内源性一氧化氮与硫化氢在大鼠低氧性肺动脉高压中的相互作用

1、KEY WORDS北 京 大 学 学 报 （ 医 学 版 ）·52·JOURNAL OF PEKING UNIVERSITY（ HEALTH SCIENCES） Voi. 36 No. 1 Feb. 2004·论著·内源性一氧化氮与硫化氢在大鼠低氧性肺动脉高压中的相互作用张清友1 ，杜军保1 ，石琳1 ，张春雨1 ，闫辉1 ，唐朝枢2（北京大学第一医院 1. 儿科，2. 心血管病研究所，北京100034） 关键词一氧化氮；硫化氢；低氧；肺动脉高压 摘 要目的：研究一氧化氮（ nitric oxide，NO）/ 一氧化氮合酶（ nitric oxygnas

2、e，NOS）体系和硫化氢（ hydrogen sui-fide，H2 S）/ 胱硫醚 !-裂解酶（ cystathionine-!-iyase，CSE）体系在低氧性肺动脉高压发生机制中的作用及其相互关系。方法：将 25 只大鼠随机分为 4 组：低氧组（7 只）、低氧 + !-NAME 组（给与 NOS 抑制剂 N" -硝基-!-精氨酸甲酯处理的低氧组，6 只）、低氧 + PPG 组（给与 CSE 抑制剂炔丙基甘氨酸处理的低氧组，6 只）和对照组（6 只）。低氧21 d 后，测定肺动脉平均压、血浆 NO 及 H2 S 含量，分别测定低氧组、低氧 + !-NAME 组及对照组 CSE 活

3、性，应用免疫组织化学的方法检测低氧组、低氧 + PPG 组及对照组的肺动脉内皮细胞 eNOS 表达。结果：低氧 21 d 大鼠肺动脉平均压力明显增高，同时血浆中 NO 和 H2 S 含量、肺动脉内皮细胞 eNOS 表达及肺组织 CSE 活性亦明显下降；而低氧 + !-NAME 组，伴随着 NO 含量的下降，肺动脉平均压显著上升，同时，血浆中的 H2 S 含量及肺组织 CSE 活性较低氧组显著上升；在低氧 + PPG 组，伴随血浆 H2 S 含量的降低，肺动脉压力显著升高，同时血浆中的 NO 含量及肺血管内皮细胞 eNOS 表达也较低氧组显著上升。结论：内源性 NO / NOS 体系与 H2 S

4、 / CSE 体系在低氧性肺动脉高压中呈现相互的负性调节作用。它们既相互独立又以网络调节的方式共同参与低氧性肺动脉高压形成的调控机制。中图分类号R331 文献标识码A 文章编号1671-167X（2004）01-0052-05Interaction between endogenous nitric oxide and hydrogen sulfide in pathogenesis of hypoxic pulmonary hypertensionZHANG Oing-you1 ，DU Jun-bao1 ，SHI Lin1 ，ZHANG Chun-yu1 ，YAN Hui1 ，TANG Ch

5、ao-shu2（1. Department of Pediatrics，2. Institute of Cardiovascuiar Research，Peking University First Hospitai，Beijing 100034，China）Nitric oxide；Hydrogen suifide；Hypoxic；Puimonary hypertensionSUMMARY Objective：To investigate the interaction between nitric（ NO）/ nitric oxygenase（ NOS） and hydrogen suif

6、ide（ H2 S）/ cystathionine-!-iyase（ CSE）system in the pathogenesis of hypoxic puimo-nary hypertension. Methods：25 rats were randomiy divided into four groups：hypoxic group（ " = 7 ）， hypoxic + !-NAME group（ " = 6 ），hypoxic + PPG group（ " = 6）and controi group（ " = 6 ）. After 21 day

7、s，puimonary atery mean pressure（ mPAP）of each rat was evaiuated，and the piasma concentration of H2 S and NO was measured. Meanwhiie，the activities of CSE in puimonary tissue in hypoxic，hypoxic + !-NAME and controi groups were detected，respectiveiy，and expressions of NOS in puimonary arteries in hypo

8、xic，hypoxic + PPG and controi groups were aiso detected by immunohistochemistry technigue. Results：mPAP was significantiy increased in hypoxic rats as compared with normai controis. Meanwhiie， compared with controis，the production of NO and H2 S in piasma，the activity of CSE in puimonary tissue and

9、expression of NOS in puimonary arteries were markediy decreased in hypoxic rats. However，mPAP was significantiy increased in hyopxic + !-NAME group as compared with hypoxic groups，and at the same time，the piasma concentration of NO was markediy decreased. However，the piasma concentration of H2 S and

10、 the activity of CSE in puimonary tissue in hyopxic + !-NAME group were increased signifi-cantiy as compared with those of hypoxic group. PPG aiso worsened puimonary hypertension of hypoxic rats，however，it increased endogenous production of NO and the expression of NOS of puimonary arteries obviousi

11、y. Conclusion：There is a negative feed back effect between NO / NOS system and H2 S / CSE sys-tem in deveiopment of hypoxic puimonary hypertension. They might interact with each other and there-基金项目：教育部博士学科点专项科研基金（20020001063）、国家重大基础研究发展规划项目基金（ G2000056905）和国家自然科学基金（30271373）资助 Supported by the Doct

12、orate Training Program Foundation of the Ministry of Education of China（20020001063），the Major State Basic Reseach Deveiopment Program of Peopies Repubiic of China（ G2000056905）and the Nationai Naturai Sciences Foundation of China（30271373）ACorresponding author emaii，junbaodu ht. roi. cn. net张清友，等 内

13、源性一氧化氮与硫化氢在大鼠低氧性肺动脉高压中的相互作用·53·fore play an important regulating role in hypoxic pulmonary hypertension.（Peking Uniu Health Sci，2004，36：52 - 56）低氧性肺动脉高压是临床众多心、肺疾病发生、发展过程中重要的病理生理环节，阐明其发病机制1是当今该领域亟待解决的重要课题 。内源性气体信号分子一氧化氮（ nitric oxide，NO）和一氧化碳（ carbon monoxide，CO）的发现，将低氧性肺动脉高压的发病机制研究带入了一个全新阶

14、段。而最近发现人体内含硫氨基酸代谢产物，过去一直被认为是毒性气体的硫化氢（ hydrogen sulfide，H2 S）具有重要的生物学功能。人们推测 H2 S 可能是在 NO 和 CO2之外机体的第 3 种气体信号分子。我们课题组近3期的研究发现，内源性 H2 S 体系的下调也是低氧性肺动脉高压及肺血管结构重构的重要机制之一。NO 和 H2 S 都是小分子气体，能自由通过各种生物膜，并具有持续产生、传播迅速、弥散性强和作用广泛的特点，而二者又主要分别来自内皮细胞和平滑肌细胞等不同类型的细胞，在病生理状态下发挥着重要的生物学功能。那么心肺血管系统是否存在由NO 与 H2 S 构成的信号调节网络

15、？基于以上问题，我们将内源性 NOS 抑制剂 N! -硝基-L-精氨酸甲酯（ N! -nitro-L-arginine methyl ester，L-NAME）及 CSE4的抑制剂炔丙基甘氨酸（ Propargylglycine，PPG）应用于慢性低氧大鼠，观察了肺循环的 H2 S / CSE 系统和 NO / NOS 系统的变化，来探讨两系统在低氧性肺动脉高压发生机制中的作用及其意义。1 材料与方法1. 1低氧肺动脉高压大鼠动物模型复制及实验分组选取体重 180 200 g 的健康雄性 Wistar 大鼠25 只，随机分为：对照组（ n = 6），低氧组（ n = 7），低氧 + L-NAM

16、E 组（ n = 6 ）和低氧 + PPG 组（ n = 6 ）。将低氧组和低氧 + L-NAME 组大鼠置于常压低氧舱内含 10%（体积分数）O2 ，90%（体积分数）N2 ，每天连续低氧 6 h，共 21 d。对低氧 + L-NAME 组大鼠每天低氧前腹腔注射 L-NAME（5 mg / kg，每次使用前新鲜配制）；低氧 + PPG 组大鼠按文献4所述每天低氧前腹腔注射 PPG（30 mg / kg）。低氧组及对照组大鼠腹腔注射等量生理盐水。各组大鼠饮食及饮水条件相同。1. 2血流动力学测定及标本制备低氧实验结束后（第 22 天），给大鼠腹腔注射120 g / L 乌拉坦 10 mL /

17、kg 体重麻醉，用右心导管法测定肺动脉平均压（ mPAP），颈动脉插管测定体循环平均压（ mAP）。从肺动脉中取血 5 mL，置于肝素抗凝管中，离心后取血浆检测 H2 S 含量或 / 和 NO 含量。打开胸腔取一侧肺叶以 10%（体积分数）甲醛溶液固定，梯度乙醇顺序脱水，二甲苯透明，石蜡包埋切片（厚 5 "m），用于免疫组织化学分析。取另一侧肺叶经液氮迅速冷冻后 - 70 C 保存，制备肺组织匀浆。1. 3血浆 NO 含量的间接测定硝酸还原酶测定法。因 NO 化学性质活泼，半衰期极短，迅速与分子氧反应生成 NO2 - 和 NO3 - ，故以血浆或肺组织匀浆 NO2 - 和 NO3 -

18、 之和检测 NO的相对含量，应用 Bioting-tech 公司提供的 NO 测定试剂盒，采用硝酸还原酶特异性地将 NO3 - 还原为NO2 - ，NO2 - 与显色剂亚乙烯二胺作用，生成粉红色偶氮化合物，通过比色测出 NO2 - / NO3 - 含量。1. 4血浆中 H2 S 含量测定3采用去蛋白的方法 。首先在试管中加入 10 g / L 醋酸锌 0. 5 mL，然后加入 0. 1 mL 血浆标本，振荡混匀，使血浆中的硫离子与醋酸锌充分反应形成硫化锌沉淀而固定下来；再依次加入 20 mmol / L 对苯二胺盐酸盐 0. 5 mL 和 30 mmol / L 三氯化铁 0. 5 mL，室温

19、孵育 20 min 使之充分显色。再加入 10%（体积分数）三氯醋酸 1 mL 使蛋白沉淀下来，加 2. 5 mL 蒸馏水补足体积至 5 mL。6 000 r / min 离心 5 min，吸出上清液，用分光光度计在波长 670 nm 处检测上清液的吸光度。根据 H2 S 标准曲线计算上清液中 H2 S 的含量。1. 5 肺组织 CSE 活性测定参照文献5方法测定对照组、低氧组及低氧+ L-NAME 组的肺组织 CSE 活性。取大鼠肺组织在冰冷的 50 mmol / L pH 6. 8 的磷酸钾缓冲液中研磨成匀浆。反应在 25 mL 锥形瓶中进行，反应体积 1 mL，含 100 mmol /

20、L pH 7. 4 的磷酸钾缓冲液、10 mmol / L L-半胱氨酸、2 mmol / L 5*-磷酸吡哆醛和 10 g / L 的组织匀浆。在中央室中加入 10 g / L 的醋酸锌 0. 5 mL，并放入滤纸增加吸收面积。用氮气将锥形瓶充盈 30 s 后石蜡膜封口，转移到 37 C 水浴摇床中开始反应。90 min 后向其中注入 500 g / L 的三氯醋酸 0. 5 mL 中止反应，继续水浴 60 min 后将中央室的内容物转移到含 3. 5 mL 蒸馏水的试管中，加入 20 mmol / L 对苯二胺盐酸盐 0. 5 mL 和 30北 京 大 学 学 报 （ 医 学 版 ）

21、83;54·JOURNAL OF PEKING UNIVERSITY（ HEALTH SCIENCES） VOl. 36 NO. 1 FGb. 2004mmOl / L三氯化铁 0. 4 mL。室温孵育 20 min 后用分光光度计在波长 670 nm 处检测溶液吸光度值。根据 H2 S 标准曲线计算溶液中 H2 S 的产量。组织中CSE 活性以单位重量的组织在单位时间内生成 H2 S的量以 !mOl（/g·min）表示。1. 6GNOS 的免疫组织化学检测检测对照组、低氧组及低氧 + PPG 组大鼠肺动脉内皮细胞 GNOS 表达。肺组织石蜡切片经常规脱蜡水化，3%（体积分

22、数）H2 O2 消除内源性过氧化物酶 20 min，血清封闭 30 min，滴加一抗（ GNOS 免疫组织化学检测试剂盒，天津 TBD 生物技术公司），37 C 湿盒孵育 2 1，顺序滴加二抗（生物素化羊抗兔IgG）、三抗（辣根链酶卵白素），分别置 37 C 湿盒孵育 1 1，DAB 显色，苏木素复染。阴性对照以血清代替一抗，其余步骤相同。光学显微镜下，细胞质呈棕黄色为阳性信号。半定量积分分析：根据肺内动脉的外径将其分为大型肺动脉（ > 150 !m）、中型肺动脉（50 150!m）和小型肺动脉（15 50 !m）。每份标本中各级肺动脉至少检测 6 10 条，分别判定每条肺动脉内皮细胞

23、GNOS 阳性表达的百分比。将 GNOS 的表达强度分为 3 级：- ，+ ，+ + ，分别代表肺动脉中 0，50% ，> 50% 且 100% 的内皮细胞呈现阳性表达。为了便于理解，将肺动脉内皮细胞中 GNOS 含量用积分值表示，即 GNOS 不同表达强度的肺动脉的百分比乘以反应强度加权值（ - ，+ 和 + + 的反应强度加权值分别为 0，50 和 100）。1. 7统计学分析数据均以均数 1 标准差（ x 1 s）表示，多组间比较用单因素方差分析（ F 检验），两两比较用 g 检验。应用 SPSS10. 0 统计软件进行。2 结果2. 1L-NAME 对肺动脉压力及内源性 H2 S

24、 / CSE 的影响（表 1）2. 1. 1 L-NAME 对肺循环血流动力学的影响 肺动脉压力在对照组、低氧组及低氧 + L-NAME 组 3组大鼠之间差异有显著性（ P < 0. 05）。低氧 21 d大鼠肺动脉压力较对照组增加 46. 57% ；低氧 + L-NAME 组大鼠肺动脉压力较对照组和低氧组分别增加 72. 39% 和 17. 61%（ P < 0. 05）。2. 1. 2 L-NAME 对血浆 NO2 - / NO3 - 含量的影响血浆的 NO2 - / NO3 - 含量在对照组、低氧组及低氧 +L-NAME 组 3 组大鼠之间差异具有显著性（ P < 0.

25、 01）。低氧组大鼠肺组织匀浆 NO2 - / NO3 - 含量较对照组降低 61. 27% ；而低氧 + L-NAME 组大鼠肺组织匀浆 NO2- / NO3- 含量较对照组和低氧组分别降低 89. 04% 和 71. 32%（ P < 0. 01）。2. 1. 3 L-NAME 对血浆 H2 S 含量的影响对照组、低氧组及低氧 + L-NAME 组 3 大鼠血浆中 H2 S 含量之间差异具有显著性（ P < 0. 01）。低氧 21 d大鼠血浆中 H2 S 含量较对照组降低 33. 43% ，差异具有显著性（ P < 0. 01）。而低氧 + L-NAME 组大鼠血浆中

26、H2 S 含量较低氧组增加 32. 33% ，差异具有显著性（ P < 0. 05）；2. 1. 4 L-NAME 对肺组织 CSE 活性的影响 肺组织 CSE 活性在对照组、低氧组及低氧 + L-NAME 组 3 组大鼠之间的差异具有显著性（ P < 0. 01）。低氧21 d 大鼠肺组织 CSE 活性较对照组降低53. 07% ，差异具有显著性（ P < 0. 01）。而低氧 + L-NAME 组大鼠肺组织 CSE 活性较低氧组增加 39. 53% ，差异具有显著性（ P < 0. 05）。2. 2 PPG 对肺动脉压力及内源性 NO / NOS 的影响（ 表 2）

27、2. 2. 1 PPG 对肺动脉压力的影响 肺动脉压力在对照组、低氧组及低氧 + PPG 组 3 组大鼠之间差异有显著性（ P < 0. 01）。低氧 21 d 大鼠肺动脉压力较对照组增加 46. 57% ；而低氧 + PPG 大鼠肺动脉压力较对照组和低氧组分别增加 75. 61% 和 19. 87%（ P < 0. 05）。2. 2. 2 PPG 对血浆 H2 S 含量的影响 对照组、低氧组及低氧 + PPG 组 3 组大鼠血浆中 H2 S 含量之间差异具有显著性（ P < 0. 01）。低氧组大鼠血浆H2 S 含量较对照组降低 40. 58%（ P < 0. 01）

28、，而低氧+ PPG 组大鼠血浆 H2 S 含量较对照组和低氧组分别降低 51. 73% 和 27. 45%（ P < 0. 05）。2. 2. 3 PPG 对血浆 NO2-/ NO3- 含量的影响血浆的 NO2- / NO3- 含量在对照组、低氧组及低氧 +PPG 组 3 组大鼠之间差异具有显著性（ P < 0. 05）。低氧 21 d 大鼠血浆中 NO2- / NO3- 含量较对照组降低 61. 32% ，差异具有显著性（ P < 0. 01）。而低氧 +PPG 组大鼠血浆中 NO2-/ NO3- 含量较低氧组增加54. 94% ，差异具有显著性（ P < 0. 05

29、）。2. 2. 4PPG 对肺动脉血管内皮 GNOS 表达的影响3 级肺内动脉内皮细胞 GNOS 蛋白表达在对照组、低氧组及低氧 + PPG 组 3 组大鼠间差异具有显著性（ P < 0. 01）。其中低氧组大鼠大、中、小 3 级肺动脉内皮细胞 GNOS 蛋白表达积分值均较对照组明显减少；低氧 + PPG 组大鼠该积分值较低氧组有显著增加（P < 0. 05）。张清友，等内源性一氧化氮与硫化氢在大鼠低氧性肺动脉高压中的相互作用·55·表 1L-NAME 对低氧大鼠肺动脉压力及内源性 H2 S / CSE 体系的影响（ x 1 s）Table 1 L-NAME r

30、eguIated puImonary hypertension and endogenous H2 S / CSE system（ x 1 s）GroupRatmPAPSerum NO2 - / NO3 -Serum H2 SActivity of CSE of Iung（ I）（ mm Hg）（ !moI / L）（ !moI / L） !moI（/ g·min）Hypoxic720.5 1 2.831 1 9196 1 220. 130 1 0. 022Hypoxic + L-NAME624.1 1 0.6#9 1 4#289 1 19#0. 215 1 0. 086#Contr

31、oI614.0 1 3.281 1 23294 1 260. 277 1 0. 089P < 0. 01，compared with controI group；#P < 0. 05，compared with hypoxic group；1 mm Hg = 0. 133 kPa.表 2PPG 对低氧大鼠肺动脉压力及内源性 NO / NOS 体系的影响（ x 1 s）Table 2PPG reguIated puImonary hypertension and endogenous NO / NOS system（ x 1 s）GroupRatmPAPSerum H2 SSerum

32、 NO2 - / NO3-eNOS expression in endotheIiaI ceIIs（ I）（ mm Hg）（ !moI / L）（ !moI / L）LargeMedianSmaIIHypoxic720.5 1 2.8196 1 2231 1 966 1 661 1 1557 1 11Hypoxic + PPG624.6 1 0.7#142 1 45#69 1 21#75 1 14#77 1 1186 1 7#ControI714.0 1 3.2294 1 2681 1 2380 1 886 1 588 1 7P < 0. 01，compared with controI

33、 group；#P < 0. 05，compared with hypoxic group；1 mm Hg = 0. 133 kPa.3 讨论我们前期的研究显示，在慢性低氧性肺动脉高压时，内源性 NO 含量、NOS 蛋白和基因表达均明显下调，而诱导肺内 NOS 的高表达，可增加体内 NO含量，防治低氧性肺动脉高压和肺血管结构重建6。H2 S 过去一直被认为是毒性气体，近年来被发现具有与 NO 和 CO 相似的生物学特征，开始引起了人们的重视。在机体内，5*-磷酸吡哆醛依赖酶包括胱硫醚 "-合成酶（ cystathionine -"-synthase，CBS）和胱硫醚

34、#-裂解酶（ cystathionine-#-Iyase，CSE）可以催化半胱氨酸分解代谢产生内源性 H2 S7。1997年，Hosoki 等8发现，H2 S 可以舒张大鼠的血管平滑肌，降低动脉血压。我们课题组近期的研究发现，在大鼠低氧性肺动脉高压时，机体内源性 H2 S 体系下调，补充 H2 S 对低氧诱导的肺动脉高压和肺血管结构重构有明显的缓解作用3。因此提示，内源性H2 S 体系的下调也是低氧性肺动脉高压及肺血管结构重构的重要机制之一。本研究结果亦证实，在低氧 21 d 大鼠体内 NO含量和 H2 S 含量均下降，无论是给予内源性 NOS 抑制剂 L-NAME 阻断内源性的 NO 生成还

35、是给予 CSE的抑制剂 PPG，伴随着体内 NO 或 H2 S 水平的下降，肺动脉压力会进一步升高。以上的研究揭示了内源性 NO 和 H2 S 在低氧性肺动脉高压形成中的重要病理生理意义，然而两系统在低氧性肺动脉高压这一过程中的相互作用尚没有阐明。我们通过本实验发现，内源性 NO 在低氧性肺动脉高压大鼠中对 H2 S / CSE 体系呈现为抑制作用。当应用 L-NAME 阻断内源性 NO 生成时，体内的 H2 S 水平升高，CSE 的活性增高。同样，我们还发现内源性 H2 S 在低氧性肺动脉高压大鼠中对 NO / NOS 体系亦呈现为抑制作用。当应用 PPG 阻断内源性 H2 S 生成时，体内

36、的 NO 水平升高，内皮细胞 eNOS 蛋白表达亦增高。也就是说，内源性的 NO / NOS 体系和 H2 S / CSE 体系在低氧性肺动脉高压形成中存在相互的负性调节作用。已知肺血管张力的调节就是依赖于血管壁不同类型细胞释放的血管收缩因子、舒张因子和生长因子之间9的反馈作用。而 NO 和 H2 S 这两种气体分子均为8扩张血管因子，亦均为抑制增殖因子 。因此，这种作用相似的气体信号分子的相互负性调节作用，在低氧性肺动脉高压形成中的意义非常重要，它避免了两种作用相似的因子呈同向变化，使机体能在病理状态达到一种新的平衡，避免了肺动脉压力过度升高，是机体的一种自我保护性调节。有关 NO 对 H2

37、 S / CSE 体系影响的研究，我们的研究结果与其他的学者并不相同。有学者通过离体的大鼠胸主动动脉与 NO 供体硝普钠共同孵育90 min，发现 H2 S 的生成量呈浓度依赖性地增加，并5发现 NO 的供体能增加 CSE 基因的转录水平 。我们的实验结果之所以与该学者不同，我们认为可能有 3 点原因：一是我们的实验是在体的整体动物实验，与离体实验有较大不同；二是我们的实验是在病理条件下的实验结果，与在离体的生理条件下的试北 京 大 学 学 报 （ 医 学 版 ）·56·JOURNAL OF PEKING UNIVERSITY（ HEALTH SCIENCES） Voi.

38、36 No. 1 Feb. 2004验也不同；三是上述实验是在离体的胸主动脉上得出的结果，而我们研究的是肺动脉。在低氧性肺动脉高压时，内源性 NO 对 H2 S / CSE 体系有抑制作用，但这种抑制作用的发生机制并不清楚。我们推测可能与以下因素有关：一是NO 是一种性质活泼的气体分子，而在 CSE 蛋白中又有一不稳定的巯基，因此 NO 可直接作用于 CSE蛋白，使其活性下降；二是 NO 能否通过其他信号传导途径（比如 cGMP 途径）来影响 CSE 的转录，尚需进一步的研究。内源性 H2 S 对 NO / NOS 体系的影响，尚未见相关报道。只是有人曾推测 H2 S 可抑制 NOS 的合2成

39、 ，而我们首次在整体动物模型上证实，在低氧性肺动脉高压时内源性 H2 S 可抑制肺动脉内皮细胞的 eNOS 表达，血浆 NO 含量下降。但是有关 H2 S抑制 eNOS 表达的作用机制尚需进一步研究。本研究从气体信号调节网络、细胞与细胞间直接对话这些崭新的视角出发，揭示出慢性低氧这一病理状态下内源性 NO 和 H2 S 的相互调节特点，即内源性的 NO / NOS 体系和 H2 S / CSE 体系在低氧性肺动脉高压形成中存在相互的负性调节作用。这为进一步深入研究低氧性肺动脉高压的发病机制提供了新的证据。气体信号分子 NO 对 H2 S 的相互抑制作用，在细胞和分子水平上，也可以代表构成血管的

40、两种主要细胞即内皮细胞和平滑肌细胞之间的对话，内皮细胞和平滑肌细胞通过各自所分泌的气体分子，以一种快速的安全的方式（气体信号具有迅速弥散并迅速消失的特点）相互调节。对于维持机体稳态具有重要的病理生理意义。参考文献1杜军保 . 缺氧性肺动脉高压 M. 北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1994. 792 Rui W. Two's company，three's a crowd：can H2 S be the third en-dogenous gaseous transmitter J？FASEB J，2002，16：1792 - 17983 Zhang CY，Du

41、JB，DF，et al. The reguiatory effect of hydrogen sui-fide on hypoxic puimonary hypertension in rats J. Biochem BiophysRes Commun，2003，302：810 - 8164 Lertratanangkoon K，Scimeca JM，Wei JN. Inhibition of giutathione synthesis with propargyigiycine enhances N-acetymethionine protec-tion and methyiation in bromobenzene-treated Syrian hamsters J. J Nutr，1999，129：649 - 6565 Zhao W，Zhang J，Lu Y，et al. The Vasoreiaxant effect of H2 S as a noVei endogenous gaseous KATP cha