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文档简介

1、比浊法(光学法)原理: 将富血小板血浆(PRP置于比色管中,加入诱聚剂(主要有ADP、肾上腺 素,胶原,凝血酶、花生四烯酸、TXA2,PAF等),用一涂硅的小磁粒进行搅 拌,血小板逐渐聚集 ,血浆浊度降低 ,透光度增加 ,记录此变化 ,形成血小 板聚集的动态曲线,以PRP的聚集率和透光度为0%,乏血小板血浆(PPP) 所测得的聚集率和透光度为 100%,用血小板聚集仪进行自动测定、记 录、描绘血小板聚集曲线优点:是目前应用最广的血小板聚集功能检测方法。缺点:检测结果重复性较差, cv 值达到 15%;操作繁琐:必须分离贫血小板血浆、富血小板血浆,还需要调整血浆 中血小板浓度;溶血、高血脂样对检

2、测有明显干扰; 检测样本去除血液主要细胞成份, 不能完全反映体内真实的血小板聚 集功能;VerifyNow维梵纳抗血小板治疗检测仪1(全血比浊法)CHRONO70C血小板聚集仪(美国Chrono-Log公司)原理: 检测原理还是采用传统比浊法, 没有本质突破,检测误差达 15%( cv) 优点:无须制备血小板血浆的操作 术前血小板功能的快速筛选,全血/PRP/ATP释放检测缺点:耗材价格昂贵;目前尚未在国内注册;国外使用信息不多。电极法ChronoLog 59(美国 ChronoLoc公司)简介:590 系列采用电阻法测血小板聚集,在全血中测血小板聚集功能,减 少操作步骤节约了时间, 反映了血

3、小板的生理状态下的功能, 具有重 要的生理意义, 可用于监测药物作用于血小板功能的功效, 对相关血 栓与止血药物的研究具有重要的意义。原理:可用全血或PRP进行检测。检测杯中有一对铂电极,血小板在诱导剂的诱导下发生聚集时,可覆盖在铂电极表面,导致电阻抗的改变,后 者的变化程度与聚集程度有关。 此信号经过放大传送到监测器或计算 机上进行处理, 将电阻抗的改变转换为聚集曲线从而计算出血小板的 聚集率。优点:无需制备富血小板血浆的操作, 使操作更简便省时, 采血量仅为 2ml , 完成操作仅需大约 10 分钟。全血中的其他血细胞同时存在,从而真正模拟了体内的生理环境保存全部血小板,避免部分血小板因体

4、积太大而在制备 PRP时丢失 对于脂血标本的检测, 可以克服光学法检测时因过于浑浊而影响结果 全血电阻聚集仪与光学法相比, 检测高凝状态时的血小板功能更为敏 感全血电阻聚集是检测血小板高凝状态的更好办法, 可鉴别产生血栓并 发症的状况,在红细胞和白细胞存在的情况下,实验结果更敏感。 缺点:光学聚集仪耗时 ,对小聚集物的形成不敏感 ,,操作相对烦琐。 尚缺乏大量应用的经验。检测结果质量不佳;电极反复使用,但用后清洗困难血栓弹力图法TEG5000(美国西芬斯)简介:是一种整个动态过程来监测凝血过程的分析仪。原理:使用全血作为检测标本在体外加入高岭土激活, 从而启动凝血机制, 从内外源凝血系统的启

5、动,纤维蛋白的形成,到血块溶解进行全程监测。反映凝血机制中除血管内皮细胞和血管壁以外的所有凝血因素优点:TEG 能从一份血样完整地监测从凝血开始, 至血凝块形成及纤维蛋白溶解的全过程。对凝血因子、纤维蛋白原、血小板聚集功能以及纤维 蛋白溶解等方面进行凝血全貌的检测和评估。 结果不受肝素类物质的 影响。 15-20 分钟出结果,带有自动诊断功能。TEG不需处理血样。TEG能更为敏感的发现凝血异常缺点:检测耗时较长( 20 分钟 / 测试);耗材价格昂贵; 检测结果重复性不高; 应用很少。流式细胞法BD 流式细胞仪( BD 公司 FACSCalibu)r 原理: 待测样本的细胞悬液在鞘液的包围和约

6、束下细胞排成单列高速由流 动室喷嘴喷出形成细胞液柱。 当液柱通过检测区在入射的激光束照射 下产生前向散射光FSC和侧向散射光SSC它们分别反映细胞大小和颗 粒度根据这些特性可以将细胞分类。 经一种或几种特殊荧光标记的样 本,在激光束的激发下所产生的特定荧光可被光学系统检测并输送到 计算机进行分析得到细胞相应的各种特性。优点:测量速度快、被测群体大、 可进行多参数测量,即对同一个细胞做有 关物理、生物化学特性的多参数测量,且在统计学上有效缺点: 操作较复杂,需要人工标记血小板仪器、试剂价格高昂 直接血小板连续检测法PL-11 血小板分析仪 2,3 (南京神州英诺华医疗科技有限公司)原理:采用 “

7、 自动连续检测 ” 的 方法,直接对血样中诱聚剂加入后血 小板数量、体积的变化进行持续监测,测得聚集前、后血小板数量的 变化,计算得出血小板聚集功能水平。优点:采用抗凝全血作为测试样本, 基本保持与体内血液组成状态一致, 白 细胞、红细胞参与检测过程,更符合体内真实的血小板聚集状 况; 仪器同时还能提供血小板平均体积( MPV )、红细胞数量、平均红 细胞体积( MCV )等参数,一次测定,便可对样本多个方面分析评 价,更加全面,准确。仪器操作简便、快速、检测费用低廉。血小板功能分析仪PFA-100血小板功能分析仪原理:在高切变率下 ,利用多种激活剂进行血小板功能的测定 ,在检测血小板 功能的

8、临床工作中取得较多进展。 血小板功能分析仪模拟体内初期止 血,又名“外出血时间测定” ,检测与血小板黏附、聚集、栓子形成的初期止血障碍相关的疾病 ,也可监测抗血小板药物治疗。 优点:该方法操作简便易行、重复性好,与光学血小板聚集仪法相关性较好,比出血时间等方法更为敏感。 而且能检测血小板功能失调是原发性因 素还是药物影响所致。缺点:其对出血性疾病尚不能非常精确地预测,而且其结果也受很多因素影响,如血小板数量、红血细胞压积、血型及血浆中vWF 水平等都会影响其结果。费用较高。参考文献:1 VerifyNow抗血小板治疗监测系统检测氯吡格雷抗血小板聚集的应用价值J.中华检验医学杂志 2013, 36(5)2 张有涛,赵益明,季顺东.PL-11血小板分析仪检测功能的性能评价J.中华检验医学杂志,2012,35(12) :1139

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