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文档简介
1、1会计学d酶固定化蛋白质工程酶固定化蛋白质工程Chem Soc Rev. 2009 Feb;38(2):453-68. Hanefeld U, Gardossi L, Magner E.Anal Chim Acta. 2009 Jan 19;632(1):1-8. Ma J, Zhang L, Liang Z, Zhang W, Zhang Y. 双功能试剂:双功能试剂:常用的是戊二醛常用的是戊二醛 O OH C CH2 CH2 CH2 C H第一篇报道是:戊二醛交联羧肽酶第一篇报道是:戊二醛交联羧肽酶 得到一种分子间得到一种分子间交联的固定化酶交联的固定化酶图 酶分子之间共价交联和与水不溶性
2、载体共价偶联 酶分子;(a)酶分子之间用双功能基团的化学交联试剂相互交联成水不溶性的固定化酶;(b)酶分子被偶联到水不溶性载体上形成水不溶性的固定化酶表 常用于固定化酶的交联剂 交联剂 参考文献戊二醛1316二重氮联苯胺2,2二磺酸17,184,4二氟3,3二硝基二苯砜 19二苯基4,4二硫氰酸2,2二磺酸 201,5二氟2,4二硝基苯 21酚2,4二磺酰氯 223甲氧基二苯基甲烷4,4二异氰酸盐 23比较项目吸附法结合法 交联法包埋法物理吸附.共价键结合离子键结合 制备难易易难易 较难较难固定化程度弱强中等 强强活力回收率较高低高 中等高载体再生可能不可能可能 不可能不可能费用低高低 中等低
3、底物专一性不变可变不变 可变不变适用性酶源多较广广泛 较广小分子底物、药用酶化学偶联酶酶固定化固定化间歇间歇可溶可溶交联包埋吸附间歇间歇连续连续图 生物催化剂作用方式示意固定化酶在工业生产上的应用乙酰乙酰 -DL Ala L Ala +乙酸乙酸乙酰乙酰 -D AlaAminoacylase 氨氨 基基 酰酰 化化 酶酶泵泵储罐反应产物离心机离心机消消旋旋反反应应器器固定化酶柱子晶体 L-AlaL-Ala A-D-AlaA-L-Ala A-D-AlaCHCOOCH3NH2CHCOOHNH2CHCONHNSOCOOHCH3NH2H2NNSOCOOHCH3+H2NNSOCOOHCH3+Esterase HydrolaseSynthetase
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