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文档简介
1、1会计学DNA的蛋白质技术的蛋白质技术DNA与蛋白质的提取与蛋白质的提取 DNA血红蛋白血红蛋白材材料料选选取取鸡血细胞等鸡血细胞等DNA含含量相对较高的生物量相对较高的生物组织组织哺乳动物的成熟红哺乳动物的成熟红细胞细胞去去除除杂杂质质用不同浓度的用不同浓度的NaCl溶液处理溶液处理用酒精溶液处理用酒精溶液处理用蛋白酶处理用蛋白酶处理透析处理透析处理纯化处理纯化处理鉴鉴定定加入二苯胺,沸水浴加入二苯胺,沸水浴SDS聚丙烯酰聚丙烯酰胺凝胶电泳法测胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对定蛋白质的相对分子质量分子质量PCR技术与凝胶色谱法的比较技术与凝胶色谱法的比较 PCR凝胶色谱法凝胶色谱法过过程程变性:
2、变性:90 以上高以上高温解旋温解旋复性:复性:50 左右引左右引物与单链结合物与单链结合延伸:延伸:72 合成子合成子链链凝胶色谱柱的制作凝胶色谱柱的制作装填:凝胶装填均装填:凝胶装填均匀,无气泡匀,无气泡纯化纯化DNA粗提取与鉴定中不同试剂的用途粗提取与鉴定中不同试剂的用途及原理比较及原理比较 试试剂剂质量浓质量浓度度用途用途原理原理NaCl溶溶液液2 mol/L溶解溶解DNADNA在在NaCl溶液中的溶解溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变度随溶液浓度的变化而改变,溶解度在质量浓度为,溶解度在质量浓度为2 mol/L时最大、在质量浓度时最大、在质量浓度为为0.14 mol/L时最小时最小
3、0.14mol/L析出析出DNA2 mol/L鉴定鉴定时时的溶的溶剂剂除去除去杂杂质以质以提提纯纯DNA试剂试剂操作操作作用作用A柠檬酸柠檬酸钠钠与鸡血混合与鸡血混合溶解细胞溶解细胞中中DNAB 蒸馏水蒸馏水与鸡血细胞混合与鸡血细胞混合保持细保持细胞形状胞形状C 蒸馏水蒸馏水加入到溶解有加入到溶解有DNA的的NaCl溶液中溶液中析出析出DNA丝状物丝状物产生特定产生特定的颜色反的颜色反应应PCR技术操作注意事项技术操作注意事项 n0.14 mol/LNaCl此如果将此如果将NaCl浓度调至质量浓度为浓度调至质量浓度为0.14 mol/L会使会使DNA溶解度变小而呈析出状态。溶解度变小而呈析出状态。
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