bNMR基本二维谱操作介绍

1、1会计学bNMR基本二维谱操作介绍基本二维谱操作介绍内 容NMR 原理NMR 论坛NMR 开放管理NMR 维修NMR 解谱NMR 概况NMR 操作NMR 应用基本 2D 操作: cosy/ noesy/ hsqc/ hmbc基本 H/C 操作进A 2D 操作: tocsy, roesy, J-Resolve, Inadequate特殊谱操作: DEPT, APT, 一维 noe, 压溶剂峰杂核操作: F, B, Li, D, Si, O, N弛豫操作: T1, T2 变温操作: 高温, 低温 NOESYgHSQC gCOSYgHMBC界面Vnmr6.1CVnmrJ2.2cTopspin3.0二

2、维傅立叶, 对称处理定标, 定范围调信号峰圆点大小打印选择movesw 后标定ds / wft 差异调二维谱, 调程序基本 2D 操作基本 H/C 操作进A 2D 操作特殊谱操作杂核操作弛豫操作变温操作简介检测意义检测步骤谱图处理强调提醒化学位移归属确定同分异构物立体结构辩明参数设定调出程序检测 (go)检测时间关键/ 选择性参数检测谱宽投影对齐nt / ni自动处理： VnmrJ， MestreNova ppm (t1) 0.0 5.0 10.0 -500 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 1 1 2 3 3 C HC l3 T M S ? a b c

3、d e E thyl 2-methylpropionate 2008.10.14CH3HHOOCH2CH3deabcMestrc 谱图处理新标样_氢谱范例d, e 归属不确定. 需要 noe 确认!C4 ,C5 难判断123564CDCl3需 DEPT 1D-NOE 与 HSQC 辅助辨认4CH3HHOOCH2CH312356Ethyl 3-methylpropionate2010.11.18C1 ,C2 不确定新标样_碳谱范例ab(gradient Correlated Spectroscopy)gCOSY H-H 近程相关pw = 6.4nt = 8ni = 64CH3HHOOCH2CH3

4、deabccdeCH3HHOOCH2CH3deabcabcdea-c; d-eb-d (allylic H), b-e (allylic H)相关峰:1D-NOE (1D Nuclear Overhauser Difference Spectoroscopy)照射 b, 发现主要 d 增强 (0.51 %), 表示 b-d 较接近确认: d, e 的化学位移归属bdepw = 6.4选择照射甲基 bmix = 0.7CH3HHOOCH2CH3deabcNOESY H-H 空间相关Vnmr6.1c 处理645321abcde(Single Quantum Correlation)4CH3HHOO

5、CH2CH312356gHSQC H-C 近程相关1. 各 H-C 峰对应良好; C4 和两个 H 相关 (d, e).2. 确认 C1 为 OEt 的 CH3;C2 为双键碳上的的 CH33. 确认 C5, C6 为季碳, 没有 H 相关pw = 6.4J = 130CH3HHOOCH2CH3deabcnt = 8ni = 641 a2 b3 c4 d4 epw = 6.4J = 130mix = 6nt = 8ni = 64CH3HHOOCH2CH3(gradient Hydrogen Multiple Bond Correlation)gHMBC H-C 远程相关123456abcde4

6、 b6 d5 b5 d4CH3HHOOCH2CH312356CH3HHOOCH2CH3deabc1 c2 e2 d3 a6 b6 c(1).复杂化合物的 NMR 谱鉴定N2SSOOCH2CH3ON2SOSOCH2CH3OCNCNCNCNHCN CNHHCNCNHOONHOHHOCH2CH3OONHOHHOCH3OONHOHOCH2CH3HOONHOHOCH3HNNNNNOOCH2CH3NNNNNNNOCH2CH3ONNNOCH2CH3ONNNClCH2OOCH2CH3NNNNHNN(75 %)(25 %)(0 %)NNNNNNOCH2CH3O1435629107811NNNNNNOOCH2CH

7、31435629107811NNOOCH2CH3NNNN得到两个产物, 产率分别为 75% 与 25%.三种可能结构, 经 HMBC 的确定, 答案如上.右边相关图说明: (上) 观察到 H-5 与 C-8 的相关(中) 没有观察到 5-H 与 C-8 或 C-7 的相关(下) 若是此结构, 应该会观察到 H-5 与 C-7 的相关, 但没有得到.关环NH2NHCNNHNNEt2(I-1)(II-1)NH3CNHNNNNEt2N+NNH2NNNH3C(I-2) 白色粉末(II-2) 黄色粉末BrNMe2NNEt2NHNHCNNHNMe2NNH3CNNNNMe2NEt2BrNMe2H3CNNNN

8、Et2NNNMe2H3CNNNNEt2NNNMe2NH3CNNNNNEt2NMe2(I-2)(I-3)(I-4)R化合物 R 经关环反应, 紧接着取代反应, 得到两个化合物 I-2 与 II-2.II-2 的结构和 II-1 好区别, DEPT 便可以鉴定是否为 甲基或次甲基.I-2 和 I-3 与 I-4 的辨别, 则必须利用到 HMBC 或 Noesy.OOCH3OOOCH3OOCH3OOOHOOHOOOCH3OOHOOOHKOH (1 eq)CH3OH+majorminortrace选择性水解反应.靠 HMBC 以及 Noesy 确定 Major 化合物的构型. NOESYgHSQC g

9、COSYgHMBC界面Vnmr6.1CVnmrJ2.2cTopspin3.0二维傅立叶, 对称处理定标, 定范围调信号峰圆点大小打印选择movesw 后标定ds / wft 差异调二维谱, 调程序基本 2D 操作基本 H/C 操作进A 2D 操作特殊谱操作杂核操作弛豫操作变温操作简介检测意义检测步骤谱图处理强调提醒化学位移归属确定同分异构物立体结构辩明参数设定调出程序检测 (go)检测时间关键/ 选择性参数检测谱宽投影对齐nt / ni第一区放 H, 以后打印找 H 谱用到第 6 区做 cosy, 移动 H 过去, 以 H 为本底本底 H结合 COSY 程序关键参数: pw选择参数: nt,

10、ni NOESYgHSQC gCOSYgHMBC界面Vnmr6.1CVnmrJ2.2cTopspin3.0二维傅立叶, 对称处理定标, 定范围调信号峰圆点大小打印选择movesw 后标定ds / wft 差异调二维谱, 调程序基本 2D 操作基本 H/C 操作进A 2D 操作特殊谱操作杂核操作弛豫操作变温操作简介检测意义检测步骤谱图处理强调提醒化学位移归属确定同分异构物立体结构辩明参数设定调出程序检测 (go)检测时间关键/ 选择性参数检测谱宽投影对齐nt / nini 太小, 信号横长可以用 对称化 弥补色带相当于 门槛 (TH)由等高线密度圈, 判断核心位置(20, 1.2): 20 圈,

11、 间隔 1.2 单位观看投影图打印 plcosy(20, 1.2,1): 20 圈, 间隔 1.2 单位, 投影氢谱在第一区关联图由助于判断核心位置sc, wc 超过范围合理设置: wc=150, wc2=150sc=0, sc2=0合理设置: wc=150, wc2=150sc=0, sc2=0wc=宽度sc= 从右边距离wc2=高度sc2=从底向上距离absval (绝对值): 信号最强power (功率): 信号较圆power (功率): 信号较圆phase (相敏): 双色信号不是很满意时调 wti.底部: 调出 fid 信号中部: 和 fid 齐平上部: 合适峰高调至所有峰线头都出现

12、选择某峰调 wtiwti 调整 (右边正确)底部: 调出 fid 信号中部: 和 fid 齐平上部: 合适峰高wti 调好后信号增强 NOESYgHSQC gCOSYgHMBC界面Vnmr6.1CVnmrJ2.2cTopspin3.0二维傅立叶, 对称处理定标, 定范围调信号峰圆点大小打印选择movesw 后标定ds / wft 差异调二维谱, 调程序基本 2D 操作基本 H/C 操作进A 2D 操作特殊谱操作杂核操作弛豫操作变温操作简介检测意义检测步骤谱图处理强调提醒化学位移归属确定同分异构物立体结构辩明参数设定调出程序检测 (go)检测时间关键/ 选择性参数检测谱宽投影对齐nt / ni第

13、 2 区放碳谱,方便打印时找碳谱投影图转到其他区 (5) 定检测范围,获得 sw1 与 dof NOESYgHSQC gCOSYgHMBC界面Vnmr6.1CVnmrJ2.2cTopspin3.0二维傅立叶, 对称处理定标, 定范围调信号峰圆点大小打印选择movesw 后标定ds / wft 差异调二维谱, 调程序基本 2D 操作基本 H/C 操作进A 2D 操作特殊谱操作杂核操作弛豫操作变温操作简介检测意义检测步骤谱图处理强调提醒化学位移归属确定同分异构物立体结构辩明参数设定调出程序检测 (go)检测时间关键/ 选择性参数检测谱宽投影对齐nt / ni NOESYgHSQC gCOSYgHM

14、BC界面Vnmr6.1CVnmrJ2.2cTopspin3.0二维傅立叶, 对称处理定标, 定范围调信号峰圆点大小打印选择movesw 后标定ds / wft 差异调二维谱, 调程序基本 2D 操作基本 H/C 操作进A 2D 操作特殊谱操作杂核操作弛豫操作变温操作简介检测意义检测步骤谱图处理强调提醒化学位移归属确定同分异构物立体结构辩明参数设定调出程序检测 (go)检测时间关键/ 选择性参数检测谱宽投影对齐nt / ni NOESYgHSQC gCOSYgHMBC界面Vnmr6.1CVnmrJ2.2cTopspin3.0二维傅立叶, 对称处理定标, 定范围调信号峰圆点大小打印选择movesw

15、 后标定ds / wft 差异调二维谱, 调程序基本 2D 操作基本 H/C 操作进A 2D 操作特殊谱操作杂核操作弛豫操作变温操作简介检测意义检测步骤谱图处理强调提醒化学位移归属确定同分异构物立体结构辩明参数设定调出程序检测 (go)检测时间关键/ 选择性参数检测谱宽投影对齐nt / nigHETCOR NOESYgHSQC gCOSYgHMBC界面Vnmr6.1CVnmrJ2.2cTopspin3.0二维傅立叶, 对称处理定标, 定范围调信号峰圆点大小打印选择movesw 后标定ds / wft 差异调二维谱, 调程序基本 2D 操作基本 H/C 操作进A 2D 操作特殊谱操作杂核操作弛豫

16、操作变温操作简介检测意义检测步骤谱图处理强调提醒化学位移归属确定同分异构物立体结构辩明调出程序检测检测时间关键/ 选择性参数edccosygpswatmao1=4.5NS=2TD2 = 128xfbsymplotadjust axisadjust phasenoesyphswhsqcedetgphmbcgbndlockrgatopshim tuneazgcosygpswxfb? cross fourier both?标定二维谱调相位调相位 fancy 的三维透视三维轴旋转没有 vs 高度, 就是 2D 平面谱cosy 参数设定参数的全名/含义cosy 的参数设定乙基苯 (C6H5-CH2CH3

17、) 的 cosy 谱乙基苯 (C6H5-CH2CH3) 的 hsqc 谱 NOESYgHSQC gCOSYgHMBC界面Vnmr6.1CVnmrJ2.2cTopspin3.0二维傅立叶, 对称处理定标, 定范围调信号峰圆点大小打印选择movesw 后标定ds / wft 差异调二维谱, 调程序基本 2D 操作基本 H/C 操作进A 2D 操作特殊谱操作杂核操作弛豫操作变温操作简介检测意义检测步骤谱图处理强调提醒化学位移归属确定同分异构物立体结构辩明参数设定调出程序检测 (go)检测时间关键/ 选择性参数检测谱宽投影对齐nt / niVnmrJ 界面: 分成 4 部分1234及一些 popup

18、menu目录树参数区检视窗工作区信息指令输入pop up menugCOSY 谱, 调入 (拖/双击) 时自动处理gHSQC 谱处理方式和 vnmr6.1c 差不多多了快捷图标 NOESYgHSQC gCOSYgHMBC界面Vnmr6.1CVnmrJ2.2cTopspin3.0二维傅立叶, 对称处理定标, 定范围调信号峰圆点大小打印选择movesw 后标定ds / wft 差异调二维谱, 调程序基本 2D 操作基本 H/C 操作进A 2D 操作特殊谱操作杂核操作弛豫操作变温操作简介检测意义检测步骤谱图处理强调提醒化学位移归属确定同分异构物立体结构辩明参数设定调出程序检测 (go)检测时间关键/ 选择性参数检测谱宽投影对齐nt / ni输入 movesw 后, 化学位移会漂移, 输入 ds 可以发现改变.nl, rl(xxp) 更正回来随