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1、第第13讲微生物的讲微生物的培养、分离培养、分离及酶的应用及酶的应用考试要求考试要求1.大肠杆菌的培养和分离。大肠杆菌的培养和分离。2.分离以尿素为氮源的微生物。分离以尿素为氮源的微生物。3.果汁中的果果汁中的果胶和果胶酶。胶和果胶酶。4.淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测。淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测。1.(2018浙江浙江11月选考节选月选考节选)回答与微生物培养及应用有关的问题:回答与微生物培养及应用有关的问题:(1)对培养基进行高压蒸汽灭菌时,灭菌时间应从对培养基进行高压蒸汽灭菌时,灭菌时间应从_时开始时开始计时。对于不耐热的液体培养基,一般可将其转入计时。对于不耐热的液体培养基
2、,一般可将其转入G6玻璃砂漏斗中,采用玻璃砂漏斗中,采用_方式可较快地进行过滤灭菌。方式可较快地进行过滤灭菌。(2)与酿造果醋相比,利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋,需增加与酿造果醋相比,利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋,需增加_的过的过程。某醋化醋杆菌培养基由蛋白质胨、酵母提取物和甘露醇组成,其中某露醇的主程。某醋化醋杆菌培养基由蛋白质胨、酵母提取物和甘露醇组成,其中某露醇的主要作用是要作用是_。 (3)为筛选胞外为筛选胞外淀粉酶分泌型菌种,一般从淀粉酶分泌型菌种,一般从_(A.果园树下果园树下B.肉类加工厂周肉类加工厂周围围C.米酒厂周围米酒厂周围D.枯树周围枯树周围)获得土样,用无菌
3、水稀释,涂布到含有淀粉的选择培获得土样,用无菌水稀释,涂布到含有淀粉的选择培养基上培养,一段时间后在培养基表面滴加碘液,可在菌落周围观察到透明的水解圈。养基上培养,一段时间后在培养基表面滴加碘液,可在菌落周围观察到透明的水解圈。若要筛选酶活性较高的菌种,需挑选若干个若要筛选酶活性较高的菌种,需挑选若干个_比值大的菌落,分别利用液体培比值大的菌落,分别利用液体培养基振荡培养进行扩增。然后将培养液离心,取养基振荡培养进行扩增。然后将培养液离心,取_用于检测酶活性。用于检测酶活性。 解析解析(1)由于高压蒸汽灭菌锅的升温升压需要一定时间,而未达设定温度和压力将导致由于高压蒸汽灭菌锅的升温升压需要一定
4、时间,而未达设定温度和压力将导致灭菌不彻底,因此对培养基进行高压蒸汽灭菌时,灭菌时间应从达到设定的温度或压力灭菌不彻底,因此对培养基进行高压蒸汽灭菌时,灭菌时间应从达到设定的温度或压力值时开始计时。对于不耐热的液体培养基,如尿素培养基,一般可将其转入值时开始计时。对于不耐热的液体培养基,如尿素培养基,一般可将其转入G6玻璃砂漏玻璃砂漏斗中过滤灭菌,采用抽滤方式可加快过滤速度。斗中过滤灭菌,采用抽滤方式可加快过滤速度。(2)相比果醋制作中先利用葡萄糖进行酒相比果醋制作中先利用葡萄糖进行酒精发酵,再进行醋酸发酵,以淀粉为原料制醋,需增加淀粉分解成糖的过程。醋化醋杆精发酵,再进行醋酸发酵,以淀粉为原
5、料制醋,需增加淀粉分解成糖的过程。醋化醋杆菌培养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成,其中甘露醇的主要作用是作为碳源。菌培养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成,其中甘露醇的主要作用是作为碳源。 (3)结合生物具有适应性的规律,米酒厂周围的淀粉量相对较多,因此存在可分泌结合生物具有适应性的规律,米酒厂周围的淀粉量相对较多,因此存在可分泌淀粉酶的分泌型菌种。分泌的淀粉酶的分泌型菌种。分泌的淀粉酶活性越高,数量越多,菌落周围的透明水解淀粉酶活性越高,数量越多,菌落周围的透明水解圈越大。由于水解圈越大,表明淀粉分解量越多,因此水解圈直径与菌落直径比值大圈越大。由于水解圈越大,表明淀粉分解量越多,因此水解
6、圈直径与菌落直径比值大的菌落,分泌的酶活性较高。经液体培养基振荡培养进行扩增后,再将培养液离心,的菌落,分泌的酶活性较高。经液体培养基振荡培养进行扩增后,再将培养液离心,菌种会分布于沉淀,而分泌的胞外酶分布于上清液,可取上清液测定酶活性。菌种会分布于沉淀,而分泌的胞外酶分布于上清液,可取上清液测定酶活性。答案答案(1)达到设定的温度或压力值抽滤达到设定的温度或压力值抽滤(2)将淀粉分解成糖作为碳源将淀粉分解成糖作为碳源(3)C水解圈直径与菌落直径上清液水解圈直径与菌落直径上清液 2.(2018浙江浙江4月选考节选月选考节选)回答与果胶、淀粉等提取和利用有关的问题:回答与果胶、淀粉等提取和利用有
7、关的问题:某植物富含果胶、淀粉、蛋白质和纤维素成分。某小组开展了该植物综合利用的某植物富含果胶、淀粉、蛋白质和纤维素成分。某小组开展了该植物综合利用的研究。研究。(1)果胶提取工艺研究结果表明,原料先经过一段时间沸水漂洗的果胶得率果胶提取工艺研究结果表明,原料先经过一段时间沸水漂洗的果胶得率(提取得提取得到的果胶占原料质量的百分率到的果胶占原料质量的百分率)显著高于常温水漂洗的果胶得率,最主要原因是沸显著高于常温水漂洗的果胶得率,最主要原因是沸水漂洗水漂洗_(A.有助于清洗杂质和去除可溶性糖有助于清洗杂质和去除可溶性糖B.使植物组织变得松散使植物组织变得松散C.使有使有关酶失活关酶失活D.有利
8、于细胞破裂和原料粉碎制浆有利于细胞破裂和原料粉碎制浆)。(2)在淀粉分离生产工艺研究中,为促进淀粉絮凝沉降,添加生物絮凝剂在淀粉分离生产工艺研究中,为促进淀粉絮凝沉降,添加生物絮凝剂(乳酸菌菌液乳酸菌菌液),其菌株起重要作用。为了消除絮凝剂中的杂菌,通常将生产上使用的菌液,采用其菌株起重要作用。为了消除絮凝剂中的杂菌,通常将生产上使用的菌液,采用_,进行单菌落分离,然后将其,进行单菌落分离,然后将其_,并进行特性鉴定,筛选得到纯,并进行特性鉴定,筛选得到纯的菌株。的菌株。(3)在用以上提取过果胶和淀粉后的剩渣加工饮料工艺研究中,将剩渣制成的汁液经蛋在用以上提取过果胶和淀粉后的剩渣加工饮料工艺研
9、究中,将剩渣制成的汁液经蛋白 酶 和 纤 维 素 酶 彻 底 酶 解 处 理 后 , 发 现 仍 存 在 浑 浊 和 沉 淀 问 题 。 可 添 加白 酶 和 纤 维 素 酶 彻 底 酶 解 处 理 后 , 发 现 仍 存 在 浑 浊 和 沉 淀 问 题 。 可 添 加_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 使 果 胶 彻 底 分 解 成 半 乳 糖 醛 酸 , 再 添 加使 果 胶 彻 底 分 解 成 半 乳 糖 醛 酸 , 再 添 加_,以解决汁液浑浊和沉淀问题。,以解决汁液浑浊和沉淀问题。(4)在建立和优化固定化酶反应器连续生产工艺
10、研究中,通常要分析汁液中各种成分的在建立和优化固定化酶反应器连续生产工艺研究中,通常要分析汁液中各种成分的浓 度 和 所 用 酶 的 活 性 , 然 后 主 要 优 化 各 固 定 化 酶 反 应 器 中 的浓 度 和 所 用 酶 的 活 性 , 然 后 主 要 优 化 各 固 定 化 酶 反 应 器 中 的_(答出答出2点即可点即可)、反应、反应pH和酶反应时间等因素。其中,酶反和酶反应时间等因素。其中,酶反应时间可通过应时间可通过_来调节。来调节。解析本题考查选修一酶的应用,试题侧重与社会生产中利用酶的相关内容结合。果解析本题考查选修一酶的应用,试题侧重与社会生产中利用酶的相关内容结合。果
11、胶酶活性受温度、胶酶活性受温度、pH或酶抑制剂的影响。固定化酶就是将水溶性的酶用物理或化学的或酶抑制剂的影响。固定化酶就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质方法固定在某种介质(如石英砂如石英砂)上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。常用方上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。常用方法有吸附法、共价偶联法等。法有吸附法、共价偶联法等。答案答案(1)C(2)划线分离法划线分离法(或涂布分离法或涂布分离法)扩大培养扩大培养(3)果胶酶和果胶甲酯酶淀粉酶使淀粉分解果胶酶和果胶甲酯酶淀粉酶使淀粉分解(4)固定化酶的量、反应液温度控制反应器液体流量固定化酶的量、反应液温度控制反应器液体流量(
12、或体积或体积) 3.(2017浙江浙江4月选考节选月选考节选)制作泡菜时,为缩短发酵周期,腌制前可加入乳酸菌。取少制作泡菜时,为缩短发酵周期,腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶,用无菌蒸馏水稀释后,再用量酸奶,用无菌蒸馏水稀释后,再用_蘸取少量的稀释液,在蘸取少量的稀释液,在MRS乳酸菌专乳酸菌专用培养基的平板上划线,以获得乳酸菌单菌落。下图所示的划线分离操作,正确的用培养基的平板上划线,以获得乳酸菌单菌落。下图所示的划线分离操作,正确的是是_。 解析取少量酸奶,用无菌蒸馏水稀释后,再用接种环蘸取少量的稀释液,在解析取少量酸奶,用无菌蒸馏水稀释后,再用接种环蘸取少量的稀释液,在MRS乳乳酸菌专用培
13、养基的平板上划线,以获得乳酸菌单菌落。划线分离法从第二次开始每次酸菌专用培养基的平板上划线,以获得乳酸菌单菌落。划线分离法从第二次开始每次都是从上一次划线的末端开始划线,因为线条末端细菌的数目比线条起始处要少,正都是从上一次划线的末端开始划线,因为线条末端细菌的数目比线条起始处要少,正确的是确的是B。答案接种环答案接种环B 4.(2016浙江浙江10月选考节选月选考节选)请回答从土壤中分离产脲酶细菌实验的有关问题:请回答从土壤中分离产脲酶细菌实验的有关问题:(1)LB固体培养基:取适量的蛋白胨、酵母提取液、固体培养基:取适量的蛋白胨、酵母提取液、NaCl,加入一定的量的蒸馏水,加入一定的量的蒸
14、馏水溶解,再加溶解,再加_,灭菌备用。,灭菌备用。(2)尿素固体培养基:先将适宜浓度的尿素溶液,用尿素固体培养基:先将适宜浓度的尿素溶液,用_灭菌过的灭菌过的G6玻璃砂漏斗玻璃砂漏斗过滤,因为过滤,因为G6玻璃砂漏斗玻璃砂漏斗_,故用于过滤除菌,然后将尿素溶液加入到,故用于过滤除菌,然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中,备用。已经灭菌的含有酚红的培养基中,备用。 (3)取适量含产脲酶细菌的取适量含产脲酶细菌的104、105两种土壤稀释液,分别涂布接种到两种土壤稀释液,分别涂布接种到LB固体培养基固体培养基和尿素固体培养基上,培养和尿素固体培养基上,培养48小时,推测固体培养基上生长
15、的菌落数最少的是小时,推测固体培养基上生长的菌落数最少的是_(A.105稀释液尿素固体培养基稀释液尿素固体培养基B.105稀释液稀释液LB固体培养基固体培养基C.104稀稀释液尿素固体培养基释液尿素固体培养基D.104稀释液稀释液LB固体培养基固体培养基)。在尿素固体培养基上产脲。在尿素固体培养基上产脲酶细菌菌落周围出现酶细菌菌落周围出现_,其原因是细菌产生的脲酶催化尿素分解产生,其原因是细菌产生的脲酶催化尿素分解产生_所致。所致。(4)制备固定化脲酶时,用石英砂吸附脲酶,装柱,用蒸馏水洗涤固定化酶柱,其作用制备固定化脲酶时,用石英砂吸附脲酶,装柱,用蒸馏水洗涤固定化酶柱,其作用为为_。 答案
16、答案(1)琼脂糖琼脂糖(2)高压蒸汽孔径小,细菌不能滤过高压蒸汽孔径小,细菌不能滤过(3)A红色环氨红色环氨(4)除去除去游离的脲酶游离的脲酶 5.(2016浙江浙江4月选考节选月选考节选)请回答与请回答与“果汁中的果胶和果胶酶果汁中的果胶和果胶酶”实验有关的问题:实验有关的问题:(1)果胶是细胞壁的重要组成成分,其化学本质是果胶是细胞壁的重要组成成分,其化学本质是_(A.蛋白质蛋白质B.脂质脂质C.核核酸酸D.多糖多糖)。它在细胞壁的形成过程中的主要作用是将相邻的细胞。它在细胞壁的形成过程中的主要作用是将相邻的细胞_在一起。在一起。(2)制取果汁时,先用果胶酶将果胶分解成制取果汁时,先用果胶
17、酶将果胶分解成_和半乳糖醛酸甲酯等物质,再用和半乳糖醛酸甲酯等物质,再用_酶处理,可得到比较澄清的果汁。用适量且浓度适宜的上述两种酶处理时,酶处理,可得到比较澄清的果汁。用适量且浓度适宜的上述两种酶处理时,果汁的出汁率、澄清度与酶的果汁的出汁率、澄清度与酶的_高低呈正相关。高低呈正相关。 (3)由于果胶不溶于乙醇,故可用乙醇对果胶粗提物由于果胶不溶于乙醇,故可用乙醇对果胶粗提物(经酶处理后的混合物经酶处理后的混合物)进行进行_处理,从而得到干制品。处理,从而得到干制品。答案答案(1)D粘合粘合(2)半乳糖醛酸果胶甲酯活性半乳糖醛酸果胶甲酯活性(3)沉淀沉淀 1.正误判断正误判断(1)单菌落的常
18、用分离方法有划线分离法和涂布分离法,其中前者操作简单,且可计单菌落的常用分离方法有划线分离法和涂布分离法,其中前者操作简单,且可计数菌体数目。数菌体数目。( )(2)在划线操作的第一次划线以及之后每次划线之前都要灼烧接种环,在每次划线操在划线操作的第一次划线以及之后每次划线之前都要灼烧接种环,在每次划线操作结束后,也需要灼烧接种环。作结束后,也需要灼烧接种环。 ( )(3)倒平板时将培养皿的盖拿开,以方便将锥形瓶中的培养基倒入培养皿。倒平板时将培养皿的盖拿开,以方便将锥形瓶中的培养基倒入培养皿。 ( )(4)筛选分解尿素的细菌的培养基以尿素为唯一氮源,且为琼脂固体培养基。筛选分解尿素的细菌的培
19、养基以尿素为唯一氮源,且为琼脂固体培养基。 ( )(5)果胶由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成,果胶酶和果胶甲酯酶均可水解果胶。果胶由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成,果胶酶和果胶甲酯酶均可水解果胶。( )(6)将果胶酶用于果汁的生产,既能提高出汁率又能提高果汁的澄清度。将果胶酶用于果汁的生产,既能提高出汁率又能提高果汁的澄清度。( )(7)教材上教材上淀粉酶固定在石英砂上,固定方法为吸附法。淀粉酶固定在石英砂上,固定方法为吸附法。( )(8)酶的固定化方法有吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等,将酶加上糖衣做成胶酶的固定化方法有吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等,将酶加上糖衣做成胶囊属于包埋法
20、。囊属于包埋法。( )2.读图析图读图析图下图是微生物划线分离示意图,划线的顺序是下图是微生物划线分离示意图,划线的顺序是1、2、3、4、5。 图示划线操作共需灼烧接种环图示划线操作共需灼烧接种环_次。第一次灼烧接种环的目的是次。第一次灼烧接种环的目的是_,最后一次灼烧接种环的目的是最后一次灼烧接种环的目的是_,中间几次灼烧接种环的目的是中间几次灼烧接种环的目的是_。 提示提示6避免接种环上可能存在的微生物污染菌种及时杀死接种环上残留的菌种,避免接种环上可能存在的微生物污染菌种及时杀死接种环上残留的菌种,避免菌种污染环境和感染操作者杀死上一次划线结束后接种环上残留的菌种,使下避免菌种污染环境和
21、感染操作者杀死上一次划线结束后接种环上残留的菌种,使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端一次划线时接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端 考点考点1结合大肠杆菌的培养和分离考查科学实践能力结合大肠杆菌的培养和分离考查科学实践能力1.下图为下图为“大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离”实验的基本流程:实验的基本流程: 请回答:请回答:(1)培养基灭菌常用培养基灭菌常用_法,灭菌后,要待法,灭菌后,要待_时才能打时才能打开锅盖。开锅盖。(2)倒平板和接种前要用倒平板和接种前要用_擦手。接种和划线前使用擦手。接种和划线前使用_的方法对接种环的方法对接种环灭菌。灭菌。(3)划线分
22、离时,接种环在菌液中蘸取划线分离时,接种环在菌液中蘸取_次。下图甲表示在平板培养基上的第一次。下图甲表示在平板培养基上的第一次和第二次划线,请在乙图中画出第三次划线。次和第二次划线,请在乙图中画出第三次划线。 (4)划线后在恒温培养箱中培养时,培养皿须倒置,目的是划线后在恒温培养箱中培养时,培养皿须倒置,目的是_。(5)实验完成后,接触过细菌的器皿应如何处理?实验完成后,接触过细菌的器皿应如何处理?_。 解析此题考查大肠杆菌的培养和分离过程,具体分析如下:解析此题考查大肠杆菌的培养和分离过程,具体分析如下:(1)对培养基进行的灭菌对培养基进行的灭菌应该是用灭菌锅进行高压蒸汽灭菌。灭菌后,灭菌锅
23、内的压力与大气压相同时,才能应该是用灭菌锅进行高压蒸汽灭菌。灭菌后,灭菌锅内的压力与大气压相同时,才能打开锅盖,否则会造成培养液溅出。打开锅盖,否则会造成培养液溅出。(2)在进行实验操作时,操作者的双手要用酒精棉在进行实验操作时,操作者的双手要用酒精棉球擦拭消毒,接种环要用火焰灼烧灭菌。球擦拭消毒,接种环要用火焰灼烧灭菌。(3)划线分离时,接种环在菌液中蘸取菌液划线分离时,接种环在菌液中蘸取菌液1次然后连续划线。次然后连续划线。(4)在培养时,培养皿须倒置,目的是防止冷凝后形成的水滴落在培在培养时,培养皿须倒置,目的是防止冷凝后形成的水滴落在培养基上污染培养基,冲散菌落。养基上污染培养基,冲散
24、菌落。(5)实验完成后,接触过细菌的器皿应灭菌处理以防止实验完成后,接触过细菌的器皿应灭菌处理以防止污染。污染。 答案答案(1)高压蒸汽灭菌灭菌锅内压力与大气压相同高压蒸汽灭菌灭菌锅内压力与大气压相同(2)酒精棉球酒精棉球(酒精灯火焰上酒精灯火焰上)灼烧灼烧(3)1(见下图见下图) (4)防止冷凝后形成的水滴落在培养基上污染培养基防止冷凝后形成的水滴落在培养基上污染培养基(5)接触过细菌的器皿应作灭菌处理接触过细菌的器皿应作灭菌处理(1)常见无菌操作技术常见无菌操作技术 提醒:为防止葡萄糖高温分解碳化,含有葡萄糖的培养基要用提醒:为防止葡萄糖高温分解碳化,含有葡萄糖的培养基要用500 g/cm
25、2压力压力(90 以上以上)灭菌灭菌30 min。尿素等加热会分解的物质,不能加热灭菌,只能用。尿素等加热会分解的物质,不能加热灭菌,只能用G6玻玻璃砂漏斗过滤。璃砂漏斗过滤。方法方法灼烧灭菌灼烧灭菌高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌酒精消毒酒精消毒适用适用对象对象接种环等金属接种环等金属用具用具培养皿等玻璃用具、接种环等培养皿等玻璃用具、接种环等金属用具、培养基等金属用具、培养基等双手、操作桌面双手、操作桌面等等(2)微生物分离的两种常用方法微生物分离的两种常用方法比较比较划线分离法划线分离法涂布分离法涂布分离法工具工具接种环接种环玻璃刮刀玻璃刮刀原理原理通过接种环在琼脂固体培养通过接种环在琼脂固体培
26、养基表面连续划线的操作,将基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。在数次划线后培养基表面。在数次划线后培养,可以分离到由一个细培养,可以分离到由一个细菌细胞繁殖而来的肉眼可见菌细胞繁殖而来的肉眼可见的细胞群体,即菌落的细胞群体,即菌落将菌液进行一系列的梯度稀释,然将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细菌一起的微生物将被分散成单个细菌细胞,从而能在培养
27、基表面形成单细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落个的菌落特点特点方法简单,但不适宜计数方法简单,但不适宜计数单菌落更易分开,可以计数,单菌落更易分开,可以计数,但操作复杂但操作复杂培养培养结果结果目的目的使培养基上形成单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群体使培养基上形成单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群体菌落菌落考点考点2围绕分离以尿素为氮源的微生物考查科学实践能力围绕分离以尿素为氮源的微生物考查科学实践能力2.下图是下图是“分离以尿素为氮源的微生物分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程,请回答下列问题:实验的基本流程,请回答下列问题:(1)该实验培养基不能含有该实验培养基不能含有_(A.尿素尿素B
28、.氯化钠氯化钠C.葡萄糖葡萄糖D.琼脂琼脂)。(2)尿素溶液可用尿素溶液可用_使之无菌。若要检查使之无菌。若要检查B过程灭菌是否彻底,可以采过程灭菌是否彻底,可以采用的方法是用的方法是_。(3)图中步骤图中步骤C为为_。相对于划线分离法,过程。相对于划线分离法,过程D涂布分离法的优点是涂布分离法的优点是_。(4)如果菌落周围出现如果菌落周围出现_色环带,说明该菌落能分泌脲酶。色环带,说明该菌落能分泌脲酶。 解析解析(1)分离以尿素为氮源的微生物,应该以尿素为唯一氮源,所以不应有琼脂,因分离以尿素为氮源的微生物,应该以尿素为唯一氮源,所以不应有琼脂,因为琼脂是未被纯化的混合物,内含一定量的含氮化
29、合物。为琼脂是未被纯化的混合物,内含一定量的含氮化合物。(2)尿素加热分解,不能够加尿素加热分解,不能够加热灭菌,只能用热灭菌,只能用G6玻璃砂漏斗过滤除去细菌等微生物。将空白培养基放在适宜温度下玻璃砂漏斗过滤除去细菌等微生物。将空白培养基放在适宜温度下培养一段时间,若无菌落出现,则说明培养基灭菌彻底。培养一段时间,若无菌落出现,则说明培养基灭菌彻底。(3)图中步骤图中步骤C为倒平板,相为倒平板,相对于划线分离法,涂布分离法更容易获得单菌落。对于划线分离法,涂布分离法更容易获得单菌落。(4)若菌落能分泌脲酶,则菌落周围若菌落能分泌脲酶,则菌落周围会出现红色环带。会出现红色环带。答案答案(1)D
30、(2)G6玻璃砂漏斗过滤将空白培养基放在适宜温度下培养一段时间,观玻璃砂漏斗过滤将空白培养基放在适宜温度下培养一段时间,观察有无菌落出现察有无菌落出现(3)倒平板单菌落更易分开倒平板单菌落更易分开(4)红红 (1)本实验用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基。琼脂是未被纯化的混合物,内含一定本实验用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基。琼脂是未被纯化的混合物,内含一定量的含氮化合物,不利于以尿素为氮源的细菌的筛选。量的含氮化合物,不利于以尿素为氮源的细菌的筛选。(2)因尿素加热分解,本实验配制尿素固体培养基时,需先高压蒸汽灭菌,冷却至因尿素加热分解,本实验配制尿素固体培养基时,需先高压蒸汽灭菌,冷却至60 时
31、再加入通过时再加入通过G6玻璃砂漏斗过滤的尿素溶液。玻璃砂漏斗过滤的尿素溶液。(3)微生物筛选过程中必要的两种对照培养基及其作用微生物筛选过程中必要的两种对照培养基及其作用筛选微生物时,除选择培养基外,还需设置两组对照培养基,以提高实验的说服力筛选微生物时,除选择培养基外,还需设置两组对照培养基,以提高实验的说服力和科学性。和科学性。 对照培养基对照培养基作用作用现象现象未接种的培养未接种的培养基基有无杂菌污染有无杂菌污染的判断的判断未接种的培养皿中无未接种的培养皿中无菌落生长菌落生长接种的全营养接种的全营养培养基培养基选择培养基有选择培养基有无筛选作用的无筛选作用的判断判断全营养培养基上的菌
32、全营养培养基上的菌落数大于选择培养基落数大于选择培养基上的数目上的数目选择培养基具有选择培养基具有筛选作用筛选作用考点考点3结合果汁中的果胶和果胶酶考查科学实践能力结合果汁中的果胶和果胶酶考查科学实践能力3.(2018学军中学学军中学3月模拟月模拟)回答下列有关果胶、果汁和果胶酶等问题。回答下列有关果胶、果汁和果胶酶等问题。(1)果胶是植物细胞壁的主要成分,起着将植物细胞果胶是植物细胞壁的主要成分,起着将植物细胞_在一起的作用。制在一起的作用。制作果汁时可加入果胶酶和作果汁时可加入果胶酶和_以分解果胶,提高果汁出汁率和澄清度。以分解果胶,提高果汁出汁率和澄清度。(2)生产果胶酶可从黑曲霉中提取
33、,下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是生产果胶酶可从黑曲霉中提取,下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是_(A.蛋白胨和酵母提取物培养基蛋白胨和酵母提取物培养基 B.尿素固体培养基尿素固体培养基C.MS培养基培养基D.添加蔗糖的豆芽汁培养基添加蔗糖的豆芽汁培养基)。由于果胶酶溶于水,不利于重复使用,可通过物理。由于果胶酶溶于水,不利于重复使用,可通过物理或化学方法将果胶酶固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有或化学方法将果胶酶固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有_的的制剂。制剂。 ( 3 ) 用 果 汁 制 作 果 酒 , 以 果 汁 为 原 料 , 加 入 一 定 比 例 的 蔗 糖 目 的 是
34、用 果 汁 制 作 果 酒 , 以 果 汁 为 原 料 , 加 入 一 定 比 例 的 蔗 糖 目 的 是_。最后倒入酵母悬液,混匀,加盖;发酵开始时,由于微生物的需氧呼吸会使发酵最后倒入酵母悬液,混匀,加盖;发酵开始时,由于微生物的需氧呼吸会使发酵瓶内出现瓶内出现_,原因是,原因是_。解析解析“细菌喜荤,霉菌喜素细菌喜荤,霉菌喜素”,霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆,霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。用果汁制作果酒时加入一定比例的蔗糖,既可以增加糖的含量,又可芽汁即可。用果汁制作果酒时加入一定比例的蔗糖,既可以增加糖的含量,又可以借助酵母菌将蔗糖转化为酒精而提高果酒的
35、酒精含量。以借助酵母菌将蔗糖转化为酒精而提高果酒的酒精含量。答案答案(1)粘合果胶甲酯酶粘合果胶甲酯酶(2)D酶活性酶活性(3)提高果酒的酒精和糖的含量负提高果酒的酒精和糖的含量负压需氧呼吸消耗氧气,产生的二氧化碳易溶于水压需氧呼吸消耗氧气,产生的二氧化碳易溶于水 考点考点4淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测4.如图是固定化酶反应柱,请回答下列问题:如图是固定化酶反应柱,请回答下列问题: (1)将将淀粉酶溶于水中,再加入石英砂,不时搅拌,这样淀粉酶溶于水中,再加入石英砂,不时搅拌,这样淀粉酶就淀粉酶就可以固定在石英砂上。这种固定化酶的方法称为可以固定在石英砂上。这种固定化酶的方法称为_。30 min后,后,装入如图所示的反应器中,构成固定化酶反应柱,并用装入如图所示的反应器中,构成固定化酶反应柱,并用10倍体积的蒸馏倍体积的蒸馏水洗涤此反应柱,洗涤的目的是水洗涤此反应柱,洗涤的目的是_。洗涤时,。洗涤时,蒸馏水流速蒸
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