修改多聚酶链式反应扩增DNA

1、人教版选修人教版选修1专题专题5 DNA和蛋白质技术和蛋白质技术课题课题2 多聚链式反应扩增多聚链式反应扩增DNA片段片段一、DNA分子复制的过程参与的组分参与的组分在在DNA复制中的左右复制中的左右解旋酶解旋酶打开打开DNA双链双链DNA母链母链提供提供DNA复制的模板复制的模板4种脱氧核苷酸种脱氧核苷酸合成子链的原料合成子链的原料DNA聚合酶聚合酶催化合成催化合成DNA子链子链引物引物使使DNA聚合酶能够从引物的聚合酶能够从引物的3端开端开始连接脱氧核苷酸始连接脱氧核苷酸DNA基本单位基本单位DNA双链反向平行双链反向平行3555533二二.PCR.PCR技术扩增过程技术扩增过程a a、

2、_ （9090以上）：双链以上）：双链DNADNA模板模板 在热作用下，氢键断裂，形成在热作用下，氢键断裂，形成_b b、_（退火退火5050左右）：系统温度缓慢降左右）：系统温度缓慢降低，低， 引物与引物与DNADNA模板结合，形成局部模板结合，形成局部_。 c c、_（7272左右）：在左右）：在TaqTaq酶的作用下，酶的作用下，从引物的从引物的33端端开始开始延伸，合成与模板互补的延伸，合成与模板互补的_。DNADNA的合成方向总是从子链的的合成方向总是从子链的 55端端向向33端端延伸延伸复性复性双链双链DNADNA链链DNADNA变性变性单链单链DNA DNA 延伸延伸1变性变性

3、双链模板双链模板DNA解离为单链结构。（解离为单链结构。（9095）DNA双链双链DNA单链单链变性（变性（ 95）2复性复性 （55 ）引物与模板互补成双链。引物与模板互补成双链。 (由于引物浓度高，序列短，所以易与模板结由于引物浓度高，序列短，所以易与模板结合。合。)引物引物3延伸延伸 在在Taq酶酶作用下，合成特异作用下，合成特异DNA序列。序列。7075延伸（延伸（72）变性变性第二次循环第二次循环复性复性第二次循环第二次循环延伸延伸第二次循环第二次循环25次次课前预习导学KEQIAN YUXI DAOXUE课堂合作探究KETANG HEZUO TANJIU问题导学当堂检测 .VS.

4、DNADNA母链母链4种种dNTPTaq DNA聚合酶聚合酶引物（引物（2 2个个snDNAsnDNA）温度控制温度控制1 1）模板：）模板：2 2）原料：）原料：3 3）酶：）酶：DNADNA母链母链4 4种种dNTPdNTP解旋酶解旋酶DNADNA聚合酶聚合酶引物酶引物酶DNADNA连接酶连接酶4 4）特点）特点: :半保留复制半保留复制边解旋边复制边解旋边复制半保留复制半保留复制全解旋再复制全解旋再复制课前预习导学KEQIAN YUXI DAOXUE课堂合作探究KETANG HEZUO TANJIU问题导学当堂检测课前预习导学KEQIAN YUXI DAOXUE课堂合作探究KETANG

5、HEZUO TANJIU问题导学当堂检测PCRPCR的应用的应用 PCRPCR具有省时、操作简便、特异性强、灵具有省时、操作简便、特异性强、灵敏度高、效率高、应用范围广等特点。敏度高、效率高、应用范围广等特点。PCRPCR技术在技术在分子生物学、医学和案件侦破分子生物学、医学和案件侦破等领域得到广泛应用。等领域得到广泛应用。PCR的应用的应用 亲亲子子鉴鉴定定PCR的应用的应用课前预习导学KEQIAN YUXI DAOXUE课堂合作探究KETANG HEZUO TANJIU问题导学当堂检测12345课前预习导学KEQIAN YUXI DAOXUE课堂合作探究KETANG HEZUO TANJIU问题导学当堂检测12345课前预习导学KEQIAN YUXI DAOXUE课堂合作探究KETANG HEZUO TANJIU问题导学当堂检测12345课前预习导学KEQIAN YUXI DAOXUE课堂合作探究KETANG HE