关键灭菌设备的验证

1、1各类灭菌方法及验证达标要求各类灭菌方法及验证达标要求2灭灭 菌菌 Sterilization（1）n灭菌方法灭菌方法 sterilization methodn热灭菌热灭菌 heat sterilization n射线灭菌射线灭菌 sterilization with radial n气体灭菌气体灭菌 sterilization with gas n化学灭菌化学灭菌 chemical sterilization n物理方法除菌物理方法除菌 physical sterilization n验证验证 validation n所有所有的工艺过程的工艺过程 all of the steps of t

2、he process n非药典的方法非药典的方法 non-pharmacopoeial method n非非水或油状的溶液水或油状的溶液 non-water or oil-like solution n适宜性和有效性适宜性和有效性 applicability and effectiveness n负载负载的分隔的分隔 compartmentation of load n负载负载的类型的类型 type of load n产品的类型产品的类型 type of product n灭菌的目的灭菌的目的 propose of sterilization 3灭灭 菌菌 Sterilization（2）n生

3、物指示剂生物指示剂 biological indicator n已灭菌已灭菌和没有灭菌产品的不同和没有灭菌产品的不同 the difference between sterilized and non-sterilized productn标示标示 indication n记记录录 Autoclave record 4热热 灭灭 菌菌 Heat sterilizationn每个循环每个循环进行记录进行记录, e.g. 时间时间和温度和温度 record each cycle, e.g. time and temperature n应进行验证最冷点应进行验证最冷点 the most cold p

4、oint should be validated n独立的温度探头独立的温度探头 independent temperature measuring head n指示剂指示剂 indicator n加热阶段加热阶段 the heating phase n每种确定的负载每种确定的负载 each specified load n冷却阶段冷却阶段 cooling phase n没有污染产生没有污染产生 no generation of contamination n容器泄漏容器泄漏 leakage of the container 5湿热灭菌湿热灭菌 Moist heat sterilization

5、n温度、时间和压力监测温度、时间和压力监测 monitoring of the temperature, time and pressure n记录器和控制仪相互独立记录器和控制仪相互独立 recorder and controlling apparatus are independent mutually n独立的指示剂独立的指示剂 independent indicator n排水和泄漏测试排水和泄漏测试 n空气的除去空气的除去 n蒸汽的穿透和蒸汽的质量蒸汽的穿透和蒸汽的质量n负载的所有位置：接触时间，温度负载的所有位置：接触时间，温度n过度灭菌过度灭菌 n培养基灭菌用蒸汽灭菌柜的特殊性培

6、养基灭菌用蒸汽灭菌柜的特殊性6蒸汽灭菌验证蒸汽灭菌验证Validation of steam-sterilization n安装确认安装确认n操作确认：空载热分布操作确认：空载热分布n性能确认：满载热分布，满载热穿透性能确认：满载热分布，满载热穿透n生物指示剂生物指示剂nKAYE验证仪的使用；热电偶的校验；验证仪的使用；热电偶的校验；n验证方法验证方法n验证结果判断验证结果判断n设备管道的灭菌验证设备管道的灭菌验证n再验证再验证nF0值的使用及意义值的使用及意义 存活概率（无菌保证水平）存活概率（无菌保证水平）7蒸汽灭菌柜验证（蒸汽灭菌柜验证（1）Qualification of Steam-

7、sterilizing chambern安装确认：说明书、备品备件、公用工程系统（饱和纯蒸汽的供应压安装确认：说明书、备品备件、公用工程系统（饱和纯蒸汽的供应压力及流量）等；夹套、保温层、蒸汽疏水器；温度控制系统；透气过力及流量）等；夹套、保温层、蒸汽疏水器；温度控制系统；透气过滤器；仪器仪表；热电偶入口通道滤器；仪器仪表；热电偶入口通道n操作确认：安全装置设定；控制系统的确认；泄漏试验；透气过滤器操作确认：安全装置设定；控制系统的确认；泄漏试验；透气过滤器完整型测试完整型测试n空载热分布：目的是证明整个灭菌器中温度的均匀性及灭菌介质的稳空载热分布：目的是证明整个灭菌器中温度的均匀性及灭菌介质

8、的稳定性。连续进行三次。通常选择时间最长的灭菌参数定性。连续进行三次。通常选择时间最长的灭菌参数 热分布确定最冷点，应重复出现；热分布确定最冷点，应重复出现； 温度压力指示仪表与热电偶温度数据的差距；温度压力指示仪表与热电偶温度数据的差距； 同一时间腔内的各点的温差；同一时间腔内的各点的温差； 热电偶布置位置的选择热电偶布置位置的选择 8蒸汽灭菌柜验证（蒸汽灭菌柜验证（2）Qualification of Steam-sterilizing chambern性能确认：满载热分布，装载量应固定，不同负载分别进性能确认：满载热分布，装载量应固定，不同负载分别进行，连续执行三次；行，连续执行三次；n

9、确定系统的最冷点；冷点应重复出现；确定系统的最冷点；冷点应重复出现；n满载生物挑战性试验；满载生物挑战性试验；ATCC7953；n生物指示剂含菌量要求；生物指示剂的培养及培养时间；生物指示剂含菌量要求；生物指示剂的培养及培养时间；n生物指示剂的空白对照生物指示剂的空白对照n生物指示剂的结果判断生物指示剂的结果判断n系统的再验证：验证频率及验证方法系统的再验证：验证频率及验证方法n验证时记录的管制；验证时记录的管制；n冷空气排除阶段、升温阶段、保温（压）阶段、冷却阶段冷空气排除阶段、升温阶段、保温（压）阶段、冷却阶段9蒸汽灭菌柜验证（蒸汽灭菌柜验证（3）Qualification of Stea

10、m-sterilizing chambern几个需要注意的地方几个需要注意的地方n灭菌器的几何中心位置及几个角必须表示出来灭菌器的几何中心位置及几个角必须表示出来n温度探头必须悬挂，不能接触到任何固体表面温度探头必须悬挂，不能接触到任何固体表面n满载热分布时热电偶位置必须与空腔试验相同满载热分布时热电偶位置必须与空腔试验相同 n灭菌内容器中热电偶应放置在上中下三个位置灭菌内容器中热电偶应放置在上中下三个位置n负载热分布验证以前应首先确认负载的最大和最小批量负载热分布验证以前应首先确认负载的最大和最小批量n灭菌时间及灭菌温度对被灭菌物品本身和微生物数量的影灭菌时间及灭菌温度对被灭菌物品本身和微生

11、物数量的影响响n生物指示剂的数据是灭菌效果的最终证明生物指示剂的数据是灭菌效果的最终证明10设备管道灭菌验证设备管道灭菌验证Validation of sterilization of equipments and pipen验证方法与蒸汽灭菌柜基本相同验证方法与蒸汽灭菌柜基本相同n缺少满载热分布缺少满载热分布n管道的灭菌管道的灭菌n生物指示剂的安装方法生物指示剂的安装方法n设备灭菌验证后的处置设备灭菌验证后的处置n员工操作与设备灭菌效果的影响员工操作与设备灭菌效果的影响n其他方面与蒸汽灭菌柜验证相同其他方面与蒸汽灭菌柜验证相同11蒸汽灭菌蒸汽灭菌FDA关注的内容关注的内容FDA attent

12、ion for steam-sterilizationn灭菌器的生产商、灭菌器容积灭菌器的生产商、灭菌器容积n灭菌剂的名称（蒸汽，过热水）灭菌剂的名称（蒸汽，过热水）n夹套的温度和压力夹套的温度和压力n使用的呼吸器的类型（是否是疏水性，滤壳是否被加热）完整性测试频率使用的呼吸器的类型（是否是疏水性，滤壳是否被加热）完整性测试频率n循环控制方法（手动、自控）循环控制方法（手动、自控）n监测及控制探头的类型监测及控制探头的类型n控制器的校验，是否与控制器的校验，是否与NIST一致一致nAutoclave 是否安装蒸汽散发器（多于一个蒸汽进口时）是否安装蒸汽散发器（多于一个蒸汽进口时）n灭菌过程控制

13、参数（时间、温度、压力、压力衰减速率）灭菌过程控制参数（时间、温度、压力、压力衰减速率）n冷点是否被监控冷点是否被监控n其他的特征（空气质量、水质量、警报）其他的特征（空气质量、水质量、警报）n是否蒸汽灭菌后直接对产品进行放行是否蒸汽灭菌后直接对产品进行放行12干热灭菌干热灭菌 Dry heat sterilizationn待灭菌物品的清洗区域环境要求待灭菌物品的清洗区域环境要求n灭菌灭菌腔内空气应保持循环和正压腔内空气应保持循环和正压 n经过经过过滤的空气过滤的空气 n灭菌灭菌温度和时间必须进行记录温度和时间必须进行记录 n如温度如温度适当，可以除去热原适当，可以除去热原 n验证验证 (使用

14、使用内毒素指示剂进行挑战性测试内毒素指示剂进行挑战性测试)13干热灭菌验证干热灭菌验证Dry heat sterilizationn安装确认安装确认n操作确认：空载热分布操作确认：空载热分布n性能确认：满载热分布，满载热穿透性能确认：满载热分布，满载热穿透n生物内毒素指示剂生物内毒素指示剂n验证方法验证方法n验证结果判断验证结果判断n再验证再验证14干热灭菌（去热原）验证干热灭菌（去热原）验证Validation of dry heat sterilization(to eliminate pyrogen)n安装确认：电气控制；安装确认：电气控制；HVAC；进风空气级别通风防止空进风空气级别通

15、风防止空气倒流的方法；门封条；仪器仪表；风门的完整性；润滑剂；风气倒流的方法；门封条；仪器仪表；风门的完整性；润滑剂；风机；过滤器；风扇机；过滤器；风扇n操作确认：温度传感器、记录仪及传感器应经过校准；计时器；操作确认：温度传感器、记录仪及传感器应经过校准；计时器；安全联锁装置；风机；皮带；安全联锁装置；风机；皮带；n空腔温度分布测试，温度分布的均一性空腔温度分布测试，温度分布的均一性n性能确认：满载热穿透测试；生物指示剂（枯草黑色变种杆菌）、性能确认：满载热穿透测试；生物指示剂（枯草黑色变种杆菌）、或内毒素指示剂（或内毒素指示剂（50000内毒素单位以上）挑战性测试内毒素单位以上）挑战性测试

16、n结果判定：灭菌效果生物负荷量降低结果判定：灭菌效果生物负荷量降低6log，内毒素负荷降低内毒素负荷降低3log。15 热热 原原 Pyrogenn使用哪种方法：干热法、超滤法、蒸馏法、化学处使用哪种方法：干热法、超滤法、蒸馏法、化学处理、吸附法、冲洗法理、吸附法、冲洗法n方法应经过验证方法应经过验证n使用使用WFI最最后的清洗最最后的清洗n哪种材料需要除去热原：原材料、包装用容器、无哪种材料需要除去热原：原材料、包装用容器、无菌产品接触表面、生产设备、药品菌产品接触表面、生产设备、药品n内毒素水平如何确定？兔法内毒素水平如何确定？兔法LALn是否所有的除热原方法均能达到是否所有的除热原方法均

17、能达到3log降降16射线灭菌射线灭菌FDA检查涉及到的问题检查涉及到的问题Questions related in FDA inspection for radial-sterilization n射线灭菌器的检查应作为该产品检查的一部分射线灭菌器的检查应作为该产品检查的一部分n应有下列数据：灭菌器的生产商、射线类型（应有下列数据：灭菌器的生产商、射线类型（beta,gamma)、放射源、放射源、剂量计的类型、负载内剂量的分布剂量计的类型、负载内剂量的分布n射线灭菌的地址和名称射线灭菌的地址和名称n灭菌参数：间歇批次（灭菌时间），连续批次（传送速度），剂量速率灭菌参数：间歇批次（灭菌时间），

18、连续批次（传送速度），剂量速率（Mard/hr)，剂量速率的均一性、总剂量（可接受的最大、最小）、剂量速率的均一性、总剂量（可接受的最大、最小）、温度温度n源强发生变化时，如何调整灭菌的时间源强发生变化时，如何调整灭菌的时间n多长时间做一次剂量分布图多长时间做一次剂量分布图n每一个参数是否被监测每一个参数是否被监测n是否根据生物指示剂或剂量计的指示值确定产品的放行是否根据生物指示剂或剂量计的指示值确定产品的放行17射线灭菌（辐射灭菌）射线灭菌（辐射灭菌）Radial-sterilization(radicidation)n更多的适用于医疗器械的灭菌处理更多的适用于医疗器械的灭菌处理nFDA承认

19、承认射线的可靠性优良，对环氧乙烷气相灭菌剂的安全性存在疑问射线的可靠性优良，对环氧乙烷气相灭菌剂的安全性存在疑问n适合于适合于对热敏感的产品和物料对热敏感的产品和物料 n确认确认方法对于物料的适宜性方法对于物料的适宜性 n紫外紫外射线灭菌是不可接受的射线灭菌是不可接受的 n服务合同服务合同 n剂量的计量剂量的计量 n剂量计剂量计 n定量定量测量测量 n数量数量,位置位置和校验和校验n生物指示剂生物指示剂n变色卡片变色卡片18射线灭菌射线灭菌Redial-sterilizationn批记录批记录n验证验证n包装包装的密度的密度n防止混淆防止混淆: 已照射和未照射的物料已照射和未照射的物料 n剂量

20、剂量: 预先确定预先确定的时间范围的时间范围n照射源强度的变化照射源强度的变化n紫外灭菌的适用范围紫外灭菌的适用范围 n被委托单位是生产商管理范围的延伸，应很好的执行被委托单位是生产商管理范围的延伸，应很好的执行cGMP和质和质量控制规程量控制规程19射线灭菌验证射线灭菌验证FDA检查涉及到问题检查涉及到问题Questions related in FDA inspection for radial-sterilizationn剂量设定，是否对每种物料设定了最小的照射剂量剂量设定，是否对每种物料设定了最小的照射剂量n使用那种方法建立灭菌剂量使用那种方法建立灭菌剂量n产品负载模式，每一种产品应建

21、立产品负载模式，每一种产品应建立n剂量分布图剂量分布图n循环时间设定以保证最小灭菌剂量的满足循环时间设定以保证最小灭菌剂量的满足n如果使用生物指示剂：指示剂的类型、来源、微生物的浓度、如果使用生物指示剂：指示剂的类型、来源、微生物的浓度、D值、值、n剂量计如何使用剂量计如何使用20射线灭菌验证射线灭菌验证Validation of radial-sterilizationn安装确认安装确认n操作确认操作确认n性能确认性能确认n生物指示剂的使用生物指示剂的使用n再验证（更换产品、辐射源改进、重新安装）再验证（更换产品、辐射源改进、重新安装）21射线灭菌验证射线灭菌验证Radial sterili

22、zationn灭菌验证应包括：灭菌验证应包括：n保证辐射后产品的安全性且不影响使用保证辐射后产品的安全性且不影响使用n确定适当的辐射剂量，以保证所需要的灭菌程度能稳定的得到保确定适当的辐射剂量，以保证所需要的灭菌程度能稳定的得到保证证n确立辐射器内的辐射循环，以保证预定的辐射剂量能得到稳定的确立辐射器内的辐射循环，以保证预定的辐射剂量能得到稳定的输出输出n钴钴60通常用作辐射源通常用作辐射源n2.5Mrad是对任何产品都适用的标准灭菌剂量是对任何产品都适用的标准灭菌剂量n首先应确认产品是否适和进行辐射处理，最小剂量应保证灭菌要首先应确认产品是否适和进行辐射处理，最小剂量应保证灭菌要求，超过最大

23、剂量可能会引起产品性能的变化求，超过最大剂量可能会引起产品性能的变化22环氧乙烷气体灭菌环氧乙烷气体灭菌Sterilization with gas of ethylene oxiden只有只有在其他方法均不适合时才可以使用在其他方法均不适合时才可以使用 n气气体对产品的的影响体对产品的的影响n抽抽排气排气 (特定特定的时间限度）的时间限度）n直接直接和微生物进行接触和微生物进行接触 n包装材料包装材料的性质和数量的性质和数量 n温湿度温湿度的保持的保持 n每一个循环每一个循环进行监测进行监测 n时间时间，压力，压力 n温度温度，湿度，湿度 n气气体浓度体浓度 23环氧乙烷气体灭菌环氧乙烷气体

24、灭菌Sterilization with gas of ethylene oxiden灭菌后灭菌后的贮存的贮存n通风通风n确定确定残留气体的限度残留气体的限度 n验证过验证过的工艺过程的工艺过程 n安全安全性和毒性方面性和毒性方面 24环氧乙烷气体灭菌环氧乙烷气体灭菌FDA检查内容检查内容FDA inspected content about sterilization with gas of ethylene oxiden灭菌器生产商，内部容积灭菌器生产商，内部容积n灭菌气体的比例组成灭菌气体的比例组成n灭菌气体的分析结果及灭菌气体的分析结果及COAn涉及到产品时灭菌设备的识别涉及到产品时灭

25、菌设备的识别n生物指示剂生物指示剂n灭菌循环参数（真空度、时间、温湿度、操作压力、气体浓灭菌循环参数（真空度、时间、温湿度、操作压力、气体浓度、风扇的使用等）度、风扇的使用等）n参数如何监测参数如何监测n控制规定浓度的灭菌气体进入腔室的方法控制规定浓度的灭菌气体进入腔室的方法n残留水平，如何确保，标准残留水平，如何确保，标准25环氧乙烷气体灭菌验证环氧乙烷气体灭菌验证Validation of sterilization with gas of ethylene oxiden安装确认安装确认n操作确认操作确认n性能确认性能确认n验证文件应包括：空腔温度分布研究、空腔灭菌气体分布研究、验证文件应

26、包括：空腔温度分布研究、空腔灭菌气体分布研究、空腔相对湿度研究、热灭菌器体穿透研究、使用的温湿度及灭空腔相对湿度研究、热灭菌器体穿透研究、使用的温湿度及灭菌气体浓度测量系统、设备的校验（使用前和使用后）、验证中菌气体浓度测量系统、设备的校验（使用前和使用后）、验证中生物指示剂的使用（类型、来源、微生物浓度）生物指示剂的使用（类型、来源、微生物浓度）n每种负载应进行验证每种负载应进行验证n是否直接根据生物指示剂判断灭菌的有效性是否直接根据生物指示剂判断灭菌的有效性n其他类型的气体灭菌（甲醛、过氧乙酸等）其他类型的气体灭菌（甲醛、过氧乙酸等）26化学灭菌化学灭菌Sterilization with

27、 chemical methodn其他灭菌方法的有效补充其他灭菌方法的有效补充n灭菌剂的输送、灭菌剂的无菌性灭菌剂的输送、灭菌剂的无菌性n使用的灭菌剂、浓度和暴露时间使用的灭菌剂、浓度和暴露时间n灭菌后的最终漂洗灭菌后的最终漂洗n最终漂洗水的标准或空气质量最终漂洗水的标准或空气质量n如何防止灭菌后，使用前再次受到污染如何防止灭菌后，使用前再次受到污染n书面的程序性规定书面的程序性规定n使用的微生物挑战性的类型及结果使用的微生物挑战性的类型及结果n灭菌剂的残留灭菌剂的残留27过滤除菌过滤除菌（1） Filtering sterilizationn无菌容器之前无菌容器之前 n通常通常 0.22 m

28、孔径孔径或更小或更小n可以可以除掉细菌和霉菌除掉细菌和霉菌n对于对于病毒和支原体没有效果病毒和支原体没有效果 n双层过滤双层过滤或二级过滤或二级过滤 n没有没有纤维脱落或使用石棉过滤器纤维脱落或使用石棉过滤器 n滤芯完整性测试滤芯完整性测试，测试方法，测试方法 n过滤时间过滤时间和压力的变化应被验证和压力的变化应被验证n有效的预过滤系统有效的预过滤系统28过滤除菌过滤除菌（2）Filtering sterilizationn使用使用的长度的长度 n一个工作日一个工作日（WHO），一个单独批次（），一个单独批次（FDA，EU）n或者或者经过验证经过验证nFDA或或EU规定，每批料液后过滤器应进行更换规定，每批料液后过滤器应进行更换n过滤器过滤器和产品的相互作用和产品的相互作用n成分成分变化变化 n物质的释出物质的释出 n过滤效率过滤效率n过滤效果与被处理料液的关系过滤效果与被处理料液的关系n除菌过滤器的使用环境及更换除菌过滤器的使用环境及更换29过滤工艺的设计过滤工艺的设计Design of filtering processn所要求的流量所要求的流量n最小的合格流量最小的合格流量n所要求的压降所要求的压降n可接受的最小压降可接受