医疗器械微生物基础知识及操作

1、医疗器械检测微生物基础知识及操作品管部 *前言 微生物广泛存在于自然界中，可谓是到处有菌。在无菌医疗器械的生产过程中，由于医疗器械的多样性与复杂性，即使在标准制造状态下生产的产品，仍可能有微生物的污染。因此，了解和掌握微生物方面的有关知识，将有助于生产过程中微生物的控制和医疗用品质量的提高。第一节 微生物及其种类一、微生物 在自然界里，有许多肉眼看不到的、需用光学显微镜或电子显微镜才能观察到的微小生物，这类生物称为微生物。 尽管微生物很小，但均有其一定的形态结构和生理功能，对外环境适应性极强，生长繁殖迅速，且广泛存在于空气、土壤、水及动植物的有机体中。 第一节 微生物及其种类二、微生物五大共性

2、体积小，面积大；吸收多，转化快；生长旺，繁殖快；适应强，异变异；分布广，种类多。第一节 微生物及其种类三、微生物的种类 微生物的种类有10万种以上。按其结构、组成等差异，可分为3大类（一）非细胞型微生物体积微小，能通过滤菌器；只能在活细胞内生长繁殖。如病毒，就是形体最微小，结构最简单的微生物。（二）原核细胞型微生物仅有原始核，无核仁和核膜；缺乏完整的细胞器。这类微生物有细菌、衣原体、立克次体、螺旋体和放线菌。（三）真核细胞型微生物细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体；胞浆内有完整的细胞器。真菌是真核型微生物。霉菌属此类型。第二节 细菌的形态和基本结构一、细菌的形态与大小 细菌在一定的条件

3、下，可分为球菌、杆菌、弧菌或螺形菌，见图1。其体积微小，但大小不一。通常以m作为测量单位。一般球菌的直径约为0.81.2m，大球菌的直径可达2m；杆菌长约23m，宽0.30.5m；螺形菌长150m，宽0.3-1m。能产生芽胞的菌比一般不产芽胞菌要大些。 细菌以无性分裂方式繁殖，1个细菌分裂成2个细胞，2个细胞互相脱离为2个个体，再由2个分裂为4个，4个分裂成8个，如此连续不断裂殖。1个菌在十几分钟或12 h就分裂1次。因此细菌接种在含有营养成分的固体培养基上，经过1824h的生长繁殖，即有几十亿个菌云集在一起，出现称为肉眼可见的菌落群体（CFU）。 第二节 细菌的形态和基本结构图1各种细菌的形

4、态 1葡萄球菌2各种双球菌3链球菌4四联球菌5八叠球菌6球杆菌 7链杆菌8弧菌9螺形菌第二节 细菌的形态和基本结构二、细菌的基本结构 细菌虽小，但有一定构造。细胞壁、细胞膜、细胞质、核质等是各种各样细菌细胞均有的基本结构。而荚膜、鞭毛、芽胞、菌毛等仅某些细菌具有, 是细菌的特殊结构。 (一) 细胞壁 细胞壁位于菌体的最外层，是一层无色透明的薄膜，坚韧并富有弹性，其总量为细菌干重的1025%。其功能是使细菌保持一定的外形，并起保护菌体的作用。它的化学组成主要是肽聚糖等蛋白质、类脂质和多糖等复合物。但随菌体不同而有差异。如大肠杆菌的细胞壁由类脂-蛋白质组成，金黄色葡萄球菌的细胞壁由甘油、磷酸、蛋白

5、质组成。第二节 细菌的形态和基本结构两类细胞壁的特征比较 特特 征征G+G+细菌细菌 G G细菌细菌 肽聚糖 层厚 层薄类脂 极少脂多糖外膜缺有 壁质间隙 很薄较厚细胞状态僵硬僵硬或柔韧 酸消化的效果 原生质体原生质球对染料和抗生素的敏感性 很敏感 中度敏感第二节 细菌的形态和基本结构第二节 细菌的形态和基本结构(二)细胞膜 细胞膜又称细胞质膜, 位于胞壁之内，紧包于细胞质，它由双层磷脂和蛋白质镶嵌排列而成。其化学组成主要为脂类、蛋白质和核糖核酸。它具有半透性，与细胞壁一起维持细胞的通透性，具有物质转运与营养、调节菌体内外环境平衡的功能。(三)细胞质 细胞质是细菌的基础物质，呈溶胶状态，为细菌

6、进行新陈代谢的重要场所。基本成分为水(细菌质量70%是水)、蛋白质、核酸（核糖核酸及去氧核糖核酸）和脂类，也含有少量的糖和无机盐。并含有一系列的酶系统。进行合成、分解、氧化、还原反应，更新细胞内部结构和成分，维持菌体的生长、代谢等活动。第二节 细菌的形态和基本结构 (四)核质 细菌的细胞核沒有核膜、核仁，沒有固定形态，这是原核生物和真核生物的主要区别。 由于细菌的核比较原始, 故一般细菌的核称原始形态的核戓称拟(类)核。细菌核物质的主要成分是脱氧核糖核酸(DNA), 它实际上是与高等生物细胞核功能相似的核物质, 故又称染色质体或细菌染色体, 还有蛋白质、磷脂、糖元和酶类等。它控制着细菌的各种遗

7、传性状，在繁殖活动中起着重要作用，细菌的裂殖，首先从细胞核开始，然后再形成细胞膜和细胞壁。第二节 细菌的形态和基本结构(五)细胞壁外部结构 有些细菌细胞壁外有多种结构，主要包括荚膜、菌毛、鞭毛和芽胞等，其功能主要是提供保护、黏附物体和细胞运动。在无菌医疗器械生产中具有意义的是芽胞结构。第二节 细菌的形态和基本结构 某些细菌，生长到一定时期或当外环境条件恶劣时，菌体失去大部分水分，细胞浆逐渐浓缩，形成圆形或椭圆形的特殊结构，称芽胞。芽胞可位于中央或末端，有的比菌体大，有的比菌体小，这些特征在产芽胞的菌中具有鉴别意义。第二节 细菌的形态和基本结构第二节 细菌的形态和基本结构 因此，在日常的消毒灭菌

8、中，均选择芽胞菌作为生物指示剂。 如辐照灭菌中，选择短小杆菌芽胞；热力灭菌中，以嗜热脂肪杆菌芽胞作为判定灭菌效果的指标。第三节细菌的生长条件、代谢与营养一、细菌的生长条件(一) 营养物质 营养物质是细菌新陈代谢和生命活动的物质基础。细菌的营养物质主要有水、氮源、碳源、无机盐及生长因子等，细菌依靠这些物质合成菌体成分，获得所需能量及调节新陈代谢。细菌是单细胞生物，营养的摄取和吸收，主要依靠细胞膜的功能来完成。(二)酸碱度 一般细菌的生长最适酸碱度(pH)为7.27.6，少数菌需在较酸或较碱的环境中生长繁殖。第三节细菌的生长条件、代谢与营养(三)温度 温度是细菌生长的重要因素之一，各种细菌的适宜温

9、度范围相差很大，据此而有嗜热(52)、嗜温及嗜冷菌之分。大多为嗜温菌(1540)，一般细菌的培养采用37。各国药典规定需氧、厌氧菌30-35 ;霉菌20-25 。我国药典2015版终于与国际接轨。(四)气体 与细菌生长繁殖有关的气体主要有氧气和二氧化碳。第四节 细菌的人工培养一、微生物的分离和纯培养 了解了细菌生长的条件，即可采用人工的方法培养细菌，以利更好地研究、控制微生物。如车间内空气中微生物的测定，医疗用品初始污染菌的计数，生产人员手等卫生学调查以及制造环境的菌谱调查，即是利用细菌的生长条件和特性，进行的人工培养。 微生物通常是肉眼看不到的微小生物，而且无处不在。因此，在微生物的研究及应

10、用中，不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物，而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“纯洁”，防止其他微生物的混入。在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染的技术被称为无菌技术(aseptic technique) 它是保证微生物学研究正常进行的关键。第四节 细菌的人工培养(一) 培养方法 细菌的培养只需提供充分的营养，合适的pH、温度和必要的气体环境，细菌即可生长繁殖。通常培养的方法是将细菌接种适当的培养基上，37温箱培养1824 h，即可用肉眼观察细菌生长的情况。 用固体培养基分离纯培养1、稀释倒平板法(pour plate method)2、涂布平板法

11、(spread platemethod)3、平板划线分离法(streak plate method)4、稀释摇管法(dilutlon shake culture method)第四节 细菌的人工培养(二)培养基 按其用途可分为下列4大类。1、基础培养基：含细菌所需要的基本营养成分，可供多数细菌使用。主要有牛肉膏(0.3)、蛋白胨(1)、氯化钠 (0.5)、磷酸盐和水等配制而成，pH 7.27.6，此为液体培养基。若加入凝固剂，如23琼脂，使其固态化，即为固体培养基，细菌经接种后可形成肉眼可见的菌落。如营养琼脂培养基。 若加0.10.5琼脂，则为半固体培养基。常用于观察细菌动力或保存菌种；如普通

12、肉汤半固体培养基。第四节 细菌的人工培养2、 营养培养基：在基础培养基中加入特殊营养物质，如血液、腹水、葡萄糖等，以供某些细菌的特殊营养要求。如血平板等。3、选择培养基：利用细菌对某类化学物质敏感性不同，选择性抑制某些细菌，而有利于欲选细菌的生长，从而达到分离的目的。如水质检查中的品红亚硫酸钠培养基，伊红美蓝培养基等。4、鉴别培养基：各细菌具不同的生化反应特性，可利用鉴别培养基加以区别，如糖发酵试验用的含糖含指示剂培养基，硫化氢生成试验用的醋酸铅培养基等。第四节 细菌的人工培养按培养基状态可分为下列3类。1、固体培养基(solid medium)在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态

13、即为固体培养基。固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏等。 2、半固体培养基(semisolid medium)半固体培养基中凝固剂的含量比固体培养基少，培养基中琼脂含量一般为0.2%0.7%。半固体培养基常用来观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定等。3、液体培养基(liquid medium) 液体培养基中未加任何凝固剂。在用液体培养基培养微生物时，通过振荡或搅拌可以增加培养基的通气量，同时使营养物质分布均匀。液体培养基常用于大规模工业生产以及在实验室进行微生物的基础理论和应用方面的研究。 第四节 细菌的人工培养(三)细菌在培养基中的生长情况 将细菌接种到液体培

14、养基中，大多数的细菌生长呈现均匀浑浊的状态，少数呈链状的细菌可呈沉淀生长，专性需氧菌多生长在液体表面，形成菌膜。 在半固体培养基上，无动力(无鞭毛)的细菌可沿穿刺线生长，呈明显的线形，周围培养基仍透明澄清。有鞭毛的细菌可向穿刺线四周运动弥散，呈羽状或云雾状浑浊生长，穿刺线模糊不清。故半固体培养基可用于检查细菌有无动力。第四节 细菌的人工培养 单个细菌（或其他微生物）细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落，我们称之为菌落。一般情况下，1个菌落由1个单独细菌经不断分裂繁殖堆积而成，故1个菌落属1个细菌的后代，是纯种。 由于细菌种类、菌龄以及培养基的

15、成分等因素的不同，菌落的形态、大小、色泽也不一样。因此，菌落的形态特征是识别各种细菌的主要依据之一。另外，根据培养基上菌落的数目，也可计算样品(水、物体表面、空气等)中的活细菌数（cfu/mL）。 菌落形成单位（CFU，Colony-Forming Units）指单位体积中的细菌群落种数。第四节 细菌的人工培养第四节 细菌的人工培养第四节 细菌形态的检查 根据细菌形态、结构和染色反应性可大致决定其种属，因此，细菌形态学检查是细菌分类和鉴定的基础。如革兰染色后，可分辨出细菌是革兰阳性菌还是阴性菌，是球菌还是杆菌，能否形成芽胞(因芽胞壁厚、折光性强、不易着色等，故可在显微镜下加以识别)。所以，此法

16、可协助查明车间、医疗用品及各种操作环节的常见污染菌。如污染了形成芽胞的细菌，由于该型菌类抵抗力强，必须采用灭菌剂进行灭菌处理。稀释度选择及菌落总数报告方式第四节 细菌形态的检查一、检查工具显微镜 一般形态学检查中，最常用的是显微镜。它是采用自然光或灯光为光源，其波长0.4 m，在最佳的条件下，显微镜分辨率为波长的一半，即为0.2m。而肉眼所能看到的最小影像为0.2 mm 。故在普通显微镜下用油镜放大1000倍，可将0.2m的微粒放大成0.2mm，能使人眼所见。一般细菌都大于0.2m，在普通显微镜下均可清楚看到。为提高观察效果，观察更小的微生物，还可用暗视野显微镜、荧光显微镜及电子显微镜等。 第

17、四节 细菌形态的检查二、不染色标本的检查 为观察生活状态下细菌的形态及运动情况，可直接采用不染色标本。一般常用悬滴法(将涂有标本凹玻片覆以盖玻片)或压滴法(将菌液放于载玻片上，以盖玻片压住)，用普通显微镜观察。如用暗视野或相差显微镜则效果更好。检查动力时，须注意区别细菌真正的运动与分子运动(或称原地颤动的布朗运动)。三、染色标本的检查 如上所述，细菌形态、排列以及特殊结构等，各菌各有其特点，这对鉴别细菌具有一定帮助，但必须借助光学显微镜和染色方法，因为菌体是无色半透明，而且某些部分如鞭毛等，不经染色是看不到的。第四节 细菌形态的检查 细菌的蛋白质是兼性电解质，在不同的pH时可带不同的电荷，在等

18、电点时所带阳电与阴电相等。细菌的导电点较低，革兰阳性菌的等电点为pl 23，阴性菌为pl 45， 故在近于中性的环境中，多带阴电，易与带阳电的碱性染料结合而着色。因此，细菌染色多用碱性苯胺染料，如美蓝、碱性复红、龙胆紫等。 染色法分为单染与复染两种。单染只用1种染料染色，如美蓝、复红，可观察细菌大小、形态与排列形状，但由于细菌均染成同一颜色，不能鉴别。复染采用2种以上染料染色，可将菌染成不同颜色，便于鉴别细菌。常用者有革兰染色法(Grams Stain)等。 第四节 细菌形态的检查附：革兰染色法附：革兰染色法涂片涂片：用纱布擦净玻璃片，以无菌接种环取一小滴无菌生理盐水，然后用无菌接种环挑取少数

19、菌苔(落)或液体培养基培养物(不必加盐水)，在玻璃片中央涂成一薄膜。干燥：干燥：涂片后放室温中自然干燥。固定：固定：将玻片迅速通过火焰3次(其目的是杀死细菌)，使菌体与玻片粘附牢固，以及改变对染料的通透性。初染：初染：滴加结晶紫染液于已固定的玻片上，染1 min，水洗。媒染：媒染：滴加碘液，作用1 min，水洗。脱色：脱色：加95酒精于涂片上，轻轻摇动78次，使均匀脱色至涂面无紫色或稍成淡紫色，立即水洗。第四节 细菌形态的检查复染：复染：用石炭酸复红稀释液染0.5min，水洗，用滤纸吸干。于涂片上滴加少许香柏油，镜检。镜检：镜检：用油镜观察标本时，先以低倍镜对光，光线宜强，并开大光圈升高集光器

20、。从侧面转动选择油镜头，将油镜头浸于涂片油内，然后由接目镜中观察物象，观察时可先调粗调节器，当看到物像时，再旋转细调节器，直至物像清晰为止。结果：结果：菌体呈紫色者为革兰阳性；呈红色者为革兰阴性。 (注：显微镜是较贵重的仪器设备，宜轻巧操作，并按说明书规定的方法使用和保养。油镜是显微镜中最宝贵的部分，用后一定要立即用擦镜纸拭去油渍。若油干涸，可用二甲苯少许涂于擦镜纸上，擦去油，并将物镜转换成八字形，存放于箱内。)第四节 细菌形态的检查革兰染色液的配制第l液：结晶紫染色液(0.5结晶紫水溶液) 称取2g结晶紫，放入研钵中，加96乙醇4ml，研磨后加400ml蒸馏水即成。第2液：卢戈(Lugol)

21、液。 碘 5 g 碘化钾 l0 g 蒸馏水 400 ml 5碳酸氢钠水溶液 l00 ml 贮于棕色瓶中保存，3 星期以上如变质，要重新配制。第3液(退色剂)：纯酒精或95酒精。第4液(复染液)：一般用10倍稀释萋尔复红液。 1、碱性复红酒精饱和液(称取碱性复红8.16 g，溶于95酒精 l00 ml)； 2、萋尔石炭酸复红液(由碱性复红酒精饱和液l0ml加5石炭酸水溶液90 ml而成)； 3、10倍稀释萋尔复红液(由萋尔炭酸复红液1份加蒸馏水9份配制而成)。第四节 细菌形态的检查附：复红美蓝芽胞染色法1、染色液： (1) 萋纳石炭酸复红液。 碱性复红酒精饱和液(配法同前) 10 ml 5%石炭

22、酸水溶液 90 ml (2)脱色剂：95%乙醇。 (3)复染液：吕氏碱性美蓝溶液。 取美蓝0.3 g，溶于95%酒精30 ml中，再加入蒸馏水100 ml及10%氢氧化钾水溶液01 ml即成。2、染色法： (1) 将涂片在火焰上固定，滴加染色液加热染5 min, (2) 水洗，用脱色剂脱色2 min (3) 以复染液复染1 min，水洗，待干镜检。 (4) 结果：菌体呈蓝色；芽胞呈红色。第五节 微生物在自然界的分布 微生物适应环境的能力很强，在自然界里分布极为广泛，土壤、空气、水、动植物体表以及与外界相通的腔道中，均存在着微生物。 一、土壤中的微生物 土壤里，尤其是开发后的土壤，因含有多种适宜

23、微生物生长繁殖的有机物、水分、空气、无机盐及适当的酸碱度，故能生存多种微生物。土壤中的微生物包括细菌、放线菌、酵母菌、螺旋体、病毒等。其中以细菌含量为最多，占7090%。其次为放线菌和霉菌。据统计，每克肥土含有菌几亿至几十亿个，每克贫瘠的土中也含有几百万至几千万个。人和动物肠道内排泄的微生物可污染土壤。在土壤中的微生物生存时间较长，如具特殊构造的芽胞菌(如破伤风杆菌、炭疽杆菌等)生存时间可达数年或数十年。土壤中的微生物是空气、水中以及环境污染的最重要的来源之一。第五节 微生物在自然界的分布 二、空气中的微生物 空气中的微生物主要来源于土壤或人、动物的呼吸道、口腔。其数量随人的密度、活动程度(尘

24、土被搅动的情况) 以及温度、湿度、风力等因素而异。空气中因缺乏营养物，微生物在其中不能繁殖与久留，只有抵抗力较强的微生物如芽胞杆菌、八叠球菌、葡萄球菌以及真菌(如青霉菌、曲霉菌、毛霉菌等)存活时间较长。 空气携带细菌主要有2 种方式；一是细菌可附着在尘土上(细微颗粒)，长时间浮游在空气中；其二，细菌在人咳嗽、喷嚏、唱歌、讲话、呼吸时通过口腔、鼻腔部喷出的飞沫(大多数飞沫为48m)可长时间浮游在空气中，飞沫的水分蒸发后便成飞沫核，直径缩至 l2m，附着的微生物随气流悬浮不定。空气中微生物是医疗用品制造中引起污染的重要来源之一。因此必须做好空气的清洁卫生和消毒管理工作。第五节 微生物在自然界的分布

25、 三、水中的微生物 河水、池塘水、湖水，甚至地下水均含有微生物。在水中发现的微生物种类繁多，细菌分类学上的47科中就有39科细菌在水中找到。水中微生物大部分来自土壤，一部分来源于空气和动植物体。在多雨季节，地面的微生物被冲入河水中，此时水中的微生物含量大增。一般来讲，地面水因受土壤、人们生活污水、人畜排泄物等污染的机会多，故含有的细菌也较多。池塘和贮水池的水，由于日光中紫外线的作用，微生物随固形颗粒下沉，加之有机物缺乏，原生物的吞食及噬菌体的作用，使细菌数逐渐减少，这叫水的自净作用。水源的污染程度，通常根据大肠杆菌的数目和细菌总数的多少来判定。测知水源的污染程度，对于我们选择水源，用于医疗用品

26、的生产具有重要意义。第五节 微生物在自然界的分布四、正常人体常见的微生物 在人的皮肤和与外界相通的粘膜腔道中，都有微生物的生长繁殖。这些存在于人体各部位的微生物，它们与宿主长期保持着共生与互生的关系，通常称它们为正常菌群或正常人体常居菌。 在正常情况下，正常菌群的存在对人体是有益的。如大肠中大肠杆菌，可以合成核黄素、VB12、维生素K及多种氨基酸等人体不可缺少的营养物质，还能干扰和抵抗其它病原微生物对宿主的侵入。但某些正常菌群，在人体抗力下降，或当一 些微生物异位侵入某些组织时，都可以引起人体疾病，这些细菌通常称条件致病菌。现将人体各部位存在的主要菌群分述如下。第五节 微生物在自然界的分布皮肤

27、菌丛 人皮肤上的细菌体，与个人卫生及环境情况有关。虽然人们经常清洁皮肤，但由于人类不断参加生产活动，频繁接触周围被污染的环境和物体，存在于皮肤深层(如毛囊、汗腺、皮脂腺)的微生物又不易除去，因而在人体排汗降温时，会不断向外排放细菌污染环境（图4）。 图4 皮肤上微生物寄生示意图第五节 微生物在自然界的分布 因此，对于从事医疗用品生产的人员来讲，特别是直接接触医疗用品的部分，必须经常定时清除皮肤表面的微生物（每2小时消毒一次）。一般皮肤常见菌丛有金黄色和白色葡萄球菌、大肠杆菌、类白喉杆菌、八叠球菌、变形杆菌及真菌等。脸、颈部的皮肤，由于手的媒介常污染口鼻部的微生物。皮肤的脂肪和蜡质分泌物内，常有

28、亲脂性酵母。而头皮及光洁无毛的皮肤上可能存在各种癣菌和霉菌。第五节 微生物在自然界的分布呼吸道菌丛 正常人的气管、支气管和肺部基本上是无菌的；鼻腔常见的细菌为金黄色和白色葡萄球菌，类白喉杆菌，草绿色链球菌，鼻咽部含菌较多，常见者为草绿色链球菌和革兰阴性球菌，并有少数类白喉杆菌和葡萄球菌。一些病原微生物如肺炎双球菌、脑膜受双球菌、溶血性链球菌、流感杆菌也常存在于恢复期患者或健康带菌者鼻咽部。所以，有上呼吸道感染症状的人(咽炎、支气管炎、卡他症状如咳嗽、喷嚏)均不宜进洁净工作室。口腔菌丛 口腔中有适宜的温度，并含有食物残渣、脱落上皮和粘液等，是微生物生长繁殖的良好场所。口腔中的细菌种类很多，且数量

29、变化也大。常见的为革兰阳性球菌、奈氏球菌、乳酸杆菌、梭状芽胞杆菌、螺旋体、白色念珠菌、类白喉杆菌。正常谈话时，常见喷出的细菌是腐生的绿色链球菌类。第五节 微生物在自然界的分布 胃肠道菌丛 健康人无食物的胃内通常无菌。唾液及鼻咽分泌物中的细菌随食物进入胃中，或被胃酸杀灭，或很快进入肠道。小肠中菌量很少，主要是肠球菌。大肠因含有已被消化的食物残渣，具有适宜的酸碱度和温度，适宜于细菌的生长繁殖。粪便中细菌量占粪重量的三分之一，且微生物种类很多。少数健康人肠道中带有病原菌，如痢疾杆菌，伤寒杆菌和其他病原性沙门氏菌。这些带菌者能传染他人。故带菌者也不宜进洁净车间。人体细菌分布列于表1。 表表l 正常人体

30、微生物的分布部位正常人体微生物的分布部位 部 位 主 要 微 生 物 的 种 类口腔白色葡萄球菌、绿色链球菌、类白喉杆菌、梭形杆菌、螺旋体、真菌胃一般无菌肠大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、粪链球菌、产气荚膜杆菌、破伤风杆菌、真菌、腺病毒等鼻咽腔葡萄球菌、绿色链球菌、类白喉杆菌、卡答儿球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、副大肠杆菌、变形杆菌、腺病毒尿道（男）前尿道：白色葡萄球菌、类白喉杆菌（女）无菌或少数革兰阳性球菌皮肤葡萄球菌、类白喉杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、真菌阴道乳酸杆菌、白色念珠菌、类白喉杆菌、大肠杆菌外耳道葡萄球菌、类白喉杆菌、绿浓杆菌、非病原性抗酸菌眼结膜白色葡萄球菌、类白喉

31、杆菌、结膜干燥杆菌等第五节 微生物在自然界的分布 了解细菌在自然界的分布，对于理解一次性医疗用品生产过程的卫生学管理，树立无菌观念具有十分重要的意义。到处有菌，迫使我们在生产过程中，需要采取一切方法避免细菌的污染(无菌操作)，采取一切有效措施进行灭菌(综合措施的消毒灭菌如紫外线、化学消毒剂熏蒸以及洁净厂房建造等) ，只有这样才能生产出符合卫生要求的产品。第六节 无菌医疗器械相关术语 无菌无菌是指物体或任一介质中没有活的微生物的存在，即无论用何种方法，检不出活的微生物。灭菌用物理和化学的方法杀灭一切活的微生物（包括病原微生物和非病原微生物，繁殖型或芽孢型微生物）。灭菌剂能杀灭一切微生物的药物，如臭氧、甲醛等。消毒采用物理或化学的方法，消除或杀灭外环境（传播媒介）中的病原微生物或其他有害微生物。消毒剂用于杀灭微生物的化学药物，如碘伏、乙醇、新洁尔灭等。第六节 无菌医疗器械相关术语 洁净室（区）（洁净厂房）需要对尘埃及微生物含量进行控制的房间（区域），其建筑结构、装备及其使用均具有减少对该室（区域）内污染源的介入、产生和滞留的功能。人员净化用室人员在进入洁净室（区）前按一定程序进行净化的辅助用室。物料净化用室物料在进入洁净室（区）前按一定程序进行净化的辅助用室。第七节 几种常见的消毒灭菌法一、紫外线法杀菌原理与作用 紫外线可分为长波段、中波段、短波段3组。以短波段250265nm的