黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定

1、实验七 黄连中盐酸小篥碱的提取分离及鉴定黄连为毛戛科黄连属植物黄连(coptis chinensis Eraneh )、三角 叶黄连(coptis deltoidca C . Ycheng et Hsiao )或云连 (coptiteetoidesC.Y .cheng )的干燥根茎。黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小璧碱 (berberine )、掌叶防己碱(palmatine )、黄连碱(jatrorrhizine )等。其中小璧碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连 中。小璧碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床

2、，掌叶防己碱也 作药用，其抗菌性能和小璧碱相似。目的要求1 .学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。2. 学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。3. 学习和掌握生物碱的化学检识及薄层色谱的鉴定方法。实验原理小璧碱为黄色针状结晶，mp为145 C,游离的小璧碱能缓缓溶于 水(1: 20)及乙醇中(1: 100),易溶于热水及热醇，难溶于乙酬， 石油酬、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是 盐酸盐。盐酸盐为l: 500,枸椽酸盐1: 125,酸性硫酸盐1: 100, 硫酸盐l: 30,但在热水中都比较容易溶解。小璧碱常以季铉碱形式存在，碱性强(pka11.53 ),能溶于水中， 其水溶液有

3、三种互变形式。季俊式（红棕色）醛式（黄色）醇式（黄色）小栗碱（黄连素）掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于 三氯甲烷、乙酬等有机溶剂。盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有 强烈的黄色荧光。易溶于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸 小璧碱大。本实验是利用小璧碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性 质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作 用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质。再利用两种生物碱极性不 同，采用柱色谱分离。实验内容、提取分离黄连粗粉50g加 0.3% H2SO4500ml，浸渍 20 分钟煎煮30分钟，滤过药渣疽液加石灰乳调PH值至中性&

4、#39;放置10分钟，抽滤滤液加HCl调PH23加滤液体积45%的NaCl，放置30分钟，抽滤沉淀滤液(主要含小栗碱、掌叶防己碱、黄连碱等生物碱)柱加200ml水加热至澄明趁热抽滤滤液放置、抽滤V沉淀二、生物碱类检识1. 化学检识：(1) 丙酮加成反应：取样品0.05g ,溶于50ml热水中，加入10% NaOH溶液2ml，混合均匀后，于水浴中加热至50 C，加入丙酮5ml, 放置，即有柠檬黄色结晶析出。此反应可用于原小璧碱型季铉生物碱的鉴别。(2) 漂白粉显色反应：小璧碱酸性水溶液中加漂白粉(或通入氯 气)，溶液即变樱红色。2. 薄层色谱检识吸附剂：硅胶G对照品：盐酸小璧碱甲醇溶液样品：不同色带的甲醇溶液展开剂：CHCls-MeOH-冰 HAc (7: 1 : 2)检视：先在紫外灯光(365nm)下观察荧光，再喷改良碘化铉'钾 试剂。实验说明及注意事项1 .以硫酸盐代替盐酸盐，可增加生物碱的浸出量。2. 盐析最佳用量为45%。思考题1.根据小璧碱的性质，除用硫酸水溶液提取外，尚可用哪些提取 方法？请设计一个提取工艺流程。2 .掌握根据化合