家兔有机磷酸酯类中毒及其解救

1、生理科学实验 第七课： 有机磷酸酯类中毒及其解救 红细胞渗透性和化学性溶血 实验 有机磷酸酯类中毒及其解救实验目的掌握掌握有机磷酸酯类农药中毒有机磷酸酯类农药中毒 症状和中毒原理症状和中毒原理掌握掌握解救药的选择、作用原理、解救药的选择、作用原理、 解救效果并结合临床应用解救效果并结合临床应用实验实验原理原理实验实验步骤步骤注意注意事项事项实验后实验后处理处理乙酰胆碱中枢和外周神经系统的内源性中枢和外周神经系统的内源性神经递质神经递质易被易被胆碱酯酶胆碱酯酶水解水解释放部位：释放部位： 神经突触和神经效应器接头部位神经突触和神经效应器接头部位作用：作用： 激动激动M M胆碱受体和胆碱受体和N

2、N胆碱受体胆碱受体基本原理 有机磷酸酯类胆碱酯酶有机磷酸酯类胆碱酯酶 磷酰化胆碱酯酶磷酰化胆碱酯酶 ( (难水解难水解，无活性，易老化无活性，易老化) ) 有机磷酸酯类中毒原理及症状有机磷酸酯类中毒原理及症状乙酰胆碱乙酰胆碱积聚积聚M M样、样、N N样、中枢神经系统中毒症状样、中枢神经系统中毒症状AchN-RM-R心脏活动的抑制心脏活动的抑制 支气管平滑肌收缩支气管平滑肌收缩 消化腺分泌增加消化腺分泌增加 胃肠道泌尿道平滑肌收缩胃肠道泌尿道平滑肌收缩 汗腺分泌增加汗腺分泌增加 瞳孔括约肌的收缩瞳孔括约肌的收缩 骨骼肌收缩骨骼肌收缩CNS先兴奋不安，继之惊厥、先兴奋不安，继之惊厥、后而转为抑制

3、，出现意识后而转为抑制，出现意识模糊昏迷等模糊昏迷等有有机机磷磷AchE磷酰化磷酰化AchEAchE呼呼 吸吸 困困 难难口口 吐吐 白白 沫沫大大 汗汗 淋淋 漓漓大大 小小 便便 失失 禁禁针针 尖尖 样样 瞳瞳 孔孔骨骼肌纤维震颤骨骼肌纤维震颤 强强 直直 性性 痉痉 挛挛心率减慢、血压下降心率减慢、血压下降水水 解解胆碱胆碱+乙酸乙酸阿托品阿托品碘解碘解磷定磷定磷酰化磷酰化碘碘解解 磷磷 定定水水 解解胆碱胆碱+ +乙酸乙酸抢救原则抢救原则阿托品碘解磷定阿托品碘解磷定联合用药阿托品化缓解症状阿托品化缓解症状尽快复活胆碱酯酶尽快复活胆碱酯酶死亡原因死亡原因呼吸抑制呼吸抑制 呼吸衰竭呼吸衰

4、竭心血管功能衰竭心血管功能衰竭 基本原理阿托品阿托品 （M M胆碱受体阻断药）胆碱受体阻断药）缓解支气管痉挛缓解支气管痉挛减少腺体分泌减少腺体分泌改善呼吸状况改善呼吸状况解除部分中枢神经系统的中毒症状解除部分中枢神经系统的中毒症状碘解磷定碘解磷定 （胆碱酯酶复活药）（胆碱酯酶复活药） 复活胆碱酯酶复活胆碱酯酶 讯速控制肌束颤动讯速控制肌束颤动实验步骤1. 家兔称重家兔称重, , 观察观察: : 正常活动正常活动、呼吸呼吸、瞳孔大小瞳孔大小( (注意光线条件一致注意光线条件一致) )、 唾液分泌唾液分泌、大小便大小便、肌张力及有无肌震颤肌张力及有无肌震颤2. 2. 3.5%3.5%敌百虫敌百虫3

5、 3ml/kgml/kg制备有机磷中毒模型制备有机磷中毒模型 观察观察: : 瞳孔瞳孔、唾液分泌唾液分泌、大小便大小便、骨骼肌活动骨骼肌活动3. 3. 解救，观察解除的症状解救，观察解除的症状 1 1、3 3、5 5组组：先阿托品，：先阿托品，10min10min后解磷定后解磷定 2 2、4 4、6 6组组：先解磷定，：先解磷定，10min10min后阿托品后阿托品 处理处理乙乙兔兔给药前给药前给敌百虫后给敌百虫后给给阿托品阿托品后后给给解磷定解磷定后后甲甲兔兔唾液唾液大小便大小便骨骼肌活动骨骼肌活动瞳孔瞳孔表表1 有机磷中毒及其抢救试验结果有机磷中毒及其抢救试验结果给药前给药前给敌百虫后给敌

6、百虫后给给解磷定解磷定后后给给阿托品阿托品后后1. 测量瞳孔时应注意光线强弱对瞳孔测量瞳孔时应注意光线强弱对瞳孔 大小的影响大小的影响, ,实验前后光源要一致，实验前后光源要一致， 同一方向同一只眼。同一方向同一只眼。2.2.敌百虫溶液有较强的刺激性，静脉敌百虫溶液有较强的刺激性，静脉 注射时要避免药物外漏。注射时要避免药物外漏。3.3.事先准备好抢救工作，中毒症状明事先准备好抢救工作，中毒症状明 显后立即解救。显后立即解救。注意事项实验后处理 结果：结果：P P123123表表9-89-8讨论：列两表讨论：列两表 比较不同用药顺序解救效果差异比较不同用药顺序解救效果差异结论：有效抢救需联合用

7、药结论：有效抢救需联合用药红细胞渗透性和 化学性溶血实验实验目的1.1.掌握掌握测定红细胞渗透脆性及引测定红细胞渗透脆性及引 起红细胞溶解的实验方法起红细胞溶解的实验方法2.2.熟悉熟悉红细胞混悬液的制备方红细胞混悬液的制备方 法和溶血现象的判断法和溶血现象的判断红细胞膜具一定伸展性和弹性，对低渗溶液具一定抵抗力 红细胞渗透脆性红细胞渗透脆性 红细胞于低渗溶液中破裂、解体特性红细胞于低渗溶液中破裂、解体特性渗透抵抗力渗透抵抗力表示方法：表示方法：最小抵抗力（最大脆性）最小抵抗力（最大脆性）刚开始溶血刚开始溶血最大抵抗力（最小脆性）最大抵抗力（最小脆性）刚完全溶血刚完全溶血基本原理实验观察红细胞

8、渗透性溶血：红细胞渗透性溶血：1010管管 红细胞混悬液处于低渗溶液中红细胞混悬液处于低渗溶液中红细胞化学性溶血：红细胞化学性溶血：4 4管管 红细胞混悬液处于有机溶剂、红细胞混悬液处于有机溶剂、 酸、碱中酸、碱中制备红细胞悬液 取家兔动脉血取家兔动脉血2ml2ml，离心，离心5min, 1500r/ min 5min, 1500r/ min 吸弃上清液，加生理盐水混匀离心洗涤吸弃上清液，加生理盐水混匀离心洗涤2 2次次 得洗涤后红细胞得洗涤后红细胞 用生理盐水配成用生理盐水配成30%30%和和3%3%红细胞悬液红细胞悬液 ( (兔红细胞比容兔红细胞比容0.4)0.4) 配配30%30% （2

9、 20.40.4） 0.3 = 2.70.3 = 2.7ml ml 配配3%:3%: 取取30%30%的溶液稀释的溶液稀释1010倍倍按表按表6-96-9滴入滴入30%30%红细胞悬液红细胞悬液2 2滴，轻轻摇匀滴，轻轻摇匀 1 101 10 1010支不同浓度支不同浓度NaClNaCl溶液试管（低溶液试管（低 高）高） 静置静置3030分钟分钟 渗透性溶血实验溶血判断完全溶血完全溶血 管内液体完全管内液体完全红色透明红色透明部分溶血部分溶血 上层上层红色透明红色透明 下层下层红色不透明红色不透明( (混浊混浊) )不溶血不溶血 上层上层浅黄色浅黄色或无色透明或无色透明 下层下层红色不透明红色

10、不透明4 4支试管内各加入支试管内各加入3%3%红细胞混悬液红细胞混悬液1 1mlml分别加入下列溶液分别加入下列溶液2ml/2ml/管，混匀管，混匀 1111号号 0.9%0.9%NaClNaCl 1212号号 氯仿氯仿 1313号号 0.10.1mol/L HClmol/L HCl 1414号号 0.10.1mol/L NaOH mol/L NaOH 静置静置30min30min后观察试管内颜色、透明度和溶血后观察试管内颜色、透明度和溶血情况情况化学性溶血实验注意事项 向试管中滴加红细胞混悬液时要靠向试管中滴加红细胞混悬液时要靠近液面，轻轻滴入，以免冲击力太近液面，轻轻滴入，以免冲击力太大

11、使红细胞破损，造成溶血假象。大使红细胞破损，造成溶血假象。 滴加红细胞混悬液后要轻轻摇匀，滴加红细胞混悬液后要轻轻摇匀，切勿剧烈震荡。静置一段时间后在切勿剧烈震荡。静置一段时间后在光线明亮处观察。光线明亮处观察。实验后处理 结果：结果： P P102102表表6-10 6-10 和和 P P103103表表6-116-11讨论：各因素对红细胞膜的影响及原理讨论：各因素对红细胞膜的影响及原理结论：渗透性溶血结论：渗透性溶血 化学性溶血化学性溶血预习氯丙嗪抗激怒氯丙嗪抗激怒(安定安定)实验实验药物半数有效量药物半数有效量(ED50 )和和 半数致死量半数致死量(LD50)的测定的测定M样症状瞳孔瞳孔 瞳孔括约肌收缩瞳孔括约肌收缩 瞳孔缩小瞳孔缩小 腺体腺体 分泌分泌 流涎流涎、出汗出汗呼吸系统呼吸系统 支气管平滑肌收缩支气管平滑肌收缩, ,腺体分泌腺体分泌 呼吸困难甚至肺水肿呼吸困难甚至肺水肿胃肠道胃肠道 平滑肌收缩平滑肌收缩 恶心恶心、呕吐呕吐、 腹痛腹痛、腹泻腹泻泌尿系统泌尿系统 膀胱逼尿肌收缩膀胱逼尿肌收缩 小便失禁小便失禁心血管系统心血管系统 M M样作用样作用 心率心率 血压血压 同时有同时有N N样作用样作用 血压血压基本原理N样症状