酶工程学-第十一、十二周分子修饰

1、酶工程学Enzyme Engineering 第六章第六章酶工程学酶工程学第十一周 学习内容 绪论(第一章)第一章第一章酶工程学酶工程学 酶的生产 酶的改性 酶的应用酶生物合成的基本理论(第二章)酶的生物合成法(第三章)酶的提取与分离纯化(第四章)酶改性的基本理论(第五章)酶分子修饰酶分子修饰(第六章)酶固定化(第七章)酶应用的基本理论(第八章)酶反应器的应用(第九章)酶的应用领域(第十章)第六章 酶分子修饰通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。酶分子侧链基团的化学修饰：使酶分子的侧链基团发生改变，从而改变酶分子的特性和功能的修饰方法。定义

2、：定义：酰化试剂可被修饰的氨基酸残基侧链例如：丹磺酰氯，二甲氨基萘磺酰氯，DNS烷基化试剂可被修饰的氨基酸残基侧链R X：2，4二硝基氟苯，DNFB多肽序列分析法：Sanger N-端序列分析法，1945年Na2S4O6：连四硫酸钠四硝基甲烷二硫二硝基苯甲酸二硫二硝基苯甲酸4，4二硫二吡啶二硫二吡啶对氯汞苯甲酸对氯汞苯甲酸2氯汞氯汞4硝基苯酚硝基苯酚N-乙基马来酰亚胺乙基马来酰亚胺过氧化氢氧化过氧化氢氧化氨基的化学修饰氨基的化学修饰乙酸酐乙酸酐246三硝基苯酚三硝基苯酚24二硝基氟苯二硝基氟苯碘代乙酸碘代乙酸还原烷基化还原烷基化丹磺酰氯丹磺酰氯碳二亚胺碳二亚胺硼氟化三甲锌盐硼氟化三甲锌盐酯化酯

3、化焦炭酸二乙酯焦炭酸二乙酯碘乙酸碘乙酸碘化反应碘化反应胍基的化学修饰胍基的化学修饰丁二酮丁二酮12环己二酮环己二酮苯乙二醛苯乙二醛RNADNA2OH脱氧腺苷酸脱氧腺苷酸二、常用的修饰剂右旋糖酐、聚乙二醇、肝素、蔗糖聚合物、聚氨基酸等右旋糖酐肝素聚蔗糖聚赖氨酸聚乙二醇三、修饰方法修饰酶四、大分子化学修饰的优点四、大分子化学修饰的优点1. 1.通过修饰提高酶的活性通过修饰提高酶的活性核糖核酸酶 Vs 右旋糖酐修饰核糖核酸酶 1 ： 2.25胰凝乳蛋白酶 Vs 右旋糖酐修饰胰凝乳蛋白酶 1 ： 5.12.2.通过修饰增强酶的稳定性通过修饰增强酶的稳定性酶的半衰期t1/2：酶的活力降低到原来活力一半时

4、所经过的时间。很多修饰剂分子具有多个活性基团，常与酶形成多点交联，使酶的空间结构稳定，特别是使酶活性中心的构象得到保护。举例：超氧化物岐化酶（举例：超氧化物岐化酶（SODSOD）O2- + O2- + 2H+ =H2O 2 +O2SOD作用：保护DNA，蛋白质和细胞膜SOD药用：类风湿性关节炎，白内障，膀胱炎，皮肤炎，红斑狼疮等。SOD静脉注射：t1/2=630min右旋糖酐-SOD：t1/2=7h聚乙二醇-SOD：t1/2=35h3.3.通过修饰降低或消除酶的抗原性通过修饰降低或消除酶的抗原性当外源蛋白非经口进入人或动物体内后，体内血清中就可能出现与此外源蛋白特异性结合的物质，这些物质称为抗体，能引起体内产生抗体的物质称为抗原。大分子化学修饰是降低甚至消除酶抗原性的有效方法之一乙二胺四乙酸(Ethylene Diamine Tetraacetic A