一种白及种子的繁殖方法

1、一种白及种子的繁殖方法专利名称一种白及种子的繁殖方法技术领域本发明涉及一种白及种子的繁殖方法。背景技术白及为兰科植物白及 (Bletilla sfriata(Thunb.)Reiehb.f.) 的干燥块莖 ,大多野生于山野川谷的向阳山坡、疏林中、草丛中，喜欢阴凉的湿度较大的环境，土壤肥沃疏松而又排水良好的夹沙土。所以，要求生存环境独特的白及的资源是有限的，目前，野生资源的产地仅剩下云、贵、川、湘等极其有限的少数地域的偏远山野。白及为多年生草本，植株矮小(未经人工选育的野生种质资源)，紫花白及高 30 厘米左右，四川蛾眉白花大白及高33 厘米以上。白及叶 3-6 片，长披针形，中部稍宽，先端尖。

2、白及3 月萌发，花期 4-5 月，果期 8-10 月。 12 月倒苗。白及虽然结果，但是，却不能依靠种子繁衍。成熟的白及种子呈橄榄型，黄色粉沫状，非常细小，种皮为单层细胞组成，侧壁加厚，细胞器及原生质均已消失， 是一层半透明的死细胞， 胚椭圆型，未分化，为原胚阶段，胚柄退化，无胚乳。在自然状态下，极少萌发成苗。目前，白及目前主要依靠块茎繁殖，是典型的 1+1=2 繁殖方式。长期无性繁殖，不仅繁殖速度慢，而且与耗种量大，还与用药争夺原料，长期无性繁殖，易引起种性退化，很难适应规模化种植的需要。而且土地连年耕作，白及鳞茎积累了大量病毒， 严重影响了其产量和品种。 为此，有学者试图通过组织培养的方式

3、，以解决白及繁殖效率低及病毒感染等问题，并且已经取得了可喜成绩。然而，总结白及组培快繁生产技术， 存在以下问题 :白及鳞茎、 茎段含有大量内生真菌及病毒，组培污染率高，成功率低；利用白及茎尖生长点和种子组培虽然成功率高，但从脱分化、增殖、分化、炼苗直到移栽周期长， 至少 5 个月左右 (兰科植物生长普遍缓慢 ) ，而且期间要更换好几次培养基，工作量大，成本及技术含量高，一般企业和个体户药农根本做不到；为此，仍然没有根本性解决白及存在的问题，至今白及价格一直呈现上涨趋势或许是最好也是最直接的印证。为此，仍然有必要寻求更好、更经济便捷的繁殖和种植技术方法，扩大生产以满足市场需求。目前，白及人工繁育

4、的研究工作进展十分缓慢，这是白及野生改家种研究的一个关键课题。这种生长环节的奥秘性超越了绝大多数生产者的认识水平，由此可知，目前白及家种只能以假鳞茎为种苗，并且只有当年生，具有老杆和嫩芽的假鳞茎才能发展成新植株。白及发展家种，必须要面临种子秧苗稀缺的困境。再者这种传统的分株繁殖方式，不可避免地产量低下，抗病虫害能力差，一代一代退化。由于种苗紧缺，大规模产业化种植就目前来说还遥不可及。发明内容本发明针对白及繁殖效率低、大多依靠无性繁殖的问题，提供了利用种子繁殖快速高效培育优质种苗的方法。本发明采用的技术方案是:一种白及种子的繁殖方法，所述方法包括 :(I) 将采集的白及种子(每年 8 9 月采集

5、 )播种至适宜的土壤介质中，并浇淋适量1/2MS 无糖培养液；白及种子细小无胚乳，所以需播种与泥炭土、营养土等有机质丰富的土壤中；白及种子在播种之前，通常需要经消毒处理，可直接对蒴果进行消毒，也可将蒴果中的种子取出后进行消毒；(2)种子播种后，控制白天生长温度为 15 25°C，空气相对湿度保持在70%以上，上方用塑料薄膜覆盖，并设置遮阳网适当遮阴；(3)种子播种一周后除去遮阳网， 定时喷雾营养液并适时浇水保持湿润(每周一次， 每次 200 1500mL/m2); 所述营养液组成如下 :6_苄氨基嘌呤 O 2.0mg/L, 1- 萘乙酸 O 1.0mg/L ，溶剂为 1/2MS 无糖

6、培养液或MS 无糖培养液； (4)种子播种一个月后施适量磷肥(如过磷酸钙，用量为 5 15g/m2) ，并按常规方法进行科学管理，适时浇水除草施肥 (如花宝 I 号，用量为0.2 0.8g/m2) ，直至地下长出球莖后进行移栽。优选的，所述白及种子先在添加O2.0mg/L6_ 苄氨基嘌呤 (为 O 则不添加，优选 1.0mg/L) 的 1/2MS 培养液或 MS 培养液中培养 I 2 个月，得到萌发后的白及种子再播种至土壤介质中。步骤 (I) 所述土壤介质为泥炭土。步骤(I) 所述土壤介质为营养土、蛭石、珍珠岩质量比20:1 5:1 5的混合物。步骤 (3)所述营养液组成如下 :6_苄氨基嘌呤

7、 1.0 2.0mg/L, 1- 萘乙酸 0.51.0mg/L, 溶剂为 1/2MS 无糖培养液或 MS 无糖培养液；在本发明中， MS 培养液及 MS 无糖培养液配方举例如下 :大量元素母液 : 4 0316.5g ；MgS04.7H203.7g ；KH2PO41.7g ； KN0319g, 加水溶解，定容至 500ml ；钙盐母液 :CaCl23.32g ，加水溶解，定容至500ml ；微量元素母液:0.0415g ;Na2Mo04.2 200.0125g ; 3 030.31g ;CuSO4.5 200.00125g ；MnS04.H2O0.845g； CoCl2.6H200.00125

8、g；ZnSO4.7H200.43g ，加水溶解，定容至500ml ；铁盐母液=EDTA 二钠3.725g，加100ml 水加热溶解，FeSO4.7H202.785g，加 100ml 水溶解后两者混匀，加水配成500ml ；维生素母液 :盐酸吡哆醇 (VB6) 0.025g ; 盐酸硫胺素(VBl) ( 025g ;烟酸 ( 025g,甘氨酸 0.lg，加水溶解，定容至 500ml ；配 ILMS 培养液 :取大量元素母液50ml, 韩盐母液50ml, 微量元素母液 IOml, 维生素母液 IOml, 铁盐母液 5ml, 加肌醇 0.1g,鹿糖或白砂糖 20 30g,蒸懼水定容至 1L 。配 I

9、LMS 无糖培养液 :取大量元素母液 50ml, | 丐盐母液 50ml, 微量元素母液 IOml, 维生素母液 10ml ，铁盐母液 5ml ，加肌醇 0.1 g 配 ILMS 培养液 :取大量元素母液 50ml ，钙盐母液 50ml, 微量元素母液 IOml, 维生素母液 IOml, 铁盐母液 5ml, 加肌醇 0.1g,鹿糖或白砂糖20 30go1/2MS 培养液指溶液中所含的大量元素和钙盐为 MS 培养液的一半，其他不变。1/2MS 无糖培养液指溶液中所含的大量元素和钙盐为MS 无糖培养液的一半，其他不变。白及虽然结果，但是，却不能依靠种子繁衍。成熟的白及种子呈橄榄型，黄色粉沫状，非常

10、细小，种皮为单层细胞组成，侧壁加厚，细胞器及原生质均已消失，是一层半透明的死细胞，胚椭圆型，未分化，为原胚阶段，胚柄退化，无胚乳。在自然状态下，极少萌发成苗。目前，白及目前主要依靠块茎繁殖，是典型的1+1=2 繁殖方式。白及人工繁育的研究工作进展十分缓慢，这是白及野生改家种研究的一个关键课题。这种生长环节的奥秘性超越了绝大多数生产者的认识水平，由此可知，目前白及家种只能以假鳞茎为种苗，并且只有当年生，具有老杆和嫩芽的假鳞茎才能发展成新植株。白及发展家种，必须要面临种子秧苗稀缺的困境。再者这种传统的分株繁殖方式，不可避免地产量低下，抗病虫害能力差，一代一代退化。由于种苗紧缺，大规模产业化种植就目

11、前来说还遥不可及。利用本发明，可在一年时间内得到大量的白及优质种苗。本发明的有益效果主要体现在:采用本发明方法，可在短时间内大量繁育白及的种苗，有效满足种植业对种苗的需求。具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此:实施例 1:I) 于 8月底采集成熟未开裂的白及蒴果；2)将蒴果切开，取出其中的种子，在水中浸泡两天，播种到泥炭土中，浇透水，上方用地膜覆盖后再盖一层遮阳网，种子播种的环境为人工单栋大棚，大棚顶部遮阳网覆盖，大棚中每日定时喷水，保持湿度在 70% 以上；3)种子播种一周后去除表面覆盖的遮阳网，每周喷雾一次1/2MS 无糖培养液 (每次约

12、800mL/m2), 并适时烧水 ,忌干燥缺水。 4)种子播种一个月后去除表面覆盖的薄膜，并浇10g/L的过磷酸钙 ( 约 IOOOmL/m2) ，以促进幼苗的生根。5)在此之后进行科学的管理， 主要是适时浇水除草，喷施页面肥， (花宝 I 号，1000 倍稀释，每两周于茎叶部喷洒I 次，约 500ml/m2) ，一年后可得地下具球茎的白及幼苗。实施例2:具体方法同实施例 1，与实施例 1 不同的是，步骤 2)中的白及蒴果先用75%酒精和0.1%升汞消毒后切开蒴果，得白及无菌种子，播种到 1/2MS 培养液中培养一个半月， 用纱布过滤， 得萌发后的白及种子，然后播种到泥炭土中。 步骤 3)中所

13、用营养液为 1/2MS 无糖培养液 +1.0mg/Ll- 萘乙酸和 +2.0mg/L6- 苄氨基嘌呤；按照上述方法，一年后可得地下具球茎的白及幼苗。实施例3:具体方法同实施例 2，与实施例2 不同的是，白及种子萌发时播种的营养液为 MS 培养液 +1.0mg/L6- 节氨基嘌呤。 按照上述方法，一年后可得地下具球茎的白及幼苗。实施例4:具体方法同实施例2，与实施例2 不同的是，步骤2)中种子萌发后播种到营养土:蛭石 :珍珠岩为20:1:1。按照上述方法，一年后可得地下具球茎的白及幼苗。最后，还需注意的是，以上实施例子仅是本发明的若干个具体实施例子，本发明不限于上述的实施例，还有许多变形，本领域

14、相关的人员能从本发明内容中直接导出或者联想出的所有变形，均认为是本发明的保护范围。权利要求1.一种白及种子的繁殖方法，所述方法包括 : (1) 将采集的白及种子播种至适宜的土壤介质中，并浇淋适量1/2MS 无糖培养液；(2)种子播种后，控制白天生长温度为15 25° C，空气相对湿度保持在70%以上，上方用塑料薄膜覆盖，并设置遮阳网进行遮阴；(3)种子播种一周后除去遮阳网，定时喷雾营养液并适时浇水保持湿润；所述营养液组成如下:6_苄氨基嘌呤 O 2.0mg/L ， l- 萘乙酸 O 1.0mg/L ，溶剂为 1/2MS 或 MS无糖培养液；(4) 种子播种一个月后施适量磷肥，并适时浇

15、水除草施肥，直至地下长出球茎后进行移栽。2.如权利要求1 所述的方法，其特征在于所述白及种子先在添加 O 2.0mg/L6- 苄氨基嘌呤的1/2MS 或 MS 培养液中培养I2 个月，得到萌发后的白及种子再播种至土壤介质中。3.如权利要求1 所述的方法，其特征在于步骤(I) 所述土壤介质为泥炭土。4.如权利要求1 所述的方法，其特征在于步骤(I) 所述土壤介质为营养土、蛭石、珍珠岩质量比20:1 5:1 5的混合物。5.如权利要求1 所述的方法，其特征在于步骤(3) 所述营养液组成如下 :6_苄氨基嘌呤1.0 2.0mg/L, 1- 萘乙酸 0.5 1.0mg/L,溶剂为 1/2MS 或 MS 无糖培养液。全文摘要本发明提供了一种白及种子的繁殖方法，所述方法包括(1)将采集的白及种子播种至适宜的土壤介质中，并浇淋适量1/2MS 无糖培养液； (2)种子播种后，控制白天生长温度为15 25，空气相对湿度保持在70%以上，上方用塑料薄膜覆盖，并设置遮阳网进行遮阴；(3) 种子播种一周后除去