补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识

1、补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1. 掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。2. 通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。3. 掌握香豆素类化合物的检识方法。（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂 为豆科植物补骨脂 Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。含有多种吠喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯 （异补骨脂素）和补骨脂次素等。其中补骨脂素和异补骨脂素为 抗白瘢风的主要有效成分，具有光敏性质。1. 补骨脂素（psoralen） 乂称补骨

2、脂内酯，分子式 C11H6O3,分子量186.16。无色针状结晶（乙醇），mp.189190C,有挥发性。溶丁甲醇、乙醇、苯、氯仿、 丙酮；微溶丁水、乙酰和石油酰。2. 异补骨脂素（isopsoralen）分子式C11H6O3，分子量186.1&无色针状结晶， mp.137138C,溶丁甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶丁水、乙酰，难溶丁 冷石油酰。补骨脂素异补骨脂素3. 补骨脂乙素（isobavachalcone） 乂称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。分子式C20H20O4,分子量324.36。黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166167C。4. 补骨脂甲素（coryfolin）乂称补骨脂

3、黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。无色针状结晶，mp.191192 C补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补 骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等， 并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和 异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。（四）实验内容1 :把20g补骨脂研磨后用50%®冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体 积的乙醇。铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好 15块板。2:用补骨脂素和异补骨脂素的标准品通过 TLC筛选硅胶柱色谱的分离条件。 根据文献，设计了石油酰：乙酸乙酯 10: 1,石油酰：

4、乙酸乙酯8: 1,石油酰: 乙酸乙酯6: 1,石油酰：乙酸乙酯4: 1等几组流动相配比，经过对 Rf值的比 较，最终决定用石油酰：乙酸乙酯 6: 1作为硅胶柱色谱分离的分离系统。把醇 提液减压浓缩至剩下20ml水左右。萃取：浓缩后的混旋液加蒸僻水至100ml,用乙酸乙酯萃取三次。3. 柱色谱分离，采用湿法装柱干法上样4. 检识薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：补骨脂素乙醇液异补骨脂素乙醇液对照品：补骨脂素对照品乙醇液异补骨脂素对照品乙醇液展开剂：石油酰-醋酸乙酯（6 ： 1）显色：紫外灯下观察荧光（五）实验说明及注意事项1 .提取药材应是未炮制过的补骨脂种子，其补骨脂素和异补骨脂素等成分含 量较高。2. 补骨脂素和异补骨脂素含内酯结构，具有内酯类成分的通性，可用碱提酸沉法提取，但因补骨脂种子中含有大量油脂和糖类成分，易与碱水发生皂化反应和形成胶状物，致使难以滤过，降低收得率，故选用50%乙醇提取而不用碱溶酸沉法提取。3. 由补骨脂种子中提取所得的精制品，为补骨脂素和异补骨脂素的混合物 结晶，两者含量近于1 ： 1,但随药材品种、质量等不