癌基因和抑癌基因ppt课件

1、1第十五章第十五章 癌基因和抑癌基因癌基因和抑癌基因本章我们讨论本章我们讨论1. 癌基因（细胞癌基因癌基因（细胞癌基因 . 病毒癌基因病毒癌基因 . 原癌基因原癌基因 ）和抗癌基因（抑癌基因）和抗癌基因（抑癌基因）的概念的概念2 .癌基因的分类癌基因的分类3 .癌基因产物癌基因产物 的作用的作用4 .癌基因激活的机理癌基因激活的机理5 .抑癌基因表达失效的机理抑癌基因表达失效的机理第一节第一节 概概 述述 正常细胞转化为恶性肿瘤（正常细胞转化为恶性肿瘤（tumor）细胞是一个复杂而漫长的过程。从细胞是一个复杂而漫长的过程。从分子生物学角度来看，这是细胞分子生物调控机制从量变到质变长期积累的分子

2、生物学角度来看，这是细胞分子生物调控机制从量变到质变长期积累的后果。人们认为，正常细胞的原癌基因和抑癌基因以正负信号调节细胞的增后果。人们认为，正常细胞的原癌基因和抑癌基因以正负信号调节细胞的增殖分化。而人癌细胞中原癌基因和抑癌基因的异常改变失去了对细胞的调控殖分化。而人癌细胞中原癌基因和抑癌基因的异常改变失去了对细胞的调控能力，从而导致了细胞恶性转化，无控制生长，侵袭和转移。正常细胞增生能力，从而导致了细胞恶性转化，无控制生长，侵袭和转移。正常细胞增生受到严格调控和制约，而肿瘤细胞是一种恶性增生细胞。受到严格调控和制约，而肿瘤细胞是一种恶性增生细胞。2一、肿瘤细胞恶性增殖特性一、肿瘤细胞恶性

3、增殖特性 （一）肿瘤细胞失去了生长调节的反馈抑制（一）肿瘤细胞失去了生长调节的反馈抑制 正常细胞受损正常细胞受损 ,一旦恢复原状，细胞就会停止增殖，但是肿瘤细胞不受这一旦恢复原状，细胞就会停止增殖，但是肿瘤细胞不受这一反馈机制抑制。一反馈机制抑制。 （二）肿瘤细胞失去了细胞分裂的接触抑制。（二）肿瘤细胞失去了细胞分裂的接触抑制。 正常细胞体外培养，相邻细胞相接触，长在一起，细胞就会停止增殖，正常细胞体外培养，相邻细胞相接触，长在一起，细胞就会停止增殖，而肿瘤细胞生长满培养皿后，细胞可以重叠起生长。而肿瘤细胞生长满培养皿后，细胞可以重叠起生长。 （三）（三） 肿瘤细胞表现出比正常细胞更低的营养要

4、求。肿瘤细胞表现出比正常细胞更低的营养要求。 （四）肿瘤细胞生长有一种自分泌作用，自己分泌生长需要的生长因子和（四）肿瘤细胞生长有一种自分泌作用，自己分泌生长需要的生长因子和调控信号调控信号, 促进自身的恶性增殖。促进自身的恶性增殖。3二、癌基因的定义二、癌基因的定义 癌基因（癌基因（oncogene, onc）是细胞内控制细胞生长的基因，在异常表达时，是细胞内控制细胞生长的基因，在异常表达时，这些基因不受体内各种调节因素的影响，可持续表达或过高表达，其产物可这些基因不受体内各种调节因素的影响，可持续表达或过高表达，其产物可以使细胞持续增殖。以使细胞持续增殖。三三、病毒癌基因（病毒癌基因（vi

5、rus oncogene，v-oncogene，v-onc） 是存在于病毒基因组中的癌基因，这种基因不编码结构成分，对病毒的是存在于病毒基因组中的癌基因，这种基因不编码结构成分，对病毒的复制无作用，但可使细胞持续增殖。复制无作用，但可使细胞持续增殖。（二）病毒本身具有完整的转录启动成分，当病毒进入细胞，其结构成（二）病毒本身具有完整的转录启动成分，当病毒进入细胞，其结构成分逆转录酶将病毒逆转录成分逆转录酶将病毒逆转录成cDNA，cDNA重组插入到细胞的基因组，病重组插入到细胞的基因组，病毒基组可利用细胞内由各种调控蛋白进行转录和表达，病毒癌基因也随毒基组可利用细胞内由各种调控蛋白进行转录和表达

6、，病毒癌基因也随之表达，无需特殊激活机制。之表达，无需特殊激活机制。1_1_1_1_ gag pol env src 逆转录逆转录 插入插入RNA cDNA 宿主细胞基因组宿主细胞基因组利用宿主酶和利用宿主酶和调控蛋白调控蛋白病毒癌基因表达病毒癌基因表达 （一）病毒癌基因最先是在劳氏肉瘤病毒（一）病毒癌基因最先是在劳氏肉瘤病毒（Rous sarccma virus，RSV）中发现的中发现的1 、 Rsv是致癌的是致癌的RNA逆转录病毒（也称逆转录病毒（也称RNA肿瘤病毒）肿瘤病毒）.2 、RNA肿瘤病毒基因组的基本结构包含了肿瘤病毒基因组的基本结构包含了3个基因区，除此之外，还个基因区，除此之

7、外，还有第四个基因：有第四个基因：Src 病毒癌基因不病毒癌基因不 编码结构成分，对病毒的编码结构成分，对病毒的 复制亦无复制亦无作用作用 但可使细胞增殖。但可使细胞增殖。 3 、不同肿瘤病毒的、不同肿瘤病毒的 v-onc是不同的，但共同特点是可以使细胞增殖。是不同的，但共同特点是可以使细胞增殖。4、不同肿瘤病毒的深入研究、不同肿瘤病毒的深入研究 ,不仅对病毒致癌机制有了较深入的了解，不仅对病毒致癌机制有了较深入的了解，更重要的是促使人们发现了细胞癌基因，为探索肿瘤发生根本原因及肿更重要的是促使人们发现了细胞癌基因，为探索肿瘤发生根本原因及肿瘤发生机制研究开创了新纪元瘤发生机制研究开创了新纪元

8、4.5四、细胞癌基因四、细胞癌基因 近年来，利用重组近年来，利用重组DNA和核酸探针技术，证实了在正常真核细胞基因和核酸探针技术，证实了在正常真核细胞基因组，包括人的正常有与组，包括人的正常有与v-onc同源顺序的基因，其功能是控制细胞生长，这同源顺序的基因，其功能是控制细胞生长，这就是细胞癌基因。就是细胞癌基因。 细胞癌基因（细胞癌基因（cellular oncogene ,c-onc）是在正常的真核细胞基因组中是在正常的真核细胞基因组中存在的有与存在的有与v-onc 同源序列的基因，其功能是控制细胞生长。这就是细胞癌同源序列的基因，其功能是控制细胞生长。这就是细胞癌基因。基因。（一）细胞癌

9、基因在进化过程中是高度保守的，很多（一）细胞癌基因在进化过程中是高度保守的，很多c-onc见于节肢动物见于节肢动物（如果蝇），甚至见于酵母。（如果蝇），甚至见于酵母。（二）二）c-onc是生命活动的基础，与细胞增殖分化密切相关，其表达与个体是生命活动的基础，与细胞增殖分化密切相关，其表达与个体发育有关，受到严格程序调控，但并不具有致癌性。发育有关，受到严格程序调控，但并不具有致癌性。6（三）三） c-onc也称为原癌基因（也称为原癌基因（proto-oncgene）有两层含义：有两层含义： 1.原癌基因是不发挥致癌作用的原癌基因是不发挥致癌作用的c-onc，正常情况是与细胞增殖有正常情况是与细

10、胞增殖有关的基因。关的基因。 2. v-onc来源于原癌基因，目前所知来源于原癌基因，目前所知v-onc，在哺乳动物都可以找在哺乳动物都可以找到与之相对应的到与之相对应的c-onc，具有相似的核苷酸序列，编码结构和功能相具有相似的核苷酸序列，编码结构和功能相似的产物，反之则不然，目前发现几种似的产物，反之则不然，目前发现几种c-onc没有相应的没有相应的 v-onc。另一另一方面，细胞具有方面，细胞具有c-onc，但没有与之相关的癌基因成分。现在一般认但没有与之相关的癌基因成分。现在一般认为为v-onc源于源于c-onc，是病毒基因组与细胞基因组发生重组而形成的。是病毒基因组与细胞基因组发生重

11、组而形成的。7第二节第二节 癌基因的分类癌基因的分类 目前对癌基因尚无统一分类的方法，一般有下面目前对癌基因尚无统一分类的方法，一般有下面3种分类方法：种分类方法：一、一、 按结构特点分（按结构特点分（6）类）类 （一）（一）src 癌基因家族癌基因家族 （二）（二）ras 癌基因家族癌基因家族 （三）（三）sis 癌基因家族癌基因家族 （四）（四）myc 癌基因家族癌基因家族 （五）（五）myb 癌基因家族癌基因家族 （六）其它：如（六）其它：如fos，erbA等。等。8二、二、 按产物功能分（按产物功能分（8）类）类（一）生长因子类（一）生长因子类（二）酪氨酸蛋白激酶（二）酪氨酸蛋白激酶（

12、三）膜相关（三）膜相关G蛋白蛋白（四）受体，（四）受体， 无蛋白激酶活性无蛋白激酶活性（五）胞质丝氨酸（五）胞质丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶苏氨酸蛋白激酶（六）胞质调控因子（六）胞质调控因子（七）核反式调控因子（七）核反式调控因子（八）其它（八）其它: db1 、bcl2三、按细胞增殖调控蛋白特性分成（三、按细胞增殖调控蛋白特性分成（4）类）类（一）生长因子（一）生长因子 （二）受体类（三）细胞内信号转换器（四）（二）受体类（三）细胞内信号转换器（四）细胞核因子细胞核因子9 第三节第三节 癌基因产物的作用癌基因产物的作用一、癌基因产物作用的一般特点一、癌基因产物作用的一般特点 （一）目前发现（一）目

13、前发现c-onc都是单拷贝基因，且均为结构基因都是单拷贝基因，且均为结构基因.（二）癌基因产物可分布在膜质核也可分泌至胞外（二）癌基因产物可分布在膜质核也可分泌至胞外.癌基因产物生成后，往往需要经过修饰，加工方能获得与其细胞成分的亲和癌基因产物生成后，往往需要经过修饰，加工方能获得与其细胞成分的亲和特性，其对细胞增殖分化一般是增强作用特性，其对细胞增殖分化一般是增强作用.（三）研究较多的猴肉瘤病毒（三）研究较多的猴肉瘤病毒（simian sarccma virus，SSV ）v-sis二、癌基因产物本身是生长因子二、癌基因产物本身是生长因子 人的人的c-sis位于位于22号染色体，编码产物号染

14、色体，编码产物P28sis氨基酸顺序与氨基酸顺序与PDGF（血小血小板生长因子）的板生长因子）的B 链相似，链相似，P28sisBB二聚体化，就有刺激生长活性（它结合二聚体化，就有刺激生长活性（它结合并激活纤维母细胞并激活纤维母细胞PDGF受体，刺激受体，刺激DNA合成）（合成）（PDGF 是杂二聚体，也有是杂二聚体，也有 A-A/B-B同源二聚体同源二聚体) 单抗可以封闭单抗可以封闭PDGF，P28sisDNA合成合成 刺激生长活性刺激生长活性 癌基因编码产物（结构）与生长因子不一样，但可发挥一样的刺激作癌基因编码产物（结构）与生长因子不一样，但可发挥一样的刺激作用，并且是持续的刺激用，并且

15、是持续的刺激.10三 、 癌 基 因 产 物 作 用 于 细 胞 信 号 转 导 系 统三 、 癌 基 因 产 物 作 用 于 细 胞 信 号 转 导 系 统 , 加 强 信 号 转 导 作 用加 强 信 号 转 导 作 用 生物信号是怎样从胞外传至胞内的？即生物信息的跨膜传递机制如何？这生物信号是怎样从胞外传至胞内的？即生物信息的跨膜传递机制如何？这一直是细胞生物学的研究热点和前沿课题。一直是细胞生物学的研究热点和前沿课题。 胞外信号胞外信号 作用于作用于 膜表面受体膜表面受体胞内信使物质的生成便意味着胞外信号跨膜胞内信使物质的生成便意味着胞外信号跨膜传递的完成。胞内信使至少有：传递的完成。

16、胞内信使至少有：cAMP（环磷酸腺苷）环磷酸腺苷）IP3（三磷酸肌醇）三磷酸肌醇）PG （前列腺素）前列腺素）cGMP（环磷酸鸟苷）环磷酸鸟苷）DG（二酰基甘油）二酰基甘油）Ca2（钙离子）钙离子）CAM（钙调素）它们是如何激发细胞内一系列复杂反应的其主要机制是通过蛋白激酶钙调素）它们是如何激发细胞内一系列复杂反应的其主要机制是通过蛋白激酶活化引起底物蛋白一连串磷酸化的生物信号反应过程活化引起底物蛋白一连串磷酸化的生物信号反应过程, 跨膜机制涉及到：跨膜机制涉及到： （一）质膜上（一）质膜上cAMP信使系统信使系统 （二）质膜上肌醇脂质系统（二）质膜上肌醇脂质系统 这两个系统都是由受体鸟苷酸调

17、节蛋白（这两个系统都是由受体鸟苷酸调节蛋白（GTP-regulatory protein，G蛋白）蛋白）和效应酶（腺苷酸环化酶磷脂酶等）组成，有相似的信号和效应酶（腺苷酸环化酶磷脂酶等）组成，有相似的信号 转导过程：即受体活转导过程：即受体活化后引起化后引起GTP与不同与不同G蛋白结合活化和抑制效应酶从而影响胞内信使产生而发生蛋白结合活化和抑制效应酶从而影响胞内信使产生而发生不同的调控效应。不同的调控效应。 （三）受体操纵的离子通道系统（三）受体操纵的离子通道系统 （四）受体酪氨酸蛋白激酶的转导（四）受体酪氨酸蛋白激酶的转导 （五）受体（五）受体 内部化内部化 的信息传导途径的信息传导途径 与

18、本章关系密切的与本章关系密切的 是（二）肌醇脂质系统（四）是（二）肌醇脂质系统（四）Tyr激酶自身转导激酶自身转导 111、受体型酪氨酸蛋白激酶（受体型酪氨酸蛋白激酶（Tyrosine protein kinase Tyr-pk） 是蛋白激酶的一种，能特异催化由是蛋白激酶的一种，能特异催化由ATP向蛋白质或多肽底物向蛋白质或多肽底物Tyr残基转移磷酸残基转移磷酸基团而命名，该酶一般性质是：基团而命名，该酶一般性质是：（1）只能特异地使）只能特异地使Tyr残基磷酸化；残基磷酸化；（ 2）反应需要）反应需要Mn2存在和存在和ATP 掺入；掺入；（3）癌基因产物蛋白激酶均能使其催化区的同源）癌基因产

19、物蛋白激酶均能使其催化区的同源Tyr残基磷酸化，即自我磷酸化；残基磷酸化，即自我磷酸化；（4） 除生长因子外，目前尚未发现除生长因子外，目前尚未发现Tyr-pk活性受任何因子的直接影响，它既不受活性受任何因子的直接影响，它既不受c-AMP/cGMP，也不依赖也不依赖Ca2 、磷脂钙调素蛋白。在分布上，、磷脂钙调素蛋白。在分布上，Tyr-pk不能作为不能作为1个个独立物质分泌于胞外，而是与生长因子受体，癌基因产物相伴，或在胞核或在胞浆，独立物质分泌于胞外，而是与生长因子受体，癌基因产物相伴，或在胞核或在胞浆，以可溶形式出现，而质膜则与以可溶形式出现，而质膜则与Tyr-pk有密切联系。有密切联系。

20、 Tyr残基磷酸化可能与淋巴因子刺激，发育分化及致癌病毒诱导的肿瘤过程有残基磷酸化可能与淋巴因子刺激，发育分化及致癌病毒诱导的肿瘤过程有关。（所有动物含少量关。（所有动物含少量Tyr残基，量处于平衡，说明体内有残基，量处于平衡，说明体内有Tyr-pk，还有水解磷酸还有水解磷酸酪氨酸酶存在）酪氨酸酶存在） EGF与受体结合有与受体结合有TPK（Tyr-pk）活性（活性（EGF-R）erb-B2癌基因与癌基因与EGF-R的膜的膜内分布有内分布有82%同源（互补性）缺少膜外部分（图同源（互补性）缺少膜外部分（图14-1，P302）其产物是）其产物是TPK 使使Tyr磷酸化开启信号转导膜开关磷酸化开启

21、信号转导膜开关erb-B2和和v- erb-B同源性非常高，在（唾液，胃）腺癌，同源性非常高，在（唾液，胃）腺癌，乳腺癌该乳腺癌该onc检出率高，表明检出率高，表明erb-B2可导致上述细胞恶变。可导致上述细胞恶变。122 、非受体型酪氨酸蛋白激酶、非受体型酪氨酸蛋白激酶 研究的较早的是研究的较早的是src，其产物为其产物为P60-src与与P60csrc比较，比较，P60v-src分布广泛分布广泛作用底物更多使许多蛋白质磷酸化导致：作用底物更多使许多蛋白质磷酸化导致： 代谢加快代谢加快如糖酵解如糖酵解产物产物 Tyr磷酸化水平磷酸化水平 本身具有肌醇磷脂激酶作用，使本身具有肌醇磷脂激酶作用，

22、使PI磷酸化，致磷酸化，致DG和和IP3的前体物和的前体物和PIP2 增增加加 体外实验体外实验 用用E26-myb（白血病毒）白血病毒）Ok10V-myc（白血病毒）（白血病毒） 鸡骨髓鸡骨髓细 胞 ； 但 被 有细 胞 ； 但 被 有 S r c 基 因 逆 转 录 病 毒 超 感 染 后 ， 可 以 不 依 赖基 因 逆 转 录 病 毒 超 感 染 后 ， 可 以 不 依 赖 c M G F（myelomonaytic growth factor，骨髓单核细胞生长因子）使该细胞持续增殖。，骨髓单核细胞生长因子）使该细胞持续增殖。 肌醇脂质（肌醇脂质（inositol lipids）是肌酸

23、磷脂（是肌酸磷脂（inositol phosphol lipids）和肌酸和肌酸磷酸脂（磷酸脂（inasphates）的总称。肌醇磷酸脂存在于胞浆，肌醇磷酯是生物磷脂的总称。肌醇磷酸脂存在于胞浆，肌醇磷酯是生物磷脂的组分，共同特征是含有肌醇（的组分，共同特征是含有肌醇（myoincsitol）。）。哺乳动物膜含有磷脂酰肌醇哺乳动物膜含有磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol，PI）磷脂酰肌酸磷脂酰肌酸-4-磷酸（磷酸（PI（4）P或或PIP）磷磷脂酰肌醇脂酰肌醇4，5二磷酸（二磷酸（PIP2），），IP3特指肌醇特指肌醇1，4，5三磷酸，是环己六醇与磷三磷酸，是环己六醇与磷酸戊酯

24、即为肌酸磷酸酯和酸戊酯即为肌酸磷酸酯和DG(二酰基甘油）具有第二信使的作用。二酰基甘油）具有第二信使的作用。转化转化cMGF133、GTP和和GDP结合蛋白结合蛋白 G蛋白（全称蛋白（全称GTP结合蛋白或结合蛋白或GTP结合调节蛋白结合调节蛋白)是广泛存在于各种组织的是广泛存在于各种组织的细胞膜上，在受体与效应酶之间起主要的调节作用，是细胞膜上，在受体与效应酶之间起主要的调节作用，是G蛋白偶联受体与效应蛋白偶联受体与效应酶（或离子通道）之间中介物质，是一种酶（酶（或离子通道）之间中介物质，是一种酶（P187）。）。 Ras蛋白是蛋白是 G蛋白家族的新成员蛋白家族的新成员 P21ras有有GTP

25、酶活性，可以结合水解酶活性，可以结合水解GTPGDP 、 EGF-R可刺激可刺激P21ras的的GTP结合活性。结合活性。 异常情况下，异常情况下，P21ras（如如ras点突变激活）水解点突变激活）水解GTP能力能力结合结合GTP能力能力持续处于激活状态持续处于激活状态使磷脂酶使磷脂酶C水解，水解，PIP2IP3+DG，持续增高，导致细胞持续增高，导致细胞激活。（激活。（P21ras水解水解GTPGDP，本身失活，也解除对磷脂酶的作用）本身失活，也解除对磷脂酶的作用）14四、核反式调控因子四、核反式调控因子影响基因表达调控影响基因表达调控 反式调控因子（反式调控因子（trans-acting

26、 factor） 是蛋白质，是基因产物，是含大是蛋白质，是基因产物，是含大量，序列特异性的（量，序列特异性的（DNA）结合蛋白，可与结合蛋白，可与RNApol相互作用，影响基因表相互作用，影响基因表达的调控。顺式调控元件达的调控。顺式调控元件（cis-acting element）是核酸，是是核酸，是DNA，是那些是那些对结构，基因表达有调控作用的序列如启，序列如启对结构，基因表达有调控作用的序列如启，序列如启 动子和增强子。核酸。动子和增强子。核酸。 基因表达调控从化学本质来说是核酸基因表达调控从化学本质来说是核酸 蛋白质蛋白质 相互作用来完成的。癌相互作用来完成的。癌基因产物是核反式调控因

27、子，且基因本质上是调控因子，癌基因编码反式基因产物是核反式调控因子，且基因本质上是调控因子，癌基因编码反式作用因子引起细胞转化机制不清楚，如新近发现：作用因子引起细胞转化机制不清楚，如新近发现：47KDC-myc与与 异二聚体异二聚体促进细胞促进细胞DNA合成合成max蛋白配对蛋白配对若若c-myc持续过高表达，则使细胞增殖，分化持续过高表达，则使细胞增殖，分化15五、癌基因产物的协同作用五、癌基因产物的协同作用 实验证明，用实验证明，用ras或或myc同时转染细胞，可使细胞长期增殖，但不能转同时转染细胞，可使细胞长期增殖，但不能转化成癌细胞化成癌细胞 ，在裸鼠体内也不能形成肿瘤。但用，在裸鼠

28、体内也不能形成肿瘤。但用ras+myc同时转染细胞，则同时转染细胞，则使细胞转化成癌细胞。使细胞转化成癌细胞。 说明：致癌至少需要说明：致癌至少需要2种或以上的种或以上的onc协同作用，协同作用，2种种onc在在2条通路上发条通路上发挥作用，由于细胞增殖调控是多因子，多阶段影响的结果。而影响增殖分化挥作用，由于细胞增殖调控是多因子，多阶段影响的结果。而影响增殖分化的的onc 达几十种之多，所以大多数人认为：癌发生是多阶段多步骤的。达几十种之多，所以大多数人认为：癌发生是多阶段多步骤的。16第四节第四节 癌基因的激活癌基因的激活癌基因不表达癌基因不表达表达表达受控制受控制不受控制不受控制不致癌不

29、致癌致癌致癌 称癌基因激活（恶性激活）称癌基因激活（恶性激活） （maligant activation ）机理如下：机理如下：17一、前病毒插入一、前病毒插入 前病毒前病毒 整合到宿主染色体中去的病毒整合到宿主染色体中去的病毒DNA（不管是源于不管是源于DNA还是还是RNA病毒）称之为前病毒。这段病毒）称之为前病毒。这段DNA可随宿主可随宿主DNA一起复制传给子细胞。一起复制传给子细胞。1、转录激活、转录激活 1987年年Hayward和和Astrin等同时发现鸡蛋白血病毒（等同时发现鸡蛋白血病毒（avian cell kemia virus ALV）感染细胞后，可以激活细胞感染细胞后，可以

30、激活细胞c-myc原癌基因，诱发原癌基因，诱发 鸡鸡B细胞淋巴细胞淋巴瘤。瘤。5 ALV1 1 c-myc 3 ALV本身没有转化基因，即本身没有转化基因，即v-onc，但其病毒两端但其病毒两端LTR（长末端重复序列长末端重复序列long terminal repeat sequence ，即反向倒转重复顺序，如即反向倒转重复顺序，如ACTGA-TGAGT/TGACT-AGTCA 的启动子启动的启动子启动c-myc的转录，该启动子不受细胞的转录，该启动子不受细胞的调控，持续转录，导致细胞癌变。的调控，持续转录，导致细胞癌变。 LTR的增强子可以强化启动子的这一作用。的增强子可以强化启动子的这一

31、作用。 另外可促进另外可促进c-myc本身的启动子发挥作用本身的启动子发挥作用 带有带有v-onc的病毒插入基因组后，也可归于这一类。的病毒插入基因组后，也可归于这一类。182、翻译激活、翻译激活 实验证明，翻译效率与起始密码前的实验证明，翻译效率与起始密码前的5-非编码区的非编码区的AUG有关，该有关，该AUG称称5-AUG，去掉去掉5-AUG，翻译效率就提高。（例如，翻译效率就提高。（例如，1988Marth JD发现的发现的病毒引起的病毒引起的LCK原癌基因的激活就属此例。原癌基因的激活就属此例。LCR编码编码TPK ，P56lck。）。） 在在LAStRA淋巴瘤细胞中，由于淋巴瘤细胞中

32、，由于lck编码的编码的TPK （酪氨酸蛋白激酶酪氨酸蛋白激酶LCR）的激活而导致白血病的发生。的激活而导致白血病的发生。酶激活的原因是：酶激活的原因是： 前病毒前病毒Mo-MLV（moloney 小鼠白血病病毒）插入使宿主基因发生了重小鼠白血病病毒）插入使宿主基因发生了重排，重排排，重排LCK基因的转录本（基因的转录本（transcript）起始于前病毒起始于前病毒LTR，使使LAStRA的的LCKmRNA转录提高了转录提高了7倍，翻译产物提高了倍，翻译产物提高了50多倍。多倍。 宿主因此失去了（正常宿主因此失去了（正常LCKmRNA5非编码区的）非编码区的）177bp，取而代之的取而代之的

33、是病毒是病毒LTR240bp19正常的正常的LCK mRNA 的起始密码（的起始密码（AUG）前有前有3个个5AUG5 LCK AUG AUG AUG AUG 3 点突变使第点突变使第2个个AUG变为变为CUG，翻译效率增加翻译效率增加3-4倍倍 使使5端端138bp核苷酸颠倒而核苷酸颠倒而 清除清除3个个AUG翻译效率增加翻译效率增加7倍倍 缺失缺失138bp核苷酸序列而消除核苷酸序列而消除3个个AUG，翻译效率增加翻译效率增加9-10倍。倍。 正常情况下，含正常情况下，含5-AUG的基因在哺乳类基因中仅占的基因在哺乳类基因中仅占10%，而在原癌，而在原癌基因中表达基因中表达65%，可见原癌

34、基因受到严密的调控，这是一种调控机制。，可见原癌基因受到严密的调控，这是一种调控机制。 trsanscript(转录本转录本)-每一个基因都有特定的阅读框，阅读框规定了那每一个基因都有特定的阅读框，阅读框规定了那3个核苷酸成为个核苷酸成为1组读做组读做1个密码子，这是由起始密码子个密码子，这是由起始密码子AUG决定的，阅读决定的，阅读从第一个字母开始到最后一个字母结束，阅读方向从第一个字母开始到最后一个字母结束，阅读方向53，翻译方向是，翻译方向是NC，这样才能合成一个正常的多肽。（这样才能合成一个正常的多肽。（RNApol 作用的起始位与终止点作用的起始位与终止点之间的之间的DNA顺序（称转

35、录单位）的产物，即顺序（称转录单位）的产物，即mRNA）。）。二二 、癌基因突变、癌基因突变 1. 突变使原癌基因产物激活突变使原癌基因产物激活 前面提到（前面提到（ras的）的）P21ras是是G蛋白家族新成员，可以结合水的蛋白家族新成员，可以结合水的GTP，有有GTP酶活性。酶活性。 但当但当c-ras第第12，13，59，61位密码子中任何位密码子中任何1个发生突变时，个发生突变时，P21ras 可以结合靶分子，但可以结合靶分子，但GTP酶活性降低了酶活性降低了10倍左右，与正常倍左右，与正常P21蛋白比较，蛋白比较，GTP酶活性低酶活性低1000 倍左右。突变后倍左右。突变后P21ra

36、s不能迅速水解不能迅速水解GTP-GDP，持续保持持续保持对磷脂酶对磷脂酶C的刺激的刺激使第二信使使第二信使DG，IP3持续持续 细胞持续增殖，导致肿瘤细胞持续增殖，导致肿瘤发生。发生。20.212. 突变或缺失使原癌基因产物功能改变突变或缺失使原癌基因产物功能改变 正常情况下，正常情况下，c-src蛋白的蛋白的Tyr527被磷酸化被磷酸化并以头尾自身缔结折叠并以头尾自身缔结折叠到其同源（互补）结构的到其同源（互补）结构的SH-2区，使区，使TPK隐匿，隐匿，TPK活性下降活性下降若：若：Tyr527脱磷酸或被其它激活脱磷酸或被其它激活SH-2区隐形结合区隐形结合则则src蛋白蛋白SH-2区结

37、合区结合激酶激酶TPK暴露暴露使多种底物使多种底物Tyr磷酸化，其中包括细胞信号转导中重要磷酸化，其中包括细胞信号转导中重要的酶和调节蛋白被活化的酶和调节蛋白被活化信息分子信息分子细胞增生转化。细胞增生转化。22三、三、 染色体易位与基因重排染色体易位与基因重排 染色体易位染色体易位染色体一部分跑到（易位）另一染色体上去了染色体一部分跑到（易位）另一染色体上去了 基因重排基因重排DNA分子一部分断链，新的部位重接，然后基因发生重新分子一部分断链，新的部位重接，然后基因发生重新排列组合的过程。（按照达尔文进化观点，没有突变，没有变异，没有易位排列组合的过程。（按照达尔文进化观点，没有突变，没有变

38、异，没有易位和重排，就没有进化，进化对于个体是不幸的，导致癌症和分子病。染色体和重排，就没有进化，进化对于个体是不幸的，导致癌症和分子病。染色体85%不活跃，不活跃，15%活跃）。活跃）。 染色体易位往往导致基因重排对原癌基因导致两种后果：染色体易位往往导致基因重排对原癌基因导致两种后果： 表达融合蛋白表达融合蛋白易位使易位使1个原癌基因与个原癌基因与1个基因重排在一起，产生个基因重排在一起，产生1个个融合基因，表达融合基因，表达1个融合蛋白，这个蛋白具有转化活性个融合蛋白，这个蛋白具有转化活性 原癌基因异常异位表达原癌基因异常异位表达将原癌基因置于另一个旺盛表达基因的控将原癌基因置于另一个旺

39、盛表达基因的控制之下，就会使之异常异位表达制之下，就会使之异常异位表达23（一）易位基因融合导致原癌基因产物功能激活（一）易位基因融合导致原癌基因产物功能激活如如CML存在染色体易位和基因融合存在染色体易位和基因融合易位易位 t9。22： c-sis 断裂点断裂点 bcr 断裂点断裂点 c-abl 融合融合 c-sis 9 c-abl22 9 22 ph染色体染色体融合：融合：“ bcr-ab1”融合，融合基因有原癌基因融合，融合基因有原癌基因c-abl。原癌基因产物功能的激活原癌基因产物功能的激活 c-abl是是TPK类的癌基因，非受体型，体外实验表明该基因编码的产物不类的癌基因，非受体型，

40、体外实验表明该基因编码的产物不具有激酶活性，而具有激酶活性，而“bcr+c-abl”产生的产生的P210 bcr+abl具有较高的具有较高的TPK活性。活性。Ph（philadelphia）染色体，在费城首次发现的。染色体，在费城首次发现的。24（二）染色体易位导致原癌基因的转录激活（二）染色体易位导致原癌基因的转录激活 大家知道抗体是人类在分子水平上抵抗外来侵袭的一种重要物质大家知道抗体是人类在分子水平上抵抗外来侵袭的一种重要物质 人可以产生人可以产生106-108个免疫球蛋白（个免疫球蛋白（Ig） 而人的基因只有而人的基因只有2.8104个为什么能产生个为什么能产生106Ig？用一般的蛋白

41、质合成理用一般的蛋白质合成理论不能解释，现有论不能解释，现有3个理论认为：个理论认为： （胚系）基因重排（成为功能基因）；（胚系）基因重排（成为功能基因）； 不精确剪切导致不精确剪切导致Ig多态性；多态性； 基因（主要是基因（主要是V区）突变导致抗体多样性；区）突变导致抗体多样性；25与我们今天有关的内容是。与我们今天有关的内容是。 免疫球蛋白（免疫球蛋白（Ig） 由轻重链组成，在形成由轻重链组成，在形成Ig的多态性上，重链所起的作的多态性上，重链所起的作用更大，重链由用更大，重链由4个不连续的基因簇组成：个不连续的基因簇组成： VH可变区可变区DH多变区多变区JH：结合区结合区CH恒定区恒定

42、区 重链基因于重链基因于14q32（14染色体长臂染色体长臂3区区2带），所谓类型转换区，是带），所谓类型转换区，是B细胞细胞在分化过程中，在分化过程中，Ig分子会发生类型转换，是经过重排结合的分子会发生类型转换，是经过重排结合的VHDHJH与与C和和Cg的的CH基因重排的过程。基因重排的过程。 在在C、Cr3、Cr1、Cr2b、Cr2a、C、C的的5约约1-4kb处有一段特殊的处有一段特殊的顺序，叫做转换区（顺序，叫做转换区（switch region）相应转换区为相应转换区为S、S r3、。、。S。（S长长2-3kb，具有具有（GAGCT）nGGGGGTm特殊重复顺序特殊重复顺序n可以是可

43、以是1-7，常，常见是见是3，m约为约为150。重链的类型转换也叫。重链的类型转换也叫S-S重组，其机制不清楚。）重组，其机制不清楚。） c-myc位于位于8号染色体上，易位至号染色体上，易位至14号染色体上，表达增加，原因是可能号染色体上，表达增加，原因是可能是移至是移至1个非常活动的基因位置（个非常活动的基因位置（Ig基因）被激活。激活机制参基因）被激活。激活机制参p309，3种可能种可能（自学）。（自学）。 易位易位c-myc基因重排参基因重排参p309 图图14-5。26四、癌基因扩增四、癌基因扩增 一般癌基因多为单拷贝（一般癌基因多为单拷贝（copy，单拷贝，即单拷贝，即1份）基因。

44、份）基因。（拷贝数（拷贝数（copy number 细胞所含的按每一基因组计算的某种质粒或基因细胞所含的按每一基因组计算的某种质粒或基因的数目）的数目） 癌基因扩增导致癌基因过度表达，原因是：癌基因扩增导致癌基因过度表达，原因是： （一）转录过程（一）转录过程 （二）基因拷贝数增加（二）基因拷贝数增加如：人早幼粒白血病如：人早幼粒白血病HL-60细胞比相应的细胞细胞比相应的细胞c-myc多多20多倍，已发现许多癌细胞中有癌基因扩增，结果导致癌基因过剩。多倍，已发现许多癌细胞中有癌基因扩增，结果导致癌基因过剩。 癌基因扩增常伴有染色体易位。癌基因扩增常伴有染色体易位。27第五节第五节 抑癌基因抑

45、癌基因一、抑癌基因的定义一、抑癌基因的定义 抗癌基因（抗癌基因（antioncogene）是最初的叫法，大约可以追溯到是最初的叫法，大约可以追溯到1985 年左右，年左右，现多称为抑癌基因（现多称为抑癌基因（tumor suppressor gene），），这是一类可这是一类可 抑制细胞生长并有抑制细胞生长并有潜在抑癌作用的基因，当它失活后，可能使癌基因充分发挥作用而导致癌的发潜在抑癌作用的基因，当它失活后，可能使癌基因充分发挥作用而导致癌的发生发展。生发展。 如果要确定某一特定组织或细胞恶性肿瘤的抗癌基因，需满足以下三个如果要确定某一特定组织或细胞恶性肿瘤的抗癌基因，需满足以下三个 条件：条件： 在癌的相应正常组织中必须有正常的表达；在癌的相应正常组织中必须有正常的表达； 在恶性肿瘤中。相应基因应有所改变，包括点突变，片断缺失或在恶性肿瘤中。相应基因应有所改变，包括点突变，片断缺失或 表达表达缺陷；缺陷； 导入该基因缺陷的恶性肿瘤细胞中将部分或全