【半硫丸毒性实验研究】急性毒性实验的研究内容

1、急性毒性实验的研究内容急性毒性实验的研究内容摘要 目的： 研究半硫丸的长期毒性作用。 方法： 通过预实验测出半硫丸的半数致死量（LD5Q）,分别给大鼠以1/10, 1/50 ,1/100的LD50剂量注射，持续3 个月，每日 1 次。结果：半硫丸大、中、小剂量组血常规、肾功能与正常对照组相比无显著性差异；心、脑、肾、甲状腺病理切片正常；半硫丸大剂量组肝功能与正常组相比有显著差异， 肝脏切片毒性损害明显。 中、 小剂量组正常。 结论：半硫丸的毒性随着剂量的增大， 毒性也呈增长趋势； 药物毒性作用的主要靶器官在肝脏上。关键词 半硫丸 长期毒性 实验研究半硫丸出自太平惠民和剂局方 ，由半夏、硫磺等量

2、研细末，加生姜汁适量，制成丸药，具有温肾助阳，通阳泄浊之功。本方在临床治疗甲状腺机能减退方面具有很好的应用前景。 导师陈如泉教授把它用治甲状腺功能减退的患者， 经过多年的临床观察， 证实疗效颇佳。 笔者前期进行的实验研究， 亦证明了它在治疗甲状腺机能减退方面独特的优势1 。为了对在临床使用该药治疗甲状腺机能减退症进行客观的安全性评价，有必要进行深入的毒理学研究。1 材料与方法1 1 实验动物：按中国新药研究的技术要求采用 Wistar 大鼠（华中科技大学同济医学院实验动物中心提供）作为实验对象，68周龄，体重200±21. 5g,雌雄各半。实验系统标记程序：大鼠每笼。5只，雌雄分开，

3、笼卡标明课题号、动物编号、组别、性别以及剂量水平。实验动物饲养1 周，饮食、饮水，活动正常，无不良反应即开始实验。1 . 2实验条件：实验室室温1825C,湿度40%60%,过滤送风，光照14h， 饲料由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供， 全部自由摄食及饮水，每日更换饮水瓶1次。每日8: 0011: 00给药。1 3 实验药物制备： 半硫丸由湖北中医学院附属医院药剂科制成， 每粒 0 5g， 用生理盐水配成3混悬液备用。1 4 实验分组及给药剂量与方法：将120只大鼠称重标记，随机分为大、中、 小剂量组及正常对照组 （每组 20 只） 。 通过上述实验所确定的 LD50 的剂量，试验中半

4、硫丸的高、 中、 低剂量分别采用 1/10 ， 1/50 ， 1/100 的 LD50 按组分别灌服不同剂量，不同浓度的药液，每次灌服0 5m1 ，每日1 次。持续 3 个月，处死一半实验动物， 停药 2 周后处死余下动物， 实验期间观察大鼠一般状况， 每 周测 1 次体重，根据体重调整药物剂量。1 5 仪器设备及试剂： 血液生化分析： 7020生化分析仪 （天本天立公司） 。试剂：尿素氮：上海长征康仁医学科学有限公司。谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酐：上海申能生化技术有限公司。1 . 6观察指标：一般情况：观察动物实验前后活动、毛发、粪便性状及 进食量等情况。每周称重1次，并按体重调整给药量。血

5、液生化学检查项目： 最后一次用药后，禁食不禁水24h 后每组取 10 只大鼠的眼眶取血，做血象（血红蛋白、红细胞、白细胞、血小板）和肝功能（谷丙转氨酶、谷草转氨酶） 、肾 功能（尿素氮、肌酐）等生化指标。剩余动物停药后，继续饲养作可逆性观察2周。 之后相关检查同前。 病理组织学检查： 分别于给药3 个月时和停药2 周时处死大鼠， 然后系统尸解取脏器 （肝、 心、 脾、 肺、 肾、 脑、 子宫、 睾丸、 卵巢、 附睾） ，生理盐水冲洗掉表面的血污，依次经过10中性福尔马林固定、组织修切、石蜡包埋、常规切片、HE染色、酒精梯度退色、透明、封片，光学显微镜观 察。1 . 7统计方法：实验数据应用SP

6、SSB件进行方差分析，F检验。各组间均 值比较采用q检验。结果用均数土标准差（x±s）表示，显著性水准及结果判断 按通用的假设检验标准。2 结果2 1 一般情况：在整个实验过程中，正常对照组以及半硫丸中、小剂量组 均未见动物死亡，进食活动有规律，皮毛有光泽；半硫丸大剂量组死亡 5 只，灌 胃过程中逐渐出现精神萎靡， 毛发蓬乱且发黄， 失去原来光泽。 各组体重饮食方 面变化基本一致。2 2 动物血常规变化情况： 结果见表 1。 经统计学处理， 各用药组与正常对照组比较用药前及停药 2 周后，均无显著性差异（ P>0 05） ，各组数据均在正常 范围。2 3 对大鼠肝肾功能的影响：

7、结果见表2。经统计学处理，肝功能的测定中，中、小剂量组与正常对照组无显著性差异（ P>0 05） ，与实验后再饲养2 周的结果也无明显性差异（P>0 05） ，各组数值均在正常范围内。大剂量组与正常对照组有显著性差异（P0 05） ，各组数值均超出正常范围。各组的。肾脏功能与对照组无显著性差异（P>0 05） 。3 4 病理学检查：放血处死各组动物后，尸解对脏器进行肉眼观察未发现异常现象。对肝、肾、心、脑、甲状腺等实质脏器进行病理组织学检查。结果表明： 大剂量组可见不同程度的肝细胞浊肿变性， 部分区域可见炎性细胞浸润， 肾 脏内可见部分肾小管水肿变性。其它各组未见明显异常。4 讨论实验结果表明，半硫丸对大鼠血红蛋白、白细胞总数、红细胞总数、血小板总数无显著性差异（ P>0 05） ，说明半硫丸的毒性对血常规的影响并不大；至于心、 脑、 甲状腺病理切片的各组的实验数据在正常范围之内， 说明了半硫丸的毒