右美托咪定抑制肾缺血再灌注炎性反应

1、右美托咪定抑制肾缺血/再灌注炎性反应*陈克研，张毅男，刁玉刚，周 锦，张铁铮(解放军沈阳军区总医院麻醉科，辽宁省沈阳市 110016)文章亮点：肾移植后肾缺血再灌注损伤一直是临床的热点问题，右美托咪定为临床常用的麻醉辅助用药，目前已有相关文献报道右美托咪定具有一定的脑保护和肾保护作用，文章率先就肾移植/肾缺血及炎症反应和C-X-C型趋化因子受体4的表达这一方面进行观察，具有一定的创新性。关键词：器官移植；器官移植基础实验；肾脏；缺血再灌注；右美托咪定；预处理；后处理；白细胞介素1；肿瘤坏死因子；C-X-C型趋化因子受体4；省级基金主题词：再灌注损伤；系统性炎症反应综合征；肾上腺素能激动剂；肾移

2、植基金资助：辽宁省科技攻关项目(2012225006)*摘要背景：在缺血/再灌注肾脏损伤的防治研究中，用药物激活或抑制机体某些因子从而保护肾组织，对肾移植和移植物的功能恢复有着重要意义。目的：探索右美托咪定对大鼠肾缺血/再灌注炎性因子及C-X-C型趋化因子受体4表达的影响。方法：40只大鼠随机等分为假手术组、缺血再灌注组、右美托咪定预处理组及右美托咪定后处理组。后3组行右肾切除，左肾缺血45 min，再灌注60 min，造肾缺血再灌注模型；右美托咪定预处理组于大鼠股静脉穿刺置管后泵注1 g/kg右美托咪定，10 min后改为0.5 g/kg，泵注30 min直至缺血即刻；右美托咪定后处理组于左

3、肾再灌注后静脉泵注0.5 g/kg右美托咪定 30 min。结果与结论：肾脏缺血再灌注大鼠肾脏损伤严重，炎症明显，肾小管扩张，有肾小球肾炎表现，血清中白细胞介素1和肿瘤坏死因子水平显著升高(P < 0.05)，血清和肾脏中C-X-C型趋化因子受体4水平也明显增加(P < 0.05)；经右美托咪定预处理或后处理的肾缺血再灌注大鼠血清中白细胞介素1和肿瘤坏死因子水平明显降低(P < 0.05)，血清和肾脏中C-X-C型趋化因子受体4水平也明显降低(P < 0.05)。提示肾缺血再灌注可致以炎性反应为特征的肾损伤；右美托咪定可以抑制炎性反应并弱化C-X-C型趋化因子受体4的表

4、达，具有一定的肾保护作用。Dexmedetomidine inhibits renal ischemia/reperfusion-induced inflammatory reactionChen Ke-yan, Zhang Yi-nan, Diao Yu-gang, Zhou Jin, Zhang Tie-zheng (Department of Anaesthesiology, General Hospital of Shenyang Military Region, Shenyang 110016, Liaoning Province, China)陈克研，男，1983年生，内蒙古自治区

5、通辽市人，汉族，2011年吉林大学毕业，博士，主要从事基础医学研究。chenkeyan888通讯作者：张铁铮，硕士，主任医师，解放军沈阳军区总医院麻醉科，辽宁省沈阳市 110016中图分类号:R318文献标识码:B文章编号:2095-4344(2013)53-09189-07修回日期：2013-09-16(201307138/YJ·Y)Chen Ke-yan, M.D., Department of Anaesthesiology, General Hospital of Shenyang Military Region, Shenyang 110016, Liaoning Prov

6、ince, ChinaCorresponding author: Zhang Tie-zheng, Master, Chief physician, Department of Anaesthesiology, General Hospital of Shenyang Military Region, Shenyang 110016, Liaoning Province, ChinaAccepted: 2013-09-16AbstractBACKGROUND: Previous studies addressing the prevention and treatment of ischemi

7、a/reperfusion kidney damage show that, some drugs could activate or inhibit the body to protect kidney tissue, which is of great significance in renal transplantation and graft functional recovery.OBJECTIVE: To explore the influence of dexmedetomidine on expressions of inflammatory factors and C-X-C

8、 chemokine receptor type 4 in rat with renal ischemia/reperfusion. METHODS: Forty rats were randomly divided into four equal groups: sham group, ischemia/reperfusion group, dexmedetomidine preconditioning group and dexmedetomidine post-treatment group. Except the sham group, the right kidney was rem

9、oved and the left kidney was subject to ischemia for 45 minutes and reperfusion for 60 minutes, thus establishing renal ischemia/reperfusion models in other three groups. As for preconditioning group, the rat femoral vein was punctured and transfused with 1 g/kg dexmedetomidine for 10 minutes, follo

10、wed by infusing 0.5 g/kg dexmedetomidine for 30 minutes until ischemia occurred. As for posttreatment group, the rats were infused with 0.5 g/kg dexmedetomidine for 30 minutes after reperfusion. RESULTS AND CONCLUSION: Serious kidney injury, obvious inflammation, tubular dilatation, and glomerulonep

11、hritis were found in rats with renal ischemia/reperfusion. The serum interleukin-1 and tumor necrosis factor- levels in ischemia/reperfusion, dexmedetomidine preconditioning and dexmedetomidine post-treatment groups were increased significantly (P < 0.05). The expression of serum and renal C-X-C

12、chemokine receptor type 4 was also increased (P < 0.05). Dexmedetomidine preconditioning or post-treatment 9195 / 7文档可自由编辑打印significantly decreased serum interleukin-1 and tumor necrosis factor- levels in rats with renal ischemia/reperfusion (P < 0.05). The same decline was observed in content

13、 of serum and renal C-X-C chemokine receptor type 4 (P < 0.05). Experimental findings indicate that renal ischemia/reperfusion can cause renal injury which is characterized by inflammatory reaction. Dexmedetomidine can reduce inflammatory reactions and attenuate C-X-C chemokine receptor type 4 ex

14、pression to protect the kidney.Subject headings: reperfusion injury; systemic inflammatory response syndrome; -adrenergic agonist; renal transplantationFunding: a grant from Liaoning Provincial Science and Technology Program, No. 2012225006*Chen KY, Zhang YN, Diao YG, Zhou J, Zhang TZ. Dexmedetomidi

15、ne inhibits renal ischemia/reperfusion-induced inflammatory reaction. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2013;17(53):9189-9195.0 引言 Introduction肾移植是当今治疗终末肾脏疾病最理想的方法之一。从50年前首例肾移植成功至今，已超过50万例肾衰竭患者通过肾移植延续了生命1-2。然而，肾移植围手术期缺血再灌注损伤的问题至今尚未解决。由于肾脏自身的结构特点使其成为缺血再灌注损伤中最为敏感器官之一3。当肾脏缺血时，血流量减少，肾小管内皮细胞损坏，导致肾小管堵塞，再灌注

16、后，细胞代谢功能紊乱，炎症递质释放，炎症反应加剧4-5。据报道，肾小球肾炎患者肾小管间质中淋巴细胞浸润、肾小球极周F细胞、近端小管上皮细胞及内皮细胞中C-X-C型趋化因子受体表达明显升高，而正常肾组织和微小病变肾脏组织中表达较低5-6。目前，在缺血再灌注肾脏损伤的防治研究中，主要针对某一环节进行调控，如单纯应用抗凋亡药物、抗氧化剂、核选择素拮抗剂等7-9，这些药物无法发挥整体疗效，且在临床应用中受限，达不到临床疗效。Suda等10通过建立小鼠缺血再灌注模型，认为分次阻断肾血管行预处理能减轻缺血再灌注对肾脏的损伤。也有研究证实，以启动肾脏内源性保护机制尤显重要，用药物激活或抑制机体某些因子从而保

17、护肾组织，对肾移植和移植物的功能恢复有着重要意义11-13。研究表明，2 受体激动剂可以维持肾髓质血流从而防止对比剂肾病保护肾脏，并可激动中枢和外周交感神经的突触前膜肾上腺素能受体，从而减弱外科手术引起的应激反应，降低血浆儿茶酚胺浓度14-16。右美托咪定是一种高度选择性2肾上腺素受体激动剂，不仅可以通过激动中枢神经系统引发并维持自然睡眠状态，产生镇静和催眠作用，而且可以避免1肾上腺素能受体引起的不良反应17-18。Bollucuoglu等19研究表明缺血再灌注是急性肾衰竭的主要原因之一，通过建立小鼠缺血再灌注模型，制作肾组织切片发现肾小管细胞肿胀，细胞固缩坏死，肾髓质有充血表现；而经腹腔注射

18、右美托咪定后，肾脏损伤明显降低，提示右美托咪定可提高肾损伤的耐受性。近来研究还发现右美托咪定可激活CC类人类趋化因子受体4，减少促炎因子，降低炎症反应20-23。Tan等24应用Meta分析显示，右美托咪定产生交感抑制作用，有益于长期氧供需失衡的心肌，从而发挥心肌保护作用。而有关右美托咪定在肾脏缺血再灌注损伤中是否具有器官保护作用、其机制是否与抗炎性反应有关尚缺少相关研究。实验旨在观察右美托咪定对肾缺血再灌注损伤中对炎症因子及C-X-C型趋化因子受体4的影响，为防治肾移植中的缺血/再灌注损伤提供理论依据。1 材料和方法 Materials and methods 设计：随机分组设计，对比观察。

19、时间及地点：实验于2012年6月至2013年6月在解放军沈阳军区总医院麻醉科实验室完成。材料：药物：右美托咪定由江苏恒瑞医药股份有限公司生产，药物批准文号：国药准字号H20090248，成分为盐酸右美托咪定，纯度：99%，剂型：注射剂，规格：2 mL，200 g化学结构式为：右美托咪定治疗大鼠肾缺血/再灌注的主要试剂及仪器：来源试剂及仪器美国AD公司美国ABCAM公司湖南湘仪实验室仪器开发有限公司美国BioTek公司美国BIO RAD公司白细胞介素1 ELISA检测试剂盒，肿瘤坏死因子 ELISA检测试剂盒，C-X-C型趋化因子受体4 ELISA检测试剂盒兔抗C-X-C型趋化因子受体4，HRP

20、-羊抗兔IgG水平离心机ELx800酶标仪蛋白电泳仪 动物：SPF级雄性SD大鼠40只，约8周龄，体质量250-300 g，由沈阳军区总医院实验动物科提供，生产许可证号：SCXK(军)2012-0002；使用许可证号：SYXK (军) 2012-0002。饲养环境：温度25 ，湿度 50%，12 h光照，充足食水。实验符合相关动物伦理学要求。实验方法：动物分组：SD大鼠随机分4组：假手术组、缺血再灌注组、右美托咪定预处理组和右美托咪定后处理组，各10只。肾缺血再灌注模型建立：术前大鼠禁食禁饮6 h。腹腔注射体积分数10%水合氯醛(3 mg/kg)实施麻醉。仿照文献10的方法建立肾缺血再灌注损伤

21、模型。具体步骤如下：腹中线4.0-5.0 cm切口，沿腹白线剪开，暴露腹腔；将回小肠、结肠和脾脏移至左侧，分离右肾，结扎肾蒂，取出右肾。将大鼠小肠、结肠、脾脏移至右侧，显露左侧肾脏和左肾蒂，用无损伤血管夹夹闭肾蒂；45 min后松开左肾血管夹，恢复灌注，见肾脏从暗紫色转成红色则说明缺血再灌注模型建立成功；缝合关闭腹腔。假手术组大鼠麻醉开腹后仅用温湿生理盐水纱布包裹肠管。药物干预：右美托咪定预处理组于造模前40 min，大鼠股静脉泵注1 g/kg 右美托咪定，10 min后改为 0.5 g/kg，泵注30 min直至造模。右美托咪定后处理组于左肾再灌注即刻，大鼠股静脉泵注1 g/kg 右美托咪定

22、，10 min后改为0.5 g/kg，泵注30 min停止。标本采集：模型建立成功后6 h，各组实验鼠用10%水合氯醛麻醉，眼球放血，收集血液，3 000 r/min离心(离心半径为7.0 cm)5 min，将上清吸出，移入1.5 mL离心管中，-80 保存备用；取部分肾组织固定于中性甲醛溶液中，其余部分存放于-80 冰箱保存。苏木精-伊红染色观察肾脏病理变化：将肾组织置中性甲醛液中固定一两天；流水冲4.0-5.0 h，用滤纸将组织浸干后，放入体积分数70%乙醇中过夜；用同样的方法取出组织置于体积分数80%乙醇中过夜；梯度乙醇复水，二甲苯中20 min；将组织放入蜡中3 h；取出组织放入金属包

23、埋盒中进行包埋；用切片机切片，厚度在 3-5 m之间；将切好的组织片置37 烤箱中过夜；浸入二甲苯中做脱蜡处理；将脱好蜡的切片，依次放入梯度乙醇复水、蒸馏水3 min；苏木精染色5 min；取出放入干净新接的自来水中进行反蓝，依次放入梯度乙醇脱水、二甲苯10 min；中性树胶封固，显微镜下观察肾脏病理组织学变化。ELISA法检测血清中白细胞介素1、肿瘤坏死因子和C-X-C型趋化因子受体4水平的变化：实验步骤参照ELISA试剂盒说明书进行：在酶标板第1排第1，2二孔加入 50 L标准品，依次倍比稀释；在每个加样孔中加入40 L样品稀释液，加入10 L样品；37 温育30 min；揭掉封板膜，弃去

24、液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 s后弃去，如此重复5次，拍干；每孔加入50 L酶标二抗，37 温育30 min；按上述方法洗板；每孔依次加入显色剂A和B各50 L，37 避光显色10 min；每孔加终止液50 L，终止反应；酶标仪检测，绘制标准曲线，并分析结果。Western-blot法检测检测肾脏中C-X-C型趋化因子受体4表达水平：将冻存的组织取出后加裂解液研磨，12 000 r/min (离心半径为7.0 cm)4 离心10 min，取上清液，按11比例加2倍Loading-buffer，沸水煮5 min。配制分离胶和浓缩胶，将上述样品加入胶中进行SDS-PAGE电泳；将胶取出放入

25、缓冲液中，水平摇 30 min；取与胶同等大小的滤纸和PVDF蛋白印迹膜，制作三明治夹膜，置转膜仪中进行转膜1 h；取出PVDF膜用TBST冲洗，加入脱脂乳封闭液，摇床上过夜；洗膜后加入兔抗C-X-C型趋化因子受体4抗体(1800稀释)，摇床上1 h；洗膜3次，加HRP-羊抗兔IgG (13 000稀释)，摇床上1 h。将膜在水中漂洗，ECL系统显影，分析免疫印迹的灰度值。主要观察指标：大鼠肾缺血/再灌注在右美托咪定干预后，白细胞介素1、肿瘤坏死因子和C-X-C型趋化因子受体4的表达变化。统计学分析：实验数据以±s表示，应用IBM-SPSS 19.0软件进行统计学分析，组间比较采用单

26、因素方差分析，P < 0.05为差异有显著性意义。 2 结果 Results2.1 实验动物数量分析 实验选用大鼠40只，分为4组，无脱失，全部进入结果分析。2.2 右美托咪定预处理和后处理均能减轻缺血再灌注肾脏组织的病理损伤 苏木精-伊红染色显示，与假手术组相比，缺血再灌注组大鼠肾脏损伤严重，炎症明显，肾小管扩张，充血、水肿，有肾小球肾炎表现。而右美托咪定预处理和后处理组肾脏缺血再灌注大鼠肾脏损伤明显减轻，炎症降低，细胞形态异常较少，见图1。2.3 右美托咪定预处理和后处理均能减轻缺血再灌注肾脏大鼠血清中白细胞介素1和肿瘤坏死因子的水平 ELISA检测发现，与假手术组相比，缺血再灌注组

27、大鼠血清中白细胞介素1和肿瘤坏死因子水平均显著升高(P < 0.05)；而经右美托咪定预处理或后处理的肾缺血再灌注大鼠血清中白细胞介素1和肿瘤坏死因子水平明显降低(P < 0.05)，接近正常水平(P > 0.05)，见表1，图2，3。 A：假手术组没有出现炎症反应B：缺血再灌注组出现明显的肾小管扩张、充血、水肿D：右美托咪定后处理组，炎症反应减少，形态异常细胞数量较少C：右美托咪定预处理组，炎症反应减少，形态异常细胞数量较少注：右美托咪定预处理和后处理能减轻肾脏缺血再灌注损伤。图1 右美托咪定预处理和后处理对大鼠肾脏缺血再灌注病理组织的影响(苏木精-伊红染色，×2

28、00)Figure 1 Effect of dexmedetomidine preconditioning and postprocessing on the pathology of rats with renal ischemia-reperfusion (Hematoxylin-eosin staining, ×200) 表1 右美托咪定预处理和后处理对缺血再灌注肾脏大鼠血清中白细胞介素1和肿瘤坏死因子的水平的影响Table 1 Effect of dexmedetomidine preconditioning and postprocessing on serum inter

29、leukin-1 and tumor necrosis factor- levels of rats with renal ischemia-reperfusion (±s, n=10, ng/L)组别白细胞介素1肿瘤坏死因子假手术组85.34±16.1358.64±13.22缺血再灌注组172.16±23.04a141.06±19.21a右美托咪定预处理组108.97±23.08ab 98.78±18.19ab右美托咪定后处理组117.29±18.48ab 97.69±16.28ab与假手术组比较，aP

30、 < 0.05；与缺血再灌注组比较，bP < 0.05。注：右美托咪定预处理和后处理能降低肾脏缺血再灌注损伤后大鼠血清中白细胞介素1和肿瘤坏死因子的水平。2.4 右美托咪定预处理和后处理均能减轻缺血再灌注肾脏大鼠血清和肾脏组织中C-X-C型趋化因子受体4的水平 ELISA检测发现，与假手术组相比，缺血再灌注组大鼠血清中C-X-C型趋化因子受体4显著升高(P < 0.05)；而经右美托咪定预处理或后处理的肾缺血再灌注大鼠血清中C-X-C型趋化因子受体4水平明显降低(P < 0.05)，接近正常水平(P > 0.05)，见表2。缺血再灌注组假手术组2502001501

31、00500右美托咪定后处理组白细胞介素1(ng/L)ab右美托咪定预处理组ab与假手术组比较，aP < 0.05；与缺血再灌注组比较，bP < 0.05。注：右美托咪定预处理和后处理能降低肾脏缺血再灌注损伤后大鼠血清中白细胞介素1的水平。图2 右美托咪定预处理和后处理对缺血再灌注肾脏大鼠血清中白细胞介素1的水平的影响Figure 2 Effect of dexmedetomidine preconditioning and postprocessing on serum interleukin-1 levels of rats with renal ischemia-reperfu

32、sionaaabab180160140120100806040200肿瘤坏死因子(ng/L)右美托咪定后处理组右美托咪定预处理组缺血再灌注组假手术组与假手术组比较，aP < 0.05；与缺血再灌注组比较，bP < 0.05。注：右美托咪定预处理和后处理能降低肾脏缺血再灌注损伤后大鼠血清中肿瘤坏死因子的水平。图3 右美托咪定预处理和后处理对缺血再灌注肾脏大鼠血清中肿瘤坏死因子的水平的影响Figure 3 Effect of dexmedetomidine preconditioning and postprocessing on serum tumor necrosis factor

33、- levels of rats with renal ischemia-reperfusion 进一步用Western blot对肾脏中C-X-C型趋化因子受体4的表达水平进行检测，发现假手术组大鼠肾脏仅见少量C-X-C型趋化因子受体4表达。与假手术组相比，缺血再灌注组大鼠肾脏组织中C-X-C型趋化因子受体4表达明显增高(P < 0.05)，而经右美托咪定预处理或后处理的肾缺血再灌注大鼠肾脏组织中C-X-C型趋化因子受体4表达水平明显减少(P < 0.05)，见图4。表2 右美托咪定预处理和后处理对缺血再灌注肾脏大鼠血清中C-X-C型趋化因子受体4的水平的影响Table 2 Ef

34、fect of dexmedetomidine preconditioning and postprocessing on serum C-X-C chemokine receptor type 4 levels of rats with renal ischemia-reperfusion (±s, n=10, ng/L)与假手术组比较，aP < 0.05 ；与缺血再灌注组比较，bP < 0.05。注：右美托咪定预处理和后处理均能减轻缺血再灌注肾脏大鼠血清中C-X-C型趋化因子受体4的水平。组别C-X-C型趋化因子受体4假手术组53.18±16.39缺血再灌注

35、组157.21±12.13a右美托咪定预处理组 88.92±13.98ab右美托咪定后处理组 97.19±14.18ab缺血再灌注组右美托咪定后处理组右美托咪定预处理组假手术组CXCR4-actina4.54.03.53.02.52.01.51.00.50大鼠肾脏组织中C-X-C型趋化因子受体4的水平(与-actin灰度的比值)abab假手术组右美托咪定后处理组右美托咪定预处理组缺血再灌注组与假手术组比较，aP < 0.05；与缺血再灌注组比较，bP < 0.05。注：右美托咪定预处理和后处理均能减轻缺血再灌注肾脏大鼠肾脏组织中C-X-C型趋化因子受体

36、4的水平。图4 右美托咪定预处理和后处理对缺血再灌注大鼠肾脏组织中C-X-C型趋化因子受体4的水平的影响Figure 4 Effect of dexmedetomidine preconditioning and postprocessing on C-X-C chemokine receptor type 4 levels of rats with renal ischemia-reperfusion3 讨论 Discussion目前，缺血再灌注损伤已成为临床常见的病理现象25，由于肾脏结构和功能的特殊性，肾移植手术中发生的缺血再灌注损伤尤为典型和严重，也更多的引发研究者的重视。缺血再灌注损

37、伤的发生机制主要分缺血阶段和再灌注阶段26-27。肾组织缺血时血流量下降，肾脏处于缺氧状态，再灌注后虽然缺血的组织恢复血流，但能量代谢发生障碍，细胞通透性改变，激活炎症反应，加剧组织的损伤28。实验通过建立的大鼠缺血再灌注损伤动物模型模拟临床肾缺血再灌注过程，结果发现肾脏再灌注6 h后损伤严重，苏木精-伊红染色后其肾小管扩张、炎症明显，有肾小球肾炎表现。血生化检测证实其肌酐和尿素氮的含量明显增高。该结果一方面证明大鼠缺血再灌注损伤模型建立成功29，结果与人医临床基本一致，另一方面说明缺血再灌注损伤后肾组织损伤严重。炎症过程始于血管内皮损伤和肾小管细胞功能障碍，一系列的免疫调节细胞因子，包括白细

38、胞介素1、白细胞介素6、白细胞介素8、肿瘤坏死因子和单核细胞趋化蛋白1，分别释放入肾组织和血液循环30-33。在缺血再灌注损伤过程中，肾小管上皮细胞产生的肿瘤坏死因子、白细胞介素1、白细胞介素6和白细胞介素18等细胞因子促使血管黏附分子表达增高，从而介导白细胞和内皮细胞的黏附作用34-36。实验结果表明，肾脏缺血45 min，再灌注6 h后血清中白细胞介素1和肿瘤坏死因子水平明显增高。可见，炎症反应在缺血再灌注损伤过程中发挥重要作用。炎症反应是肾缺血再灌注损伤的重要原因，其发生机制主要与C-X-C型趋化因子受体家族的作用相关37-38。据文献报道，C-X-C型趋化因子受体4在肾脏缺血后炎症反应

39、过程中起到重要的调节作用，当肾小管上皮细胞在急性缺血时C-X-C型趋化因子受体4表达增多，而灭活C-X-C型趋化因子受体4对小鼠急性缺血性肾损伤有保护作用39。消除C-X-C型趋化因子受体4小鼠肾组织肿瘤坏死因子和白细胞介素6等细胞因子的表达及中性粒细胞的浸润数量明显降低40。实验通过建立的大鼠缺血再灌注模型证实，大鼠缺血再灌注后血清中炎症因子显著升高，同时血清和肾组织中的C-X-C型趋化因子受体4表达水平亦明显升高。该结果与已报道C-X-C型趋化因子受体4在干细胞治疗肿瘤中介导炎症反应的结果一致。提示在缺血再灌注损伤过程中C-X-C型趋化因子受体4可能参与白细胞介素1和肿瘤坏死因子等炎症因子

40、的表达调控。目前研究表明，以启动肾脏内源性保护机制尤显重要，用药物激活或抑制机体某些因子从而保护肾组织，对肾移植和移植物的功能恢复有着重要意义41-42。Dederer43证实2受体激动剂可以维持肾髓质血流从而防止造影剂肾病保护肾脏，并可激动中枢和外周交感神经的突触前膜肾上腺素能受体，从而减弱外科手术引起的应激反应，起到镇静和镇痛的作用。右美托咪定是一种高度选择性2肾上腺素受体激动剂，分布于全身多种细胞、组织和器官，其生理作用因分布部位不同而显现多样性44。右美托咪定对中枢2-肾上腺素受体激动的选择性更强，通过激动突触前膜2受体，抑制去甲肾上腺素的释放，并终止了疼痛信号的传导；通过激动突触后膜

41、受体，右美托咪定抑制了交感神经活性从而引起血压和心率的下降；从而起到镇静和镇痛的作用45-46。作者所在课题组在先前的研究中已证实右美在体外循环中具有脑保护的作用。这次实验分别在大鼠缺血再灌注模型中实施右美托咪定预处理和后处理，肾脏病理组织学观察结果显示，右美托咪定两组中肾脏损伤明显减少。说明右美托咪定在缺血再灌注中对肾脏有一定的保护作用。既往的研究显示，2受体与C-X-C型趋化因子受体都是G蛋白跨细胞膜的受体47，2激动之后是通过胞内复杂的信号途径直接影响C-X-C型趋化因子受体的转录与表达，还是通过影响某种胞外因子的产生或分泌间接调节C-X-C型趋化因子受体的转录与表达，目前尚不清楚，有待

42、深入研究加以阐释。Silva-Filho等48报道血管紧张素是由肾素转换成紧张素之后，经血管紧张素转换酶作用转变而来的；2激动后可抑制肾素血管紧张素生成下调C-X-C型趋化因子受体的表达，从而促进各种非感染性肾脏疾病的发展。实验对右美托咪定预处理组和右美托咪定后处理组中C-X-C型趋化因子受体4的表达情况进行综合检测，结果表明，右美托咪定预处理和后处理组血清中C-X-C型趋化因子受体4水平差异不显著，但明显低于缺血再灌注组；用Western blot对肾脏中C-X-C型趋化因子受体4做进一步检测，发现与缺血再灌注组相比，右美托咪定处理的两组肾脏中C-X-C型趋化因子受体4表达量明显降低。提示C

43、-X-C型趋化因子受体4可能抑制白细胞介素1和肿瘤坏死因子等炎症因子表达介导右美托咪定的器官保护作用。但是右美托咪定在体外循环及缺血再灌注中器官保护作用机制以及C-X-C型趋化因子受体4在其中如何起到的调节作用还有待进一步研究。综上所述，肾缺血再灌注可导致以炎性反应为特征的肾损伤。肾缺血再灌注可致以炎性反应为特征的肾损伤；右美托咪定可以抑制炎性反应并弱化C-X-C型趋化因子受体4的表达，具有一定的肾保护作用。致谢：感谢解放军沈阳军区总医院实验动物科王洋主任和张贺硕士在实验过程中给予的大力协助。 作者贡献：实验设计为张铁铮、陈克研；实验实施为陈克研，张毅男；实验评估为刁玉刚，资料收集为周锦。陈克

44、研、张毅男成文；刁玉刚、张铁铮审校；陈克研对文章负责。 利益冲突：课题未涉及任何厂家及相关雇主或其他经济组织直接或间接的经济或利益的赞助。 伦理要求：实验过程中对动物的处置符合相关动物伦理学标准的条例。作者声明：文章为原创作品，数据准确，内容不涉及泄密，无一稿两投，无抄袭，无内容剽窃，无作者署名争议，无与他人课题以及专利技术的争执，内容真实，文责自负。4 参考文献 References1 Yoo CS, Shin YH, Ko JS, et al. Anesthetic management including extracorporeal membrane oxygenation thera

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