾病有关，来源增加或排泄受阻时，血浆中此类酶活性增高。例如，急性胰腺炎时，血淀粉酶就会升高。（ 2）代谢酶：（细胞酶）在细胞内发挥催化功能的酶。第 1 页正常时这些酶存在于组织细胞中，随细胞的不断更新和破坏经常释出极少量进入血液，血浆中酶活性很低。细胞内、外浓度差异悬殊。当酶来源的 组织细胞发生病变，细胞内酶大量进入血浆，导致血浆酶活性显著增高。下降的临床意义很少。如转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶等，它们在肝病、心脏疾病时都可能出现变化。（二）血清酶生理变异及其病理生理机制1. 生理变异：（

4、1）性别： CK和 GGT都是男性高于女性，因此不能以一个参考值作为判断标准。（ 2）年龄：如新生儿的CK和 LD活性常为成人的23 倍， ALP和 -GGT到老年时可能有轻度升高。（ 3）进食：酗酒可引起 -GGT明显升高。（ 4）运动：剧烈运动可引起血清中多种酶升高，如CK、 LD、 AST等。（ 5）妊娠与分娩时ALP（因有胎盘ALP 同工酶）升高，分娩时可能有CK、 CK-BB、 LD 升高。2. 血清酶病理改变机制：疾病时，影响血清酶的因素很多，主要机制如下：酶合成异常、细胞酶的释放、酶在细胞外间隙的分布和运送、血液中酶的清除。（ 1）酶合成异常：血浆特异酶大多数是在肝合成，当肝功能

5、障碍时酶浓度常下降。肝功能障碍胆碱酯酶活性可能下降。肝- 豆状核综合征铜氧化酶活性可明显下降。骨细胞增生时，血中ALP可上升。（ 2）细胞酶的释放：是疾病时大多数血清酶增高的主要机制，影响细胞酶释放的主要原因有：1）细胞内、外酶浓度的差异：非血浆特异的酶在细胞内、外浓度可差千倍以上，少量细胞受损伤，就可使血液中酶明显升高。2）酶在细胞内的定位和存在的形式：胞质中游离的酶如ALT、LD 最容易释放入血，线粒体酶较难释放，如 AST。3）酶蛋白分子量的大小：酶释放的速度和分子量成反比，此因素对酶在血液出现时间的影响大于对酶浓度高低的影响。酶的组织分布对细胞酶的释放也有影响。（ 3）酶在细胞外间隙的

6、分布和运送：细胞中酶有三种途径进入血液。1）血管内皮细胞和血细胞的酶直接进入血液；2）酶可同时进入血液和组织间隙，后者再入血；3）酶大部分进入组织间隙后再入血。这些因素都会影响酶进入血液的时间和升高的程度。（ 4）血液中酶的清除：不同疾病和不同的酶从血液中清除的时间和机制不同，同一疾病不同酶恢复正常的时间也不一样，这和酶的半寿期以及一些其他因素有关。（三）酶活性和质量测定方法及其评价酶测定包括酶量测定和酶活性测定。酶在体液中含量极微，因此临床上大都采用酶活性测定，以酶活性间接表示酶量。酶活性的概念：酶活性指酶催化反应的能力即酶促反应速度。反应速度是指在规定条件下单位时间内底物的减少量或产物的生

7、成量。1. 酶活性测定方法（ 1）按反应时间分类法：1）定时法：通过测定酶反应开始后某一时间段内（t1 到 t2 ）产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法， 称为两点法， 其中 t1 往往取反应开始的时间。 在酶反应一定时间后， 往往通过加入强酸、强碱、蛋白沉淀剂等，使反应完全停止，所以也叫中止反应法。2）连续监测法：又称为动力学法或速率法、连续反应法。在酶反应过程中，用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的改变，通过计算求出酶反应初速度。3）平衡法：通过测定酶反应开始至反应达到平衡时产物或底物浓度总变化量来求出酶活力的方法，又第 2 页叫终点法。（ 2）按监测方法分类法

8、分光光度法旋光法荧光法电化学方法化学反应法核素测定法量热法2. 酶质量测定法：利用酶的抗原性，通过抗原、抗体反应来直接测定酶的质量，直接用质量单位ng/ml 、 g/L 来表示酶含量的高低。酶质量测定法与免疫学方法相比，其优点是灵敏度和特异性高，不受体液中其他物质的影响，特别是抑制剂和激活剂的影响。（四）酶活力测定的影响因素（酶反应动力学）影响酶活性的因素包括底物的浓度、酶浓度、酶反应的最适pH、最适温度、酶的激活剂、抑制作用，另外还包括试剂中表面活性剂的作用等因素。1. 反应速度：大多数酶促反应是可逆反应 ，其速度既受底物浓度的影响，也受产物生成量的影响。酶反应动力学中所指速度是反应的初速度

9、。当底物浓度较高时，在反应的初期，其浓度变化甚微，产物生成量也很少，此时反应速度可看作是恒定的。2. 底物浓度：米氏方程是反映酶促反应速度与底物浓度关系的方程式：S ：底物浓度。V：不同 S 时的反应速度。Vmax：最大反应速度。Km：米氏常数。第 3 页Km值是酶的特征常数之一，只与酶的性质有关，而与酶浓度无关。不同的酶， Km值不同。同一个酶有几种底物时，则对每一种底物各有一特定的Km值，其中Km值最小的底物一般称为该酶的最适底物或天然底物。Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。3. 测定酶活力时需注意：（ 1）酶促反应过程中，要 用初速度 表示酶促反应速度。（ 2）要规定时

10、间、温度、 pH 等反应条件，并在酶测定过程中保持这些反应条件的恒定。（ 3）配制的底物浓度应准确且足够大，底物液中应加入不抑制该酶活力的防腐剂并保存于冰箱中，以防止底物被分解。（ 4）标本要新鲜，应保存于冰箱中。用血浆时，应考虑到抗凝剂对酶反应的影响。在采血、分离血清时，应注意防止溶血和白细胞的破裂。（ 5）在测定过程中，所用仪器应绝对清洁，不应含有酶的抑制物，如酸、碱及蛋白沉淀剂等。（五）工具酶作为试剂用于测定化合物浓度或酶活力的酶称为工具酶。对于底物或产物不能直接测定或难于准确测定的酶促反应，采用酶偶联法测定。最简单的酶偶联反应A：底物 B：待测酶产物（不能直接测定）C：指示酶产物（可以

11、直接测定）Ex：待测酶Ei ：代表指示酶（工具酶）1. NAD（P）十或 NAD（P） H偶联的脱氢酶及其指示反应。谷氨酸脱氢酶（或其还原型为辅酶。GLD）以 NAD或 NADP6- 磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6-PD） NADP或其还原型为辅酶。基本反应340nm监测吸光度变化。2. 偶联 H2O2 的工具酶及其指示反应：葡萄糖氧化酶、尿酸酶、甘油氧化酶、胆固醇氧化酶等工具酶分别用于葡萄糖、尿酸、甘油、胆固醇第 4 页的测定，可使相应底物被氧化，生成H2O2，H2 O2 可通过下列指示反应来检测。（ 1）使单一的色素原显色：色素原是一种无色的色素前身，在过氧化物酶（POD）存在下被H2O2 氧化

12、后可生成有色的色素。如邻联茴香胺（ODA）。（ 2）使成对的色素原显色：必须有两个色素原共同存在，再在过氧化物酶（POD）的催化下生成色素。如酚和 4- 氨基安替比林作用，生成红色色素。（ 3）发光反应： H2O2 也可用化学发光反应来监测。（六）标本采集要点及酶活性表示法1. 标本采集要点：酶测定之前，标本要经过采集、分离血清和贮存等过程，酶在血中是处于动态变化过程，血液离体后，会有一定变化。其中任何一个阶段处理不当，都有可能引起测定值变化。（ 1）不能溶血 ：因大多数酶在血细胞中的含量比在血浆中高得多。如LDH高 150 倍， ALT 高 7 倍。（ 2）及时分离血细胞：防止血细胞内酶大量

13、进入血清；采血后12 小时实验室必须及时离心，分离血清。（ 3）标本储存温度：酶蛋白不稳定，易失活。大部分酶在低温中比较稳定，分离血清如不能及时测定，应放 冰箱保存 。常用酶如 ALT、 AST、 ALP、 CK、LD、 GGT和 AMY，冷冻保存10 个月活性变化不大。但LD在融冻时易被破坏，LD 在低温反而不如室温稳定，即所谓的“冷变性 ”。（ 4）尽量用血清标本：防止某些抗凝剂对酶的抑制作用（除非测定与凝血或纤溶有关的酶）。2. 酶活性表示法：酶活性的大小通常以酶单位数表示。酶的国际单位在实验规定的条件下（温度、最适pH、最适底物浓度时），在1 分钟内催化1 mol 底物 发生反应所需的

14、酶量为1 个酶活力国际单位（ U）。能够真正代表酶活性大小的是酶促反应初速度。（七）同工酶和亚型测定的临床意义1. 概述 同工酶是指其 分子组成及理化性质不同 但具有 相同催化功能 的一组酶。同工酶是一个酶族，可以根据同工酶的差异用各种物理、化学方法将其分离测定。同工酶的结构差异可引起酶蛋白抗原性 的变化，现在利用免疫原理 来测定同工酶的方法有了很大发展。2. 分布特点：（ 1）明显的 组织器官特异性 ；（ 2）细胞内定位不同；（ 3）有些同工酶在 不同发育阶段类型 不同。3. 临床应用：同工酶的检测比单测总酶活性有更高的灵敏度和特异性。（ 1）可根据同工酶的变化来推测受损的组织或器官。心肌有

15、损伤时虽然可有总LD活性上升，但诊断意义不大，如果LD1 活性上升，且LD1 LD2则说明有心肌疾病。（ 2）可判断某些疾病的程度和预后用的较多的是 线粒体 AST，此酶较难进入血清，但当肝病变严重、细胞坏死时，线粒体同工酶可进入血中使其升高，对判断疾病的程度和预后都有帮助。同工酶亚型： 有些同工酶在从组织进入体液后， 可进一步分化为几个不同的类型， 即同工酶亚型。 CK-MB 的亚型有 MB1、MB2，CK-MM的亚型有 MM1、MM2、MM3。这些亚型对心肌梗死的诊断和溶栓效果的判断都优于CK-总酶和同工酶。【习题】第 5 页下列哪种酶是血浆特异酶A. 胆碱酯酶B. 脂肪酶C. 转氨酶D.

16、 乳酸脱氢酶E. 淀粉酶正确答案 A答案解析血浆特异酶主要是指血浆中发挥作用的酶，属于这一类性质的酶还有胆碱酯酶、铜氧化酶、脂蛋白脂肪酶等。细胞酶的释放量不受下列哪个因素的影响A. 各种酶的测定波长及反应速率B. 细胞内外酶浓度的差异C. 酶的相对分子量D. 酶的组织分布E. 酶在细胞内的定位和存在形式正确答案A答案解析细胞酶的释放：是疾病时大多数血清酶增高的主要机制，影响细胞酶释放的主要原因有：细胞内、外酶浓度的差异；酶在细胞内的定位和存在的形式；酶蛋白分子量的大小。酶的一个国际单位的含义是A. 每秒钟能催化1 mol 底物的酶量B. 每分钟能催化1 mol 底物的酶量C. 每秒钟能催化1m

17、mol 的底物的酶量D. 每分钟能催化1mol 的底物的酶量E. 每秒钟能催化1mol 底物的酶量正确答案 B答案解析在实验规定的条件下（温度、最适pH、最适底物浓度时），在1 分钟内催化 1 mol 底物 发生反应所需的酶量为1 个酶活力国际单位 （U）。以 NAD 还原成 NADH反应为基础的生化分析，采用的波长及吸光度变化为A.340nm 从小到大B.340nm 从大到小C.405nm 从小到大D.405nm 从大到小E.280nm 从小到大正确答案 A+340nm，从小到大。答案解析 以 NAD还原成 NADH反应为基础的生化分析，采用的波长及吸光度变化为二、常用血清酶和同工酶测定的临

18、床意义1.连续监测法测定血清肌酸激酶（CK）2.连续监测法测定乳酸脱氢酶（LD）总活性第 6 页3.连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）4.连续监测法测定血清（天）门冬氨酸氨基转移酶（AST）5.连续监测法测定血清碱性磷酸酶（ALP）6. 连续监测法测定血清 - 谷氨酰基转移酶（ GGT）7. 淀粉酶（ AMY）测定8. 比色法测定酸性磷酸酶（ ACP）（一）连续监测法测定血清肌酸激酶（CK）CK是由两种不同的亚基M和 B 组成的 二聚体 。正常人体中有三种同工酶，即CK-BB（ CK1）、 CK-MB（ CK2）和 CK-MM（ CK3） 。CK作用后生成的磷酸肌酸含高能磷酸键，是肌

19、肉收缩时能量的直接来源。CK需要镁离子激活。1. 原理酶偶联反应测定CK活性浓度。在 340nm监测 NAD（ P）H 的生成量，可计算出CK的活性浓度。2. 生理变异年龄、性别和种族对CK含量都有一定影响。CK含量和肌肉运动密切相关。3. 参考值：男性 38 174U/L （ 37）；女性 26 140U/L （ 37）。（ 1）心肌梗死心肌梗死发生后2 4h 此酶即开始升高，12 48h 达最高峰值，可高达正常上限的10 12 倍，在 2 4天降至正常水平。是用于心肌梗死早期诊断的一项较好指标。4. 临床意义升高：（ 2）病毒性心肌炎。（ 3）肌营养不良症、皮肌炎、骨骼肌损伤。（ 4）脑血

20、管意外、脑膜炎、甲状腺功能低下等疾病及一些非疾病因素如剧烈运动、各种插管及手术、肌肉注射氯丙嗪和抗生素。降低：甲亢，长久卧床者总 CK（主要为 CK-MM）可下降。在细胞线粒体内还有另一种 CK同工酶，称为 CK-Mt。5.CK 同工酶检测原理及临床意义CK是由两种不同的亚基M和 B 组成的 二聚体 ，正常人体中有三种同工酶：CK-BB（ CK1）（脑型）：主要存于脑组织、前列腺、肠、肺、膀胱、子宫、胎盘及甲状腺中；CK-MB（ CK2）： 主要存于心肌；CK-MM（ CK3）（肌型）：主要存于骨骼肌和心肌。第 7 页（ 1）检测方法：琼脂糖凝胶电泳法CK同工酶免疫特性和电泳迁移率各不相同，在

21、电泳时，CK-BB迁移最快，位于阳极白蛋白区，CK-MB居中，位于 2 和 球蛋白区， CK-MM最慢，位于阴极 - 球蛋白区， CK-Mt 迁移率最低，位于 CK-MM之后。电泳后进行酶促反应显色，观察结果。（ 2）临床意义：正常 血清中绝大部分为 CK-MM的活性 ，含有少量的 CK-MB， CK-BB含量极少，用一般方法测不出。CK同工酶活性的变化见于以下情况。1） CK-MB是目前公认的诊断急性心肌梗死最有价值的生化指标。2）肌营养不良：肌肉创伤、皮肌炎患者CK-MM明显增高。3）心肌梗死以外的心脏疾患有时也可有血清CK-MB的轻度升高。常见疾病的血清总 CK和 CK同工酶变化疾病总

22、CKCK同工酶常用酶中升高最早（48 h）， 24h 达峰值， 2确诊心梗试验之一，大于急性心肌梗死总酶的 6%有意义， 2 3d3d 恢复正常，中度升高恢复正常心肌炎，肌肉损伤（挫 急性期轻度升高，可达5 倍正常上限。升高程度CK-MB可增高，CK-MM升高伤、手术、肌注、剧和损伤程度相关，严重者可达10000U/L 以上，为主， CK-MB/CK活性比烈运动等）肌注仅轻度升高，一日内恢复正常6%多发性肌炎和肌炎明显升高主要为 CK-MM神经性肌肉疾患正常无变化脑血管意外（脑出血，部分患者血液和CSF中 CK升高CK-BB脑血栓）甲状腺功能低下可高达正常上限50 倍主要为 CK-MM运动试验

23、可轻度升高CK-MB正常恶性肿瘤（通常见于前列腺癌、小细胞肺不定CK-BB轻度升高癌、消化道癌）（二）连续监测法测定乳酸脱氢酶（LD）总活性乳酸脱氢酶是一种含锌的 氧化还原酶类 ，人体以 心、肾、骨骼肌 含量最丰富，其次为 肝、脾、胰及肺组织含量亦较多。1. 原理：340nm处吸光度的增加速率与样品中LD 活性成正比。2. 生理变异：血清 LD 高低和性别关系不大，婴儿酶活性可达成年人两倍，儿童和少年活性比成年人高10% l5%。3. 参考值 血清 LD： LD-L 法： 252U/L LD-P 法： 200380U/L4. 临床意义血清 LD 活性增高主要见于心肌梗死、肝病、肺梗死、恶性肿瘤

24、、白血病、恶性淋巴瘤等的辅助诊断。某些肿瘤转移后所致的胸、腹水中LD 活性往往也升高。第 8 页5.LD 同工酶检测原理及临床意义LD 是由 H 亚基和 M亚基构成的 四聚体 ，不同的组合方式构成五种同工酶。1）方法琼脂糖电泳法血清 LD 同工酶目前常用琼脂糖凝胶电泳法测定。2）临床意义LD 同工酶在组织中的分布可将其分为三类。以心肌为代表，主要含LD1，活性占该组织的一半以上，肾、胰、膈肌与红细胞次之；以肝脏为代表，含LD5 为主，其占该组织总活性的50%以上，皮肤、骨髓、关节滑液、白细胞、血小板次之；以肺、脾为代表，含LD3 为主，脑、肠、淋巴结与内分泌腺等次之。在成年人存在着如下规律：L

25、D2 LD1 LD3 LD4 LD5急性心肌梗死发作后早期，LD1 升高更早更明显，可致LD1/LD 2 比值增高。活动性心肌炎、急性病毒性心肌炎及某些溶血性疾病，肾坏死、 假性肥大性肌营养不良等，LD1 及 LD2的活性也升高。当急性肺部病变、白血病、 胶原病、 心包炎、 病毒感染等LD2 及 LD3 增高。 而恶性病时， LD3 也常增高。肝炎、急性肝细胞损害及骨骼肌损伤时 LD5 常常增高。而当心肌梗死并发充血性心力衰竭时， LD5 也可升高。常见疾病LD 总酶和 LD 同工酶的变化疾病LD 总酶LD 同工酶心肌梗死升高最慢（ 810d），升高时间长（5 10d）可高于正常 LD1 LD

26、2，可持续两上限 10倍周充血性心衰， 心肌5 倍LD LD可高于正常上限12炎第 9 页病毒性肝炎部分患者可高于正常上限5 倍LD5 LD4肝硬化轻度升高LD 明显升高， LD5LD4原发性肝癌部分病例升高同上梗阻性黄疸不定常 LDLD45肌肉损伤视损伤程度而异以 LD 升高为主5恶性肿瘤可升高以 LD 为主，LD LD331（三）连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）ALT 和 AST是体内最重要的两种转氨酶，辅酶是磷酸吡哆醛。AST有两种同工酶，分别存在于细胞质（c-AST）和线粒体（ m-AST）， ALT 绝大多数在细胞质内，可能有极少量在线粒体中。ALT 和 AST存在于体内

27、多种器官和组织中，以含量从多到少为序，AST存在于心脏、 肝、骨骼肌和肾等，ALT存在于肝、肾、心、骨骼肌等。1. 原理：采用酶偶联反应在 340nm处连续监测吸光度下降速率，从而计算出ALT活性浓度。2. 生理变异：此酶生理变异较小，无统计学意义。3. 参考值： 男性 5 40U/L女性 5 35U/L （ 37）4. 临床意义： ALT常作为判断 肝细胞损伤 的灵敏指标， 轻度损伤即升高，肝病早期诊断 。但其他疾病或因素亦会引起 ALT 不同程度的增高。（ 1）急性病毒性肝炎ALT 阳性率为80% 100%，最高可达500U 以上，多为ALT AST。监测 ALT 可以观察病情的发展，并作

28、预后判断 。（ 2）慢性活动性肝炎或脂肪肝ALT 轻度增高（ 100 200U），或属正常范围，且AST ALT。（ 3）肝硬化、肝癌ALT 有轻度或中度增高，提示可能并发肝细胞坏死，预后严重。（ 4）其他原因引起的肝脏损害，如心功能不全时，肝淤血可使ALT、 AST明显升高 ：某些化学药物如异烟肼、氯丙嗪、苯巴比妥等可不同程度的损害肝细胞，引起ALT 的升高 。（ 5）骨骼肌损伤、多发性肌炎等亦可引起转氨酶升高。应注意两种情况：重症肝炎由于大量肝细胞坏死，此时血中ALT可仅轻度增高，临终时常明显下降，但胆红素却进行性升高，即所谓的“酶胆分离”，常是肝坏死征兆。另一种情况是少数人血清中ALT

29、长期持续升高，肝穿无明显病理改变，预后良好。（四）连续监测法测定血清（天）门冬氨酸氨基转移酶（AST）1. 原理：第10页基质是门冬氨酸与酮戊二酸。在 340nm处监测吸光度的下降速率，从而计算AST活性。2.生理变异：此酶生理变异较小。3.参考值：成人 8 40U/L 。4.临床意义主要用于诊断 AMI； AST也是肝炎患者的观察指标， 且 AST/ALT 比值对判断肝炎的转归特别有价值； -AST 在判断肝实质细胞损害程度、急慢性肝炎的鉴别有一定价值。常见疾病ALT 和 AST及其同工酶的变化疾病ALTASTAST/ALT病毒性肝 明显升高，随病情而异可达正常上限同 ALT，较 ALT 轻

30、且恢复早1.0与肝硬化炎10 100 倍鉴别重症肝炎升高正常上限20 倍内，有酶胆分离现升高超过 ALT1.0象肝硬化常轻度增高升高超过 ALT1.0梗阻性黄轻度升高同 ALT常 1.0疸溶血性黄无变化无变化疸心肌梗死 轻度升高明显升高，与CK和 LD 比较，1.0无优点肌肉损伤 正常或轻度升高急性期可轻度升高1.0（五）连续监测法测定血清碱性磷酸酶（ALP）ALP 指一组底物特异性较低，在碱性环境中（最适pH10 左右）能水解很多磷酸单酯化合物的酶。ALP广泛存在各器官组织中，含量以肝为最多，其次为肾、胎盘、小肠、骨等，妊娠时胎盘产生胎盘ALP。一般认为骨中的ALP和骨的钙化作用关系密切。血

31、清中的ALP 主要来自肝脏和骨骼。目前 ALP主要用于骨骼和肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断，尤其是黄疸的鉴别诊断。1. 原理：磷酸苯二钠比色法：测定ALP水解底物产生的酚。磷酸苯二钠做底物经ALP 作用后产生黄色的对硝基酚，根据405nm处吸光度增高速率来计算ALP 活性单位。2. 生理变异： ALP变化与年龄密切相关 ，新生儿 ALP略高于成年人， 20 岁后降至成年人值，到老年期又轻度升高，可能与生理性的激素变化有关。孕妇血清ALP 在妊娠 3 个月即开始升高，是升高最明显的酶，9 个月可达峰值，约为正常值的2 倍，升高的 ALP 来自胎盘，和胚泡壁的细胞滋养层的发育程度直接相关。高脂餐后，

32、血清ALP 活性升高。尤以血型为O型或 B 型的分泌型（唾液中可分泌血型抗原者）人群更为突出，增高的ALP多为小肠ALP。无黄疸肝脏疾病患者血中发现有ALP升高应警惕有无肝癌可能。第11页3. 参考值：女性， 1 12 岁 500U/L ； 15 岁， 40 150U/L ；男性， 1 12 岁 500U/L ； 12 15 岁， 750U/L ； 15 岁， 40 150U/L 。4. 临床意义： 在临床上，血清 ALP 活力测定常作为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。（ 1）血清 ALP 活性升高：常见于骨 Paget 病、胆道梗阻、恶性肿瘤骨转移或肝转移、佝偻病、骨软化、成骨细胞瘤、

33、甲状旁腺功能亢进及骨折愈合期。（ 2）血清 ALP活性降低：比较少见，主要见于呆小病、磷酸酶过少症、维生素C 缺乏症。甲状腺功能低下、恶性贫血等也可见血清ALP下降。常见疾病血清 ALP活性变化疾病ALP 增高变形性骨炎极度上升，可达正常上限50 倍骨肿瘤（骨细胞癌）中度上升佝偻病（软骨病）可达正常上限 1 3 倍梗阻性黄疸明显升高，可达正常上限10 15 倍实质疾病（肝炎、肝硬化）轻度上升，在很少超过正常上限3 倍肝癌常明显上升，无黄疸而有血清ALP 活性上升应考虑肝占位性病变（六）连续监测法测定血清 - 谷氨酰基转移酶（GGT）GGT是一种底物特异性不高的酶， 能作用于一系列含谷氨酰基的化

34、合物， 各器官 GGT的理化性质有差异，用琼脂糖电泳可分出 4 个区带。1. 原理在 410nm处吸光度增高速率与GGT活性呈正比关系。2. 生理变异年龄与妊娠对 GGT影响不大。男性血中 GGT含量明显高于女性，可能与前列腺有丰富的GGT有关。 酗酒会引起 GGT明显升高，升高程度与饮酒量有关，诊断疾病时必须排除这一因素。3. 参考值：男性： 11 50U/L （ 37）； 女性： 7 32U/L （ 37）。4. 临床意义： 肾脏含 GGT最高，测定尿中该酶活性有助于诊断肾小管疾患。 GGT主要用于诊断肝胆疾病，原发性肝癌、胰腺癌和乏特壶腹癌时，血清GGT活性显著升高， 特别在诊断恶性肿瘤

35、患者有无肝转移和肝癌术后有无复发时，阳性率可达90%，GGT同工酶与 AFP联合检测可使原发性肝癌阳性率明显提高；在肝炎恢复期内，该指标仍升高时，指示肝炎未愈。嗜酒慢性酒精中毒或长期服用苯巴比妥等药物血清GGT活性常升高，口服避孕药会使GGT值增高 20%。常见疾病谷氨酰基转移酶的变化疾病增高肝胆疾病（胆石症、炎症）明显增高，可达正常上限的5 30倍，阳性率在80%以上肝实质性疾病（肝炎、肝硬化）轻度增高，达正常上限25 倍肝癌明显增高，且阳性率高诱导作用（乙醇、苯巴比妥、抗抑郁药，抗癫轻度升高，停药后正常第12页痫药等）（七）淀粉酶（AMY）测定淀粉酶作用于淀粉的 -1 ， 4 糖苷键， C

36、l - 是该酶的激活剂。1. 方法（ 1）碘 - 淀粉比色法测定。（ 2）对 - 硝基苯麦芽七糖苷法。（ 3） 2- 氯 -4- 硝基苯麦芽三糖苷法。2.生理变异：成年人血中AMY与性别、年龄、进食关系不大，新生儿AMY缺乏，满月后才出现此酶，逐步升高，约在5 岁时达到成人水平，老年人AMY开始下降，约低 25%。3.参考值：碘 - 淀粉比色法：血清 80 180U/L ；尿液 100 1200U/L对 - 硝基苯麦芽七糖苷法：血清淀粉酶：220U/L （ 37）；尿淀粉酶：1200U/L （37）不同的方法血和尿淀粉酶测定值无可比性。各实验室应针对本实验室选定的方法制定参考值。4. 临床意义

37、：淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌，可通过肾小球滤过。升高：（ 1）急性胰腺炎：血和尿中的AMY显著增高。 发病后 2h 血清 AMY开始增高， 1224h 达高峰， 2 5天下降至正常。尿AMY约于发病后12 24h 开始升高，下降比血清AMY慢，在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。 碘 - 淀粉比色法结果如超过500U有意义，达350U 时应怀疑此病。（ 2）流行性腮腺炎（ 3）急性阑尾炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后等均可见血清AMY增高，但常低于 500U。降低：正常人血清中AMY主要由肝脏产生，故血清与尿中AMY同时减低主要见于肝炎、肝硬化、肝癌及急性和慢性胆囊炎等。

38、肾功能障碍时，血清AMY也可升高。（八）比色法测定酸性磷酸酶（ACP）1. 方法（ 1）麝香草酚酞比色法：该方法目前已少用。（ 2）连续监测法： - 磷酸萘胺在酸性条件下被 ACP水解为 - 萘酚和磷酸， - 萘酚再和固红 TR盐反应生成稳定的重氮化合物。通过测定在405nm吸光度的变化速率来计算ACP的活性 。前列腺酸性磷酸酶可被酒石酸抑制， 血清加入酒石酸后可测得非前列腺酸性磷酸酶活性，总酸性磷酸酶活性减去非前列腺酸性磷酸酶活性得前列腺酸性磷酸酶活性。2. 生理变异男、女性血中ACP含量无差异，新生儿ACP活性与成人相似，出生后1 个月中血清酶活性甚高，然后随年龄的增长而逐渐下降，青春期又

39、可出现一活性峰值，至20 岁降至成人水平。3. 参考值：成人总酶活性为 0 9U/L ，前列腺酸性磷酸酶为 0 3U/L （连续监测法）。4. 临床意义临床血清ACP测定主要用于前列腺癌的辅助诊断及疗效观察指标。前列腺癌，特别是有转移时，血清ACP可明显升高，前列腺酸性磷酸酶更有意义。溶血性疾病、变形性骨炎、急性尿潴留及近期作过直肠检查者，此酶亦可轻度增高。由于血清ACP酶活性极不稳定，活性测定的应用渐趋稀少。【习题】下列关于乳酸脱氢酶叙述错误的是A. 细胞中 LD 含量比血清高100 倍第13页B.LD 在肝脏中含量最多C. 血清中 LD 增高对任何单一组织或器官都是非特异性的D.LD 由两种亚基不同组合构成五种同工酶，E. 具有冷变性的特点正确答案 B答案解析乳酸脱氢酶是一种含锌的、参与糖无氧酵解及糖异生的重要酶，能可逆地催化乳酸和丙酮酸之间的氧化还原反应，在人及动物组织中广泛存在。人体以心、肾、骨骼肌含量最丰富，其次为肝、脾、胰及肺组织含量亦较多。“酶胆分离”通常是哪种疾病的征兆A. 急性心肌梗死B. 肝癌C. 肝坏死D. 脂肪肝E. 胆石症正确答案C答案解析重症肝炎由于大量肝细胞坏死，此时血中ALT可仅轻度增高，临终时常明显下降，但胆红素却进行性升高，即所谓的“酶胆分离”，常是肝